Acta zoológica lilloana 51 (2): 161–163, 2007 161

COMUNICACIÓN

Polimorfismo de α s1Caseína de vicuña (Vicugna vicugna)

Graciela Ruiz de Bigliardo 1-2 , María Eugenia Pérez 1 , Marcela Beatriz

Hernández 1-2 y Francisco Fernández 2
1 Fundación Miguel Lillo, Miguel Lillo 251, Tucumán.
2 Facultad de Ciencias Naturales e IML, Universidad Nacional de Tucumán.

A B S T R A C T — “Polymorphism of α s1 Caseín of the vicuna (Vicugna vicugna)”. Electro-

phoretic analysis of casein samples from vicuna milk, in polyacrylamide gel containing urea,
was carried out. Results showed a polymorphism in one of the principal proteins revealing
three patterns, one of them containing two bands (A and B), the other two with only
one of these, either A or B. Different positions are due to distinct electric charges of
corresponding molecules. Migration of polymorphic bands correspond to calcium sensitive
α s1 Caseín according to the assay conditions of electrophoresis. This is the first time that
a vicuna casein polymorphism is reported.
K EYWORDS : Vicugna; protein polymorphism; α s1 -casein.
P ALABRAS CLAVE : Vicuña; polimorfismo proteínico; α s1 -caseína.

