UNIVERSIDAD AUTNOMA DE NAYARIT

Unidad Acadmica de Ciencias Qumico Biolgicas y Farmacuticas

Toxicologa Fundamental
Prctica de Laboratorio: Fertilizacin In vitro
Equipo:
ANA MARIA ESTRADA NUEZ MARIANO IVAN GALLARDO MALDONADO CLAUDIA MARTINEZ ELIAS EUNICE CORTES RODRIGUEZ ERIK DANIEL SAINEZ ZAMBRANO ALFREDO GARCIA GUERRERO

INTRODUCCION:
La infertilidad es la incapacidad para mantener o conseguir un embarazo- Es una enfermedad en el usual sentido de la palabra. No es un sntoma o afeccin que impide el bienestar fsico de individuos o parejas infrtiles. Sin embargo el deseo de tener un hijo es excepcionalmente fuerte por razones biolgicas y sociales. No hay definicin precisa de infertilidad, En su lugar, la infertilidad es la ausencia de embarazo despus de un tiempo apropiado de intento de concepcin mediante relacione sexuales regulares. (Gilbert, 2007)

Inseminacin In Vitro Es una tecnologa de reproduccin asistida en la que se fecundan uno o varios vulos fuera del organismo materno. La fertilizacin in vitro se ha logrado en prcticamente todas las especies y el ser humano. Para obtener los vulos que sern luego fertilizados, se realiza la estimulacin farmacolgica de la ovulacin, mediante la administracin de la hormona FSH y un control estricto del ciclo estral (animales) o menstrual (humanos) mediante la determinacin de los niveles hormonales y seguimiento ecogrfico (ultrasonido) del desarrollo folicular de los ovarios. A diferencia de lo que ocurre en un ciclo normal, mediante la estimulacin ovrica con frmacos, se pretende obtener varios vulos maduros al mismo tiempo, esto permite optimizar el proceso y ahorrar nuevos ciclos en caso de que no se consiga la gestacin en un primer intento. La fecundacin in vitro se ha llevado acabo con xito en casos de infertilidad provocada por obstruccin de oviductos, utilizando para tal fin oocitos procedentes de folculos preovulatorios de mujeres con ciclos menstruales normales, o por oligoespermia. Por otra parte se ha resaltado el posible uso de la FIV en casos de alto riesgo gentico para prevenir posibles defectos de nacimiento, si bien esta aplicacin podra obtenerse en un futuro ms o menos legado ya que es necesario un perfeccionamiento de los mtodos de cultivo y biopsia de los embriones.

RESULTADOS:
Aqu se presentan algunas imgenes que se pudieron observar en el microscopio de los espermatozoides de ratn macho al igual que vulos de los ratones hembras que fueron tratadas con la hormona de FSH

Microscopia de espermatozoides de ratn

Microscopia de vulos de ratn hembra

Discusin.
La Fecundacin in vitro El crecimiento folicular se controla combinando anlisis seriados de estradiol en sangre y ecografas de los ovarios. Al comprobar que el nmero y tamao de los folculos es el adecuado, se desencadena su maduracin mediante una inyeccin de LH. Unas 36 horas despus se realiza la captacin folicular mediante puncin guiada ecograficante (lo ms frecuente) o mediante laparoscopia (introduccin de un sistema ptico y quirrgico por una incisin de 1 2 cm en la pared abdominal). Los ovocitos obtenidos son estudiados y completan su maduracin en un medio de cultivo, los vulos seleccionados se mantienen en un medio lquido especial al que se aaden el semen previamente capacitado. Despus de 18 horas se extraen los vulos, se cultivan en un medio adecuado y se examinan 40 horas despus. Hay una probabilidad de 40 50% de fecundacin de los vulos.(E. Martnez,1989) Los vulos fecundados y con desarrollo embrionario normal se implantan en el tero materno. Por lo general, se transfiere mltiples embriones para incrementar la probabilidad de gestacin, si hay ms de cuatro embriones normales se pueden congelar algunos para futuros intentos. Solo hasta cuatro embriones son transferidos al tero de la madre, para disminuir el riesgo de embarazos mltiples. Tras la implantacin, se administran inyecciones de progesterona. La probabilidad de que una gestacin llegue a trmino es de 20%. El medio especial para incubar los vulos y espermatozoides debe contener concentraciones adecuadas de sales de calcio, osmolaridad y pH ptimos y tambin contener albumina, piruvato, lactato y antibiticos. La tcnica permite a su vez, la utilizacin mas eficiente del semen, particularmente aquel de valor gentico y alto costo. La fertilizacin in vitro tambin es empleada para estudiar los diferentes aspectos fisiolgicos y morfolgicos del proceso de fertilizacin.

