No hay una temperatura ptima para los ensayos enzimticos.

La mayora de las enzimas muestran un aumento en su actividad a medida que se eleva la temperatura en un rango limitado de temperatura, tal como de 10 a 40 C: un ejemplo es una muestra en la figura. 54-9. Para reducir al mnimo las prdidas de actividad si la enzima no puede analizarse inmediatamente despus de la recoleccin, se debe almacenar las muestras a temperaturas de refrigeracin, de 2 a 6 C, o congeladas. En unos pocos casos, algunas formas de enzima, tales como LD4 y LD3, han sido ms estables a temperatura ambiente que a temperaturas de refrigeracin. La congelacin y descongelacin repetida de una muestra a menudo causar la desnaturalizacin y prdida de actividad. Por encima de 40 C la mayora de las enzimas son rpidamente desnaturalizadas y pierden casi toda la actividad despus de un corto perodo de tiempo. Una excepcin a esta regla general es la amilasa, que parece ser estable hasta aproximadamente 60 C antes de que ocurran prdidas significativas de actividad. Para muchas enzimas a 1 Celsius grado de cambio en la temperatura producira un cambio del 10% en la actividad. Se recomienda una tolerancia de +-0,1 grados Celsius de la temperatura control de un analizador de enzima, ya que esto producir aproximadamente un cambio de +-1% en la actividad que se midi. Esta cantidad de variacin sera lo suficientemente pequeo para ser ignorada como una fuente insignificante de error para la mayora del trabajo clnico. Una recomendacin de + -0,05 grados celsius para el control de la temperatura, la cual podra reducir el cambio en la actividad de + -0,5%, tambin se ha sugerido. El aparente aumento en la actividad al aumentar la temperatura significa que los ensayos que se realizan a temperaturas ms altas, tales como 37 C, ser ms sensible a ligeros cambios en la cantidad de enzima en una muestra. Las enzimas comunes empleadas para el diagnstico clnico son menos estables a esta temperatura que a 25 a 30 C, y por lo tanto llevan a cabo ensayos de AT37 C debe ser realizado con ensayos de tiempos relativamente cortos, de modo que se reduce al mnimo la desnaturalizacin enzimtica. Los argumentos a favor del uso de las temperaturas ms altas, es decir, 37 C, y temperaturas ms bajas, es decir, 25 C, se han presentado se basa principalmente en el razonamiento cientfico y tcnico. Un compromiso razonable parece ser la medida a 30 C, que es la recomendacin de la Federacin Internacional de Qumica Clnica (IFCC). Una clula de punto de fusin estndar galio muy precisa ya est disponible para todos los laboratorios del Instituto Nacional de Estndares y Tecnologa. Este materrial tiene una meseta de temperatura de fusin de 29.772 y se puede utilizar para calibrar o comprobar la temperatura de ensayo de una amplia variedad de instrumentos.