Las proteínas de la secreción láctea pre-
sentan varios tipos de polimorfismos, los
más comunes corresponden a variantes gené-
ticas de tipo mendelianas que representan la
presencia de dos o más alelos. En este grupo
la mayor parte de los estudios se han centra-
do, históricamente, sobre los polimorfismos
que se presentan en las especies domésticas
de ganado lechero (Addeo et al., 1983; Ci-
tek y Maskova, 1997). Se destacan especial-
mente las variantes genéticas de β-Cn, α-
Cns y κ-Cn en bovinos (Davoli et al., 1990;
Ojala et al., 1997; Schaar, 1995) y las co-
rrespondientes a αs1-Cn en caprinos por es-
tar asociadas a caracteres de producción
(Grosclaude et al., 1987). A los polimorfis-
mos genéticos se deben agregar los post-tra-
duccionales (Ginger y Grigor, 1999;
O’Donnell et al., 2004) que han demostrado
constituir la principal fuente de variación. En
los mamíferos silvestres, si bien existen va-
rias referencias a la existencia de polimorfis-
mos genéticos de lactoproteínas, éstos se re-
fieren a estudios sobre polimorfismos genó-
micos, por ejemplo en la secuencia de nu-
cleótidos (Ward et al., 1997) y su número
puede calificarse de exiguo frente la gran
cantidad de estudios y de variantes detecta-
Recibido: 22/05/08 – Aceptado: 10/07/08
das en las especies domésticas. Ello se debe
seguramente a dos causas, el hecho de ser,
estas últimas especies, muy estudiadas por su
interés económico y por constituir las espe-
cies domésticas poblaciones en las cuales las
variaciones y las cargas genéticas son con-
servadas ó mejor toleradas, por estar prote-
gidas. Entre los camélidos domesticados se
han mencionado, entre otros polimorfismos
genéticos de lactoproteínas detectados por
electroenfoque (Wangoh, et al., 1998).
Respecto a la vicuña no hemos encontra-
do en la bibliografía ninguna referencia
acerca de la existencia de polimorfismos en
lactoproteínas. Nuestro hallazgo se ha pro-
ducido durante el estudio de los tipos de ca-
seínas y sus características en esta especie,
en muestras de leche de una población de
animales pertenecientes a la Estación Experi-
mental del INTA de Abra Pampa, Jujuy, Ar-
gentina. Las caseínas de las muestras de le-
che se precipitaron en buffer acetato de so-
dio 0,5 M a pH 4,3, se lavaron varias veces
con el mismo buffer, se disolvieron en urea 5
M y se sometieron a electroforesis en geles
de poliacrilamida 10 % en presencia de urea
5 M sin SDS para investigar su comporta-
miento en función de las diferencias de car-
gas eléctricas entre las distintas proteínas.
Las corridas electroforéticas se llevaron a
162 G. Ruiz de Bigliardo et al.: Polimorfismo de α s1 Caseína de vicuña (Vicugna vicugna)
cabo a 15 mA durante 2 horas. Se sembra-
ron unos 20 µg de proteínas por pocillo. Los
geles fueron teñidos con Coomassie blue. A
partir de los estudios que estamos llevando a
cabo (Ruiz de Bigliardo et al., inédito) y
otros realizados anteriormente (Fernández et
al. 1997; Fernández y Hernández, 2006;
Hernández y Fernández, 2007) hemos com-
probado que las tres principales caseínas de
vicuña, β-Cn, αs1-Cn y κ-Cn, cuyas masas
moleculares oscilan entre 25 y 35 kDa, se
comportaban, en las corridas electroforéti-
cas en los medios desnaturalizantes mencio-
nados, de la misma forma que las corres-
pondientes al resto de los camélidos sudame-
ricanos, y en forma similar a los camélidos
del viejo mundo (Otani et al., 2004). En lo
que respecta a variación entre individuos
hemos detectado dos tipos de polimorfismos,
por una parte los correspondientes a las dife-
rencias que implican a bandas proteicas pe-
queñas en cuanto a la intensidad observada
(microbandas); y por otra parte las que ata-
ñen a las bandas de caseína de mayor inten-
sidad. Cabe mencionar que la presencia de
microbandas (ó microheterogeneidad) es
generada por mecanismos post-traducciona-
les de fosforilación ó glicosilación (Baranyi
et al., 1995; Egito et al., 2002). En la leche
de vicuña, en las condiciones en que se llevó
a cabo la electroforesis mostrada en la Figu-
ra 1, son visibles dos bandas mayores, pues-
to que la banda de la κ-Cn es más tenue y se
Fig. 1. Electroforesis de caseínas de vicuña
en presencia de urea correspondiente a
muestras de seis animales. Las muestras A
y B son homocigotas de la variante rápida,
las muestras C y F son homocigotas de la
variante lenta y las muestras D y E son hete-
rocigotas. La primera calle (V) corresponde a
β-caseína bovina. El ánodo se encuentra en la
parte inferior del gel de la figura.
superpone parcialmente con una de las ban-
das mayores. Cabe mencionar que la canti-
dad de κ-Cn existente en la leche es menor a
una décima parte de lo correspondiente a las
otras caseínas. Asimismo los resultados de la
digitalización de las imágenes de los geles
mostraron que cada una de las denominadas
microbandas, que en total dan un promedio
de 10, da cuenta de un 2% aproximadamen-
te de la cantidad total de proteína caseínica.
Estas determinaciones demostraron que, de
las dos bandas mayores, la β-Cn constituye
cerca de un 30% y la αs1-Cn suma un 51%
del total. En la Figura 1 se muestra la foto-
grafía de una electroforesis en gel de polia-
crilamida con urea 5 M, correspondientes a
las muestras de seis animales distintos, en la
cual se ha graduado la cantidad de proteína
a los efectos que solamente las bandas ma-
yores sean notorias. Las bandas de la fila
superior corresponden a la β-Cn, mientras
que las de la fila inferior corresponden a la
αs1-Cn. Como se puede observar, en estas
condiciones todas las bandas de β-Cn tienen
una posición similar como así también lo es
el grueso de la banda, salvo las muestras C
y F. Estas dos muestras exhiben una banda
menor, más rápida, asociada a la β-Cn, la
cual consideramos que es la κ-caseína, que
como hemos mencionado se superpone con
la primera. Por otra parte las bandas de
αs1-Cn muestran tres disposiciones diferentes
que se pueden ejemplificar en las muestras B,
C y D. La banda de B ha corrido más que la
de C, por una parte, y la de D es más gruesa
y abarca la suma de B y C. Este patrón es
compatible con la existencia de dos alelos
para la αs1-Cn, siendo el ejemplar B homo-
cigota para la proteína más rápida, el ejem-
plar C homocigota para la más lenta y el D
heterocigota puesto que contiene ambas pro-
teínas. Debido a que las electroforesis se
han llevado a cabo en presencia de urea, la
diferente migración corresponde a una dife-
rencia de carga que debe estar producida
por uno o más aminoácidos en las cadenas
polipeptídicas.
Es por ello que consideramos que la va-
riación encontrada corresponde a un poli-
morfismo genético y que existen dos formas
Acta zoológica lilloana 51 (2): 161–163, 2007
alélicas de la αs1-Cn. Ello no elimina la po-
sibilidad de la existencia otras formas de
variación, como los que corresponderían a
distintos grados de fosforilación, los cuales
producen microbandas. De acuerdo a la in-
formación que manejamos, la presente co-
municación constituiría la primera vez que
se describe un polimorfismo de caseínas de
base genética en esta especie.
AGRADECIMIENTOS
A la Estación Experimental INTA de Abra
Pampa por las muestras de leche; al Sr. Geró-
nimo Fernández por el trabajo informático.
Al Consejo de Investigaciones de la Uni-
versidad Nacional de Tucumán, por el apoyo
recibido a través del subsidio G308 oportu-
namente otorgado.
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