Determinación de coliformes: Método del NMP.

NORMA OFICIAL MEXICANA NOM-112-SSA1-1994.
M.C. Luis Ramiro Caso Vargas.

Coliformes
• Estan constituidos por un grupo heterogéneo de bacterias (varios géneros y especies) • Algunas especies constituyen un problema de salud bastante grave. • Son organismos “indicadores de contaminación fecal” en el agua.

¿Por qué usar coliformes?
• Buscar por microorganismo específicos lleva mucho tiempo y recursos. • Los coliformes regularmente se encuentran asociados con fuentes de patógenos que contaminan el agua. • El análisis de coliformes en agua potable es relativamente sencillo, económico y eficiente.

¡La definición es importante!
• Bacilos Gram negativos. • No esporulados. • Aerobios o anaerobios facultativos. • fermentan la lactosa a 35 °C con la producción de ácido y gas. • ¡¡ Todo esto Bajo las condiciones de la norma !!

Prueba de coliformes totales
1. Prueba presuntiva • Caldo Lauril Triptosa (CLT). • Caldo Mc. Conkey. • Caldo lactosa. • Medio EC. 2. Prueba confirmativa:
• • Medio EC. Medio bilis lactosa (BLVB)

Día 1 (Prueba presuntiva)
• • Preparación del material. Realizar diluciones seridas de la muestra de agua hasta 10-3 en agua peptonada. Realiazar 5 pases de 1 ml. de cada una de las diluciones (10-1, 10-2, 10-3) a tubos con 9 ml. de caldo Lauril sulfato y campanas Durham. Dejar incubando de 24 a 48 hrs. a 35°C.

Día 2 (prueba confirmativa)
1. Realizar pases con alíquotas de 1ml. de cada los 5 tubos por dilución a tubos con medio EC y campanas Durham. 3. Dejar incubando de 24 a 48 hrs. a 35°C.

Procedimiento:
P so a 1
ml 1

Sembrar de cada dilución por quintuplicado.
1 2 3 4

Pas
5

o2
10-1

1 ml

10-1 1 ml 10-2 1 ml
1 ml
1 2 3 4 5

10-2

Muestra 10-3 Realizar diluciones hasta 10-3

1 ml

1

2

3

4

5

10-3

Transferir hacia tubos con 1 caldo EC.
Caldo Lauril Sulfato
10-1 10-1 10-1 10-1 10-1 1 2 3 4 5

Caldo EC.

1

2

3

4

5

Tubo Durham

Producción de Gas

Análisis de resultados MNP
Dilución 10-1 10-2  X   X X 3   X X 2 10-3 X X X X  1

1 2 3 4 5 Tubos

¿Qué tanto es tantito?
NOM-127-SSA1-1994 -SSA1-1994

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