Proyecto Tesis II

Autores: Lissette Gioanna, Horna Acevedo Carlos Wilfredo, López Cenizario UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLLO

 TIPO DE INVESTIGACIÓN
De Acuerdo al fin que persigue: De Acuerdo a la técnica de Contrastación: Básica Descriptiva

 RÉGIMEN DE INVESTIGACIÓN:

Libre

 DEPARTAMENTO Y SECCIÓN AL QUE PERTENECE

EL PROYECTO Departamento Académico de Farmacotécnia Sección Académica de Farmacognosia y Farmacobotánica

 LOCALIDAD E INSTITUCIÓN DONDE SE EJECUTARA

EL PROYECTO Localidad: Trujillo – Perú Institución: Universidad Nacional de Trujillo

 Materiales y Equipos: Material De uso común en el Laboratorio. . BIENES:  Material Biológico: Hojas de Sambucus peruviana (sauco) provenientes de la ciudad de Huamachuco.

439. Nº 2.0001 g) Espectrofotómetro THERMO modelo GENESSIS 10 UV Estufa Eléctrica Memmert TY U40 Baño Maria Precisterm S. 729.Equipos: Balanza Triple Brazo 700/800 series OHAUS US PAT.140 Bomba al vacío Thomas Scientific Mod 5KH33DN68 Tamiz Resh . Equipo de Lixiviación Balanza Analítica OHAUS GA 200 (precisión 0.

Alcohol etílico de 96º GL. Sigma Acido sulfúrico 10% calidad Merck .Solventes: Agua destilada.   Reactivos:   2.2-difenil-1-picrilhidrazil (DPPH*) Lab.

1486.3.1 1 2.150.00 S/.00 2.3.3.00 S/. encuadernación y empastado TOTAL S/.00 S/.3.1 99.2. útiles y materiales de oficina Material de Laboratorio S/.3.2 2.3.8. 1 2 Material biológico 2.00 S/.3.200.00 S/.1 2 2.20.00 S/.2 2.1 2 2.330.1 Alimentos y bebidas de consumo humano Papelería en general.4 4 Productos químicos Pasajes y gastos de transporte Servicios de Telefonía e Internet Servicio de impresiones.PRESUPUESTO Según Clasificador de Gastos Públicos para el año 2012 Código Gastos Presupuestario Costo 2.1 1.00 .2 1.1 5.18.617.2 1 2. 1 10.00 •FINANCIAMIENTO Autofinanciado Recursos de la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional de Trujillo S/ 31.1.2 2.3.120.

PLAN DE INVESTIGACIÓN Realidad Problemática .

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. sino canalizar la posibilidad de su utilización en la prevención de enfermedades producidas por radicales libres.Justificación El presente trabajo no solo pretende demostrar la actividad antioxidante in vitro de los flavonoides totales obtenidos de la hoja de Sambucus peruviana. contribuyendo de esta manera a fomentar estudios científicos que demuestran su actividad antioxidante in vivo.

(sauco) proveniente de la ciudad de Huamachuco?  OBJETIVOS   Objetivo General: Determinar la capacidad antioxidante in vitro de los flavonoides totales obtenidos de las hojas de Sambucus peruviana H.   Determinar la capacidad antioxidante in vitro de los .K. PROBLEMA ¿Cuál es la Capacidad Antioxidante in vitro de los Flavonoides Totales obtenidos de las hojas de Sambucus peruviana H.K. (sauco) proveniente de la ciudad de Huamachuco.B.B.K.B. (sauco)   Objetivos Específicos:   Cuantificar flavonoides totales de la hoja de Sambucus peruviana H.

DISEÑO DE CONTRASTACION Diseño de estudio .

Árbol en periodo de floración Recolección Hojas en buen estado Obtener tamaño de partícula adecuada . MÉTODO Parte aérea de la planta.

Preparación del extracto fluido .

Solució n Patrón 1.8 ppm 6.0 ppm Realizar un espectro.6 ppm 3. para obtener el λmax 9.6 ppm Realizar 3 lecturas en el espectrofotómetro .4 ppm 8.Cuantificacion de Flavonoides totales del extracto fluido de Sambucus peruviana Preparación de la curva de calibración Pesar 80 mg de quercetina patrón y transferirá a una fiola y aforar a 100 mL.2 ppm 4.

Preparación del Blanco Preparar etanol a 96 °GL como solución blanco tomar una alícuota de 3mL aproximadamente para la calibración del espectrofotómetro Preparación de la muestra problema Medir 20 ml del extracto fluido y reflujar con 20 ml de ácido sulfúrico al 10 % durante dos horas. en forma de cristales. Lavar el residuo con agua helada . a la estufa a 40ºC durante 2 horas. Llevar a Baño Maria y concentrar a la mitad Llevar a refrigeración y filtrar al vacio Solubilizar los cristales con 100 ml d etanol 96 °GL + 100 ml de agua Llevar el papel filtro que contiene los flavonoides totales.

Los cristales purificados disolver en etanol de 96 ºGL y aforar con este a un volumen de 100 ml. Medir 1 ml de la solución y aforar a 100 ml SOLUCION PROBLEMA Medir 3 ml y realizar la lectura en el espectrofotómetro .

Fundamento del método 2.B.K.Determinación de la capacidad antioxidante in vitro de los flavonoides totales obtenidos de las hojas de Sambucus peruviana H.2-difenil-1picrilhidrazilo .

Preparación del Reactivo: Solución 2.1 mM (0.2-difenil-1-picrilhidracilo (DPPH*)  Preparar una solución de DPPH* con etanol de 96° GL a una concentración de DPPH 0.03943 mg/ml) .

Preparación de la recta de calibración para la solución de radical DPPH* .

Determinación de los porcentajes de captura del radical DPPH* .

Enfrentar con la muestra problema según la tabla Solución DPPH* + muestra (Para cada tubo) Tubo ul de muestra Tubo ul de muestra 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 55 60 65 70 75 80 85 90 95 100 Leer 3 absorbancias de cada tubo en el espectrofotómetro (Se monitorea las absorbancia desde un tiempo cero hasta 30 minutos) .

Calcular el porcentaje de radicales DPPH* capturados. con la siguiente formula Determinación de la cantidad necesaria de la muestra (antioxidante) para reducir en un 50% la concentración inicial del radical DPPH (IC50) 5−b 5 IC5 = 5 m Donde: IC50 : cantidad necesaria de la muestra para reducir en un 50% la concentración inicial del radical DPPH (μl) b : Intercepto de línea de regresión lineal m : Pendiente de la línea de regresión lineal .

Determinación del % inhibición (%I)   Donde: A : Absorbancia del blanco A1 : Absorbancia de la muestra Análisis de Datos Los datos serán procesados en el programa X Microsoft Office Excel 2007. Caracterizados mediante parámetros estadísticos descriptivos: Media Aritmética ( ) y Desviación Estándar (δ) .

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