ENTENDIENDO EL PROCEDIMIENTO DE LA COLORACIN DE GRAM Demostramos abajo las etapas que ocurren en el proceso de la coloracin de Gram, del lado

izquierdo el procedimiento con organismos Gram positivos y del lado derecho el proceso con organismos Gram negativos. A partir de un frotis fijado los organismos no presentan color, en la fase inicial todas las bacterias son teidas con un colorante bsico (cristal violeta), las bacterias son tratadas con solucin de yodo mordiente que permite la retencin del colorante debido a la formacin del complejo violeta-yodo, en esta etapa todas las bacterias estn teidas de color violeta o morado, una teora actual demuestra que el complejo violeta-yodo forma una molcula grande que se precipita dentro de la clula. La descoloracin por una mezcla de alcohol etlico mas acetona es realizada en el frotis, esta etapa es diferencial, donde las bacterias Gram positivas por accin del alcohol acetona promueve la deshidratacin del pectidoglicano disminuyendo el espacio dentro de la clula y haciendo que las mismas contenga complejo violeta-yodo. Para el caso de las bacterias Gram negativas la mezcla alcohol acetona siendo un solvente lpido, disuelve la membrana exterior de la pared celular y puede perjudicar la membrana citoplasmtica as la camada de peptidoglicano es incapaz de retener el complejo violeta yodo y la clula se torna descolorada. En la fase final se aplica safranina, colorante bsico como contraste que acta sobre las bacterias Gram negativas. Resultado final, bacterias Gram positivas en el frotis se presentan en el color violeta o morado, bacterias Gram negativas en el frotis se presentan de color rojo.