En 1953, James Watson y Francis Crick publicaron

el primer modelo estructural de la molcula de ADN,

(Premio Nobel de Medicina en 1962)
Unidad bsica: nucletido
Los peldaos formados por los nucletidos son complementarios.
La posicin de una A en una de las cadenas se corresponde con
una T en la otra cadena...

De igual forma, la posicin de una G en una de las cadenas se

corresponde con una C en la misma posicin de la otra cadena.
El esquema de este dogma ha sido encontrado repetidamente
y se considera una regla general (salvo en los retrovirus)

Protena
Severo Ochoa descubre la ARN polimerasa y sintetiza por primera vez
in vitro una molcula de ARN
(Premio Nobel de Fisiologa y Medicina en 1959)

Nirenberg y Khorana descifran el cdigo gentico

(Premio Nobel de Medicina en 1968)
El cdigo gentico est compuesto por codones 61 codones para aminocidos
(codon= 3 bases nitrogenadas) que definen el (existen 20 aminocidos diferentes)
3 codones de terminacin
proceso de traduccin

El cdigo gentico es
universal

El cdigo gentico es
redundante (varios
codones para un mismo
aminocido)

Ejemplo: El aminocido
glicina est codificado
por GGU, GGC, GGA y
GGG
Obtencin de organismos genticamente idnticos

En el campo de la Ingeniera gentica consiste

en aislar y multiplicar un gen, o en general,
un trozo de ADN

En Animales superiores consiste en obtener un

individuo a partir de una clula o de un nucleo
de otro individuo
Conjunto de tcnicas nacidas de la Biologa molecular
que permiten manipular el genoma de un ser vivo cromosoma
gen

Homo sapiens

Mediante la ingeniera
Escherichia coli gentica se pueden introducir genes
en el genoma de un individuo que carece de ellos
 Aislamiento y manipulacin de fragmentos
de ADN de un organismo para introducirlo
en otro (ADN recombinante)

Nathans D., Arber W., y Smith H. (premio Nobel de Fisiologa

y Medicina en 1978 por el descubrimiento de las enzimas de
restriccin y su aplicacin en Gentica Molecular)
Molcula A Molcula B

Digestin de ambas molculas con la

misma enzima de restriccin, BamHI

Extremos
cohesivos

Mezclar

Tratar con ADN-ligasa

ADN recombinante
En 1983 Kary Mullis da a conocer esta tcnica y en 1993 recibi el Premio Nobel de Qumica por este descubrimiento

Es un proceso cclico
(cada ciclo consta de 3 pasos)

94C desnaturalizacin (separacin

de las dos hebras de ADN)

50C Anillamiento de "cebadores"

72C copia de cada una de las

hebras de ADN por la ADN
polimerasa

35 ciclos 236= 68 billones de copias

1

Plsmido
Plsmidos
gen de resistencia
a la ampicilina

2 3

Extremos cohesivos

Molcula de ADN recombinante

Plsmido
1

Virus

2 3
Ciclo lisognico

Ciclo ltico
(f) (g) (h)
Genoma de hongos: 44 millones de pares de bases
Huesped: Escherichia coli
Vector: Bacterifagos
capacidad: 20 mil pares de bases

Genoma humano: 3000 millones de pares de bases

Huesped: Saccharomyces cerevisiae
Vector: YAC (cromosoma artificial de levadura)
MegaYAC (capacidad: 1 milln de pares de bases)
 ACTTTGTCCACGGCCTAAGCGTTTTTTGCCC
Secuenciacin AGTGACTTTGTCCAAC
GTCCAACAGTTACCAAGTGACTTTGTCCAC TTTTGCCC
de genomas AGTGACTTTGTCCA ACGGCCTAAGCGTTTTTTTT

ALINEAMIENTO DE TODAS LAS SECUENCIAS Y RECONSTRUCCIN DEL CROMOSOMA

Deteccin de mutaciones
Mtodo de diagnstico rutinario (relacin entre enfermedad y mutacin puntual)

Secuenciacin de ADNs fsiles

Posibilidad de aislar secuencias de ADN a partir de unas pocas copias (la mayora
estn daadas o degradadas)

Diagnstico de enfermedades genticas

Diagnstico prenatal / Diagnstico preimplantacin de enfermedades hereditarias o
determinacin del sexo del feto previamente a su implantacin en procesos de
fecundacin in vitro