La FIV tiene 4 pasos esenciales: Estimulacin y monitoreo Ovrico. Al tener varios ovocitos maduros viables para FIV se incremente la posibilidad de que al menos uno resultara en un embarazo. Tpicamente, las gonadotrofinas o antiestrgenos son utilizados para Hiperestimular a los ovarios y producir varios ovocitos maduros. Recuperacin del ovocito Una vez que el folculo ha madurado (pero todava no se ha roto), el medico trata de recuperar tantos ovocitos como le sea posible. Aunque ellos son denominados frecuentemente vulos, los gametos femeninos cerca de ser ovulados estn en realidad en metafase II (ovocitos). El medico recupera a los ovocitos al guiar una pipeta de aspiracin para cada folculo maduro y aspirar al ovocito. Una vez que se recupera el ovocito, los que estn maduros y sanos son trasferidos a un recipiente estril para esperar a la fecundacin en el laboratorio. Fecundacin A una muestra de semen es recogida del progenitor masculino aproximadamente 2 horas antes de la recuperacin del ovocito del progenitor femenino. Estos espermatozoides luego son procesados (un Procedimiento denominado lavado de espermatozoides) utilizando varias tcnicas. El lavado de espermatozoides capacita a los espermatozoides y selecciona solo los espermatozoides ms sanos y ms activos de la muestra. Los espermatozoides seleccionados luego son colocados en una placa de petri con los ovocitos, y los gametos son incubados a la temperatura Corporal. Si la fecundacin es exitosa, los cigotos comenzaran a dividirse y el embrin resultante poco tiempo despus estar listo para ser transferido hacia el tero Transferencia del embrin. La transferencia del embrin no es un procedimiento complicado y puede llevarse acabo sin anestesia. Los embriones son colocados en un instrumento tubular denominado catter. El mdico entonces inserta el catter a travs de la vagina y del cuello uterino del progenitor femenino con la finalidad de colocar al embrin directamente en el tero. Para alcanzar el embarazo se requiere la implantacin y maduracin normal de, al menos, un embrin. (Gilbert, 2007)

CONCLUSION
Por cuestiones de tiempo y algunos detalles no pudimos hacer la practica por completo, la mayor parte fue demostrativa pero pudimos observar como es el proceso para obtener los espermatozoides del ratn macho y los observamos al microscopio, al igual que el proceso para obtener los ovarios del ratn hembra y tambin los observamos al microscopio. Esta tcnica ha tomado mucha importancia ya que cuando las parejas por alguna razn no pueden ser padres de manera natural buscan otra manera para serlo y esta tcnica es una de ellas.

Bibliografa Gilbert Scott F. Biologa del Desarrollo, Fecundacin in Vitro 7 ed. Buenos Aires Argentina, Edit. Panamericana. Pg. 728. 729

E. Martinez,, S. Ruiz, J. Roca y J. M. Vazquez Fecundacin in Vitro en los animales de granja, El Gameto femenino y fecundacin in Vitro Universidad De Murcia. 1989 Cuaderno 22. Pagina 3559

E. Martinez,, S. Ruiz, J. Roca y J. M. Vazquez Fecundacin in Vitro en los animales de granja, El Gametomasculino y fecundacin in Vitro Universidad De Murcia. 1989 Cuaderno 22. Pagina 14 31