Manual de Procedimientos Tcnicos de Laboratorio Clnico del Primer Nivel de Atencin

PRUEBA DIRECTA EN TUBOPRUEBA DIRECTA EN TUBO 9.5.1. PROPSITO:

Investigar en la sangre la presencia o ausencia de los antgenos A, B y Rh que se localizan en la superficie de los glbulos rojos, utilizando anticuerpos especficos para cada uno de ellos.

9.5.2. MUESTRA REQUERIDA:

1 mL de Sangre completa con o sin anticoagulante.

9.5.3. MATERIALES Y REACTIVOS:

- Tubos de ensayo 12 x 75 mm. - Gradilla para tubos. - Puntas plsticas. - Pipeta Pasteur con bulbo o pipeta transfer. - Aplicadores de madera. - Frasco lavador. - Marcador de vidrio. - Guantes descartables. - Papel toalla. - Solucin salina 0.85%. - Antisuero A. - AntisueroB. - Antisuero RH (anti-D).

9.5.4. EQUIPO:
- Macrocentrfuga. - Reloj marcador. - Pipetas automticas. - Lmpara para lectura de aglutinacin.

9.5.5. PROCEDIMIENTO:

- Identificar previamente los tubos. - Depositar 2-3 gotas de sangre en un tubo. - Realizar 3 veces el lavado de clulas de la siguiente manera: a) Agregar 1 mL de solucin salina 0.85%. b) Mezclar y llenar con solucin salina 0.85% el tubo hasta 3/4 partes. c) Centrifugar por 2 minutos a 3400 rpm . d) Descartar toda la solucin salina quedando en el fondo un paquete de glbulos rojos. - Preparar una suspensin al 5%, colocando una gota de los glbulos rojos lavados y 19 gotas de solucin salina y mezclar. - Rotular 3 tubos con las letras A, B, Rh por cada muestra a analizar, a cada uno agregar una gota de glbulos rojos al 5%. - Depositar los antisueros respectivos: a) Tubo A antisuero A. b) Tubo B antisuero B. c) Tubo Rh antisuero D. - Centrifugar 15 segundos a 3400 rpm . - Leer la presencia o ausencia de aglutinacin agitando suavemente los tubos.

9.5.6. FUENTES DE ERROR:

- Reactivos vencidos o deteriorados. - No llevar a temperatura ambiente los reactivos. - Hemlisis de los glbulos rojos por mezcla inadecuada. - Presencia de enfermedades autoinmunes. - Iluminacin inadecuada en el momento de la lectura. - Dilucin inadecuada de los glbulos rojos.

9.5.7. FORMA DE REPORTE:

Se reporta: Grupo A: si aglutina el tubo marcado A. Grupo B: si aglutina el tubo marcado B. Grupo O: si no aglutinan los tubos marcados A y B. Grupo AB: si aglutinan los tubos marcados A y B.

9.5.8. RESPONSABLE:

Profesional en Laboratorio Clnico o Laboratorista.