Identificacin de especies y control de cruces entre animales

Para descubrir fraudes comerciales, tales como vender carne de una especie ms
barata a los precios de otra ms cara, o el comercio ilegal de especies en peligro

Secuenciacin de genomas
Conocimiento bsico y aplicado de diferentes organismos (incluido el genoma humano)
16 de Febrero de 2001
Celera Genomics

Proyecto genoma humano

La secuencia del genoma es un atajo valioso: ayuda a los
cientficos a encontrar los genes ms fcil y rpidamente
y sienta las bases para averiguar la funcin de los genes
identificados

Beneficios mdicos tras el conocimiento de la

estructura de cada gen humano

1. Diagnstico en individuos con riesgo de ser

portadores del gen de alguna enfermedad

2. Marco de trabajo para el desarrollo de

nuevas terapias, adems de nuevas
estrategias para la terapia gnica

15 de Febrero de 2001
Consorcio pblico internacional
Obtencin de protenas de inters mdico, comercial, etc...
(insulina, hormona del crecimiento, factores de coagulacin antes se obtenan
a partir de los tejidos que las producen o fluidos corporales)
Obtencin de vacunas recombinantes
(aternativa al uso de organismos patgenos inactivos)
Extraccin del ADN
del virus

Integracin del
plsmido hbrido
en el ncleo de una
ADN clula de levadura

plsmido
bacteriano

La levadura fabrica las

protenas vricas
con poder inmunolgico

Inyeccin de protenas
vricas en un chimpanc
 Mediante ingeniera gentica
se construye una sonda de
Diagnstico de enfermedades de origen gentico ADN, marcada (marcaje
fluorescente), con la
secuencia complementaria del
ADN enfermo
ADN sano

ADN enfermo
ADN complementario
del ADN enfermo
Conocimiento previo de
la secuencia de ADN DIAGNSTICO
enfermo

Si aparecen bandas
fluorescentes
demuestra que la
persona presenta la
Biochip anomala
Microarray
Hibridacin? Renaturalizacin Desnatura ADN de la
DNAchip
No hibridacin? del ADN con la lizacin persona que se
sonda del ADN quiere diagnosticar
fluorescente
 Plantas transgnicas Agrobacterium tumefaciens es patgena de plantas.Produce tumores

Agrobacterium
ncleo
Plsmido Ti
inductor de tumores cromosoma
contiene oncogenes
Transgnesis= introduccin de (genes onc)
ADN extrao en un genoma, de
modo que se mantenga estable de
forma hereditaria y afecte a
todas las clulas en los organismos cromosoma
multicelulares.
clula
Ingeniero vegetal
gentico
natural tras
sutitucin de tumores
genes onc por Proliferacin de
genes de hormonas
inters crecimiento. Se
forman tumores en
las zonas de la
lesin
Resistencia a herbicidas, insectos y enfermedades microbianas
El maz transgnico de Novartis es resistente al herbicida Basta y tambin es
resistente al gusano barrenador europeo (contiene el Gen de resistencia a la
toxina Bt de Bacillus thuringiensis) produce su propio insecticida

Problemas:La toxina Bt en las plantas transgnicas tiene propiedades

sustancialmente diferentes a la toxina Bt en su forma natural.
La toxina puede ser transmitida a travs de la cadena alimenticia, un
efecto que nunca ha sido observado en la toxina Bt en su forma natural.
Larvas de especies de insectos predadores benficos (larvas verdes de
crisopa) murieron cuando fueron alimentadas con el gusano barrenador
europeo

Gold rice de Monsanto con color amarillo por los altos niveles de vitamina A

Mejora de la calidad de los productos agrcolas

Produccin de aceites modificados

Sntesis de productos de inters comercial

Anticuerpos animales, interfern, e incluso elementos de un polister destinado a la fabricacin
de plsticos biodegradables
Transgnesis en animales (por microinyeccin de zigotos)

Secuencia promotora para

la sntesis de una protena
Gen humano de la leche

Gen hbrido

humano rata

Ovulos de cerda
fecundados

Desarrollo de una cerda transgnica

Clonacin de animales
(TRANSFERENCIA NUCLEAR DE CLULAS EMBRIONARIAS)
Clonacin de animales
(TRANSFERENCIA DEL NCLEO DE UNA CELULA SOMATICA: CLULA DIFERENCIADA)
Clonan terneros en EE UU para producir anticuerpos
humanos

efe- Washington - agosto 2002

Terneros clonados y manipulados genticamente (fbrica de anticuerpos humanos)

genes para anticuerpos clulas drmicas clonacin

humanos recombinantes

Objetivo: Tratamiento de enfermedades inmunolgicas

Futuro: Tratamiento de una amplia gama de enfermedades ocasionadas por

bacterias y virus, como hepatitis, ntrax (utilizada como arma biolgica)
Clonan cerdos destinados a trasplantar sus rganos a
humanos

