Está en la página 1de 19

ELECTROFORESIS DE PROTENAS

Integrantes : Sebastin Espinoza Hidalgo Josefina Illanes Muoz Rosemarie Menke Zurita Jorge Troncoso Gatica

Definicin y caractersticas de electroforesis:


corriente elctrica controlada de separar biomolculas segn su tamao y carga elctrica a travs de una matriz gelatinosa. .

Fue empleado por primera vez por en el ao 1937,

E. L.Durrum y Arne W.K. Tiselius, que impulsaron la electroforesis de zona, aplicable clinicamente.
Es una tcnica altamente sensible, til y muy

verstil

Mecanismo y fundamento terico de su accionar:


principio de las cargas las cargas positivas se desplazaran hacia el CTODO y las negativas hacia el NODO.

friccion o resistencia generada por el polmero o gel


Esto se denomina difusin a mayor T mayor difusin

El gel otorga un resguardo a la labor frente a la difusin,

Usos generales de la electroforesis:


Separacin Determinar el peso molecular, el punto

isoelctrico y el nmero de cadenas de una protena.

Clnicamente nos es til como:

Mtodo diagnostico para algunos tipos de cncer Analbuminemia u otras deficiencias sricas en el

plasma Exmenes de paternidad de enfermedades hepticas De enfermedades gastrointestinales Pureza de razas en zoologa

Tipos de electroforesis:
material que se usa la finalidad o elemento que se quiera

detectar.
Encontramos las electroforesis agarosas,

celulosas (en papel), capilares, por geles de gradiente, por poliacrilamida, entre otras.

Las agarosas:
el agar es un gel obtenido de un polisacrido de origen vegetal (agar-agar) y se usa usualmente

para separar molculas grandes de alrededor 20.000 nucletidos.

Capilares:
hecha con un capilar de slica fundida a

corrientes elevadas, lo que la hace ms resistente, y se usa para la separacin de cationes, aniones, protenas, macromolculas y sustancias no cargadas en forma simultnea.

Por geles en gradiente:


Usa geles de poliacrilamida que tienen un gradiente creciente de concentracin de

archilamida + bisacrilamida. Eso genera en consecuencia un gradiente decreciente que va dejando atrapadas las protenas impidiendo su continuacin a lo largo del gel. Esto permite una mayor definicin de las bandas de tincin.

Por poliacrilamida:
Usa la polimerizacin de la acrilamida y es

el mtodo ms comn de uso. Sirve para la separacin de protenas en general.

Electroforesis tipo por poliacrilamida paso a paso:


Se sumerge un gel poroso (poliacrilamida) en un tanque de resolucin para protenas. Dicho tanque lleva dos electrodos conectados a una fuente de poder.

Se aplica la muestra en el pocillo y las

protenas de esta son coloreadas con un marcador estndar de protenas.

Se aplica la corriente necesaria para la separacin de las protenas.

Se da por finalizada la electroforesis

cuando las protenas coloreadas hayan llegado a los lmites del gel.

Se retira el gel para proceder a la tincin (con Azul Brillante de Coomasie) de las protenas

obtenidas en la electroforesis y posterior fotografia.

Resultados obtenidos
se compara con una tabla patrn de estndar de peso conocido denominado marcador de peso molecular y se generan los informer y tabulaciones correspondientes.

http://www.bioted.es/medio_electroforesis.h

tm

Gracias! :D