La empresa escocesa PPL Therapeutics logra

retirar de los cerditos el gen que provoca el
rechazo en transplantes a humanos "alfa 1,3
galactosil transferasa"

Enero 2002. AP Photo/Roanoke Times, Gene Dalton (IDEAL-EFE)

Paso importante en favor del xenotrasplante (transferencia de clulas u

rganos de una especie a otra)

Ayudar a superar la escasez de rganos humanos para hacer trasplantes de

todo tipo
Un laboratorio de Texas clona al primer animal
domstico
"Copycat" es el primer gatito nacido mediante clonacin"

El experimento abre las puertas de la clonacin masiva de

animales domsticos, un fin sin explorar cuya sola
posibilidad haba desencadenado ya el almacenamiento
de clulas de mascotas por parte de sus ricos propietarios

febrero 2002 Universidad College Station (Texas)

El sexto da

El ataque de los clones

La clonacin humana ya se
est intentando de forma
clandestina por varios
La clonacin reproductiva no arroja
laboratorios en el mundo
los resultados suficientes, no existen
garantas como para decir 'Vamos a
clonar un ser humano'

Por cada intento de clonacin

hay detrs miles de fallos, Para obtener a Dolly: 277 fusiones
abortos y malformaciones de ovocitos con clulas mamarias, solo
genticas 29 embriones fueron aptos. De estos
solo uno result un xito
 CREACIN DE UN EMBRIN ARTIFICIAL
(con clulas adultas)

-embrin somtico-

OBJETIVO LTIMO: TRATAMIENTO de ENFERMEDADES OBJETIVO LTIMO: AUTOTRASPLANTES

(no hay rechazo)
1 Cultivo de blastocisto

Fecundacin

2 Eliminacin de la capa externa

Embrin temprano

3 Adicin de sustancias Fusin de clula somtica

que disgregan la masa y ovulo enucleado
celular interna

En caso de existir deficiencias a nivel

gentico se puede hacer terpia gnica
6 Adicin de factores de a nivel de clulas madre
4 Transferencia de los agregados diferenciacin
celulares a un nuevo pozo seleccionados

7 Administracin de
clulas diferenciadas a
tejidos daados
5 Formacin de clulas
diferenciadas a tejidos
daados
Las clulas madre abren la posibilidad a un nuevo mundo en
las terapias de los trasplantes

Calificada como una tcnica "ineficaz e imperfecta" por cientficos

como Iam Wilmut, "padre" de la oveja Dolly, la clonacin ha encontrado
en las clulas "madre" su primera razn de ser.

Retos tcnicos

1. Las clulas embrionarias de ratn originan teratomas y

teratocarcinomas en animales adultos

2. Conocimiento de las seales implicadas en el desarrollo y

diferenciacin

3. Asegurar la salud a largo plazo de las clulas a transplantar

(edad biolgica de las clulas)
Declaracin Universal de Derecho Humanos y Genoma Humano de la UNESCO (1997),
adoptada en 1998 por la Asamblea General de ONU (busca un balance entre una
continuacin en las investigaciones y la salvaguarda de los derechos humanos)

Frente a los mltiples beneficios de la ingeniera gentica

pueden surgir algunos problemas

Problemas sanitarios nuevos microorganismos patgenos,

efectos secundarios de nuevos frmacos de diseo, etc...

Problemas ecolgicos desaparicin de especies con consecuencias

desconocidas, nuevas contaminaciones debidas a un metabolismo incontrolado, etc...

Problemas sociales y polticos en el campo de la produccin industrial, agrcola y

ganadera,
pueden crear diferencias an ms grandes entre pases ricos y pobres. El sondeo gnico en
personas puede llevar a consecuencias nefastas en la contratacin laboral, por ejemplo, y atenta contra
la intimidad a que tiene derecho toda persona (empleo, agencias de seguros, discriminacin..).

Problemas ticos y morales Poder conocer y modificar el patrimonio gentico humano

puede ser una puerta abierta al eugenismo "Eugenesia: la ciencia del incremento de la felicidad humana