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Dr.

Eduardo Chancay Lpez Jefe de la Ctedra de Bacteriologa 2008-2009

Qu es y por qu es importante el Urocultivo?


El Urocultivo es un exmen de laboratorio que determina si existe una infeccin de las vas urinarias. Se investiga la presencia de bacterias en orina, su cantidad, especie, y sensibilidad a los antibiticos.

Es importante para instaurar un tratamiento adecuado, evitando la administracin de antibiticos cuando no es necesario, y administrando el correcto cuando corresponde.

Jefe de la Catedra de Bacteriologia

Dr.Eduardo Chancay Lopez

Las infecciones urinarias se dan con ms frecuencia en: Mujeres Neonatos y nios hasta los 16 aos Hombres mayores de 65 aos.

Dr.Eduardo Chancay Lopez Jefe de la Catedra de Bacteriologia

AGENTES ETIOLGICOS A INVESTIGAR RUTINARIAMENTE


BACTERIAS G Escherichia coli Klebsiella spp. Enterobacter spp. Serratia spp. Proteus spp. Pseudomonas spp

Dr.Eduardo Chancay Lpez Jefe de la Ctedra de Bacteriologa

BACTERIAS G+ Estafilococos saprofitico Estafilococo epidermidis Estafilococo Aureus Enterococus spp. Estreptococo grupo B (imprescindible en embarazadas)

Recoleccin de la Muestra
Nios y adultos que controlan esfnteres. La muestra de eleccin es el chorro medio miccional. El tiempo de retencin deseado es de, por lo menos, 3 horas.

Hombres: retraer el prepucio e higienizar el glande y surco balanoprepucial con agua y jabn secar con toalla limpia eliminar el primer chorro recolectar en frasco estril la fraccin siguiente Mujeres: higienizar la zona genital con agua y jabn secar con toalla limpia eliminar el primer chorro y recolectar en frasco estril la fraccin siguiente

Nios y adultos que no controlan esfnteres. Nunca utilizar bolsas colectoras para el estudio de urocultivo, ya que hay que recordar que la mayora de estas muestras no cumplen con el tiempo de retencin deseado. Se recomienda alguno de los siguientes procedimientos: Al acecho: Se aplica con los lactantes y es similar al descrito para los pacientes que controlan esfnteres. Dificultad: se desconoce cual ser el momento en que se va a producir la miccin. Dr. Eduardo Chancay Lpez Jefe de la Ctedra de Bacteriologa

Puncin suprapbica:
Efectuado por mdicos entrenados. Para casos especiales: neonatos graves, pacientes cuyos urocultivos previos presenten resultados conflictivos, sospecha de microorganismos de difcil desarrollo, etc. Primeramente se verifica que el paciente presente globo vesical palpable, se desinfecta zona pubiana con alcohol yodado y se deja actuar 1 min., se limpia con alcohol 70% y se punza con aguja adecuada en la zona ubicada 1 o 2 cm encima del pubis. Se aspira la orina y se vuelca en frasco estril.

La orina que llega el laboratorio es homogenizada y se la divide en dos partes:


Una para estudio del sedimento Urocultivo

PROCEDIMIENTO

De la muestra tomamos con una pipeta 5 ml y los depositamos en un tubo de ensayo y centrifugamos por 10 min a 2500 r.p.m

CENTRFUGA (10 min)

El sobrenadante se lo elimina y el sedimento lo sembramos en A. Sangre y A. Mac Conckey.


En estras Incubamos por 24 hrs a 37C
INCUBAMOS (24HRS, 37c)

Desde el A. Sangre efectuamos frotis teido con mtodo de Gram (bacterias G+). Crecimiento en A. Mac Conckey = bacterias G-; entonces resembramos en A. Kliger y de aqu efectuamos pruebas bioqumicas
PRUEBAS BIOQUMICAS

CONTAJE BACTERIANO
Para esta tcnica vamos a necesitar:
5 tubos de ensayo, cada uno con 9 ml de agua destilada 4 cajas de petri vacas y estriles Pipeta 4 tubos con 10 ml de Agar Nutritivo base profunda, fundido y enfriado a 45C Incubador Contador de bacteria.

Aspiramos 1 ml de orina y lo depositamos en el primer tubo con agua destilada (tubo # 1). Luego tomamos otro ml de la muestra y lo colocamos en la caja de petri # 1. Del tubo # 1 tomamos 1 ml y lo ponemos en el segundo tubo con agua destilada.

(1/10) 1 ml

1 ml

(1/100)

#1

(1/10)

#2

De este segundo tubo tomamos un ml para el tubo # 3. De este tercer tubo tomamos dos ml; uno para el tubo # 4 y otro para la caja de petri # 2

1 ml (1/100) #2 #3

1 ml (1/10000)

(1/1000)

1 ml

#4

(1/1000)

#2

Del tubo # 4 tomamos 2 ml, uno para el tubo #5 y otro para la caja de petri # 3

1 ml

(1/100000)

(1/10000) #4 1 ml

#5

(1/10000) #3

Del tubo # 5 vamos a tomar 1 ml y lo depositamos en la caja de petri # 4


(1/100000)

1 ml

(1/100000) #4 #5

Luego a cada caja de petri le agregamos 10 cc de Agar Nutritivo base profunda, fundido y enfriado a 45 C. Mezclamos Incubamos por 48 hrs a 37 C

RESUMEN

1 ml

1 ml

1 ml

1 ml

1 ml

#1 1 ml

#2

#3

#4 1 ml

#5 1 ml

1 ml

10cc

agar.B.P. a 45c

1/10

1/1.000

1/10.000

1/100.000

LECTURA

Luego de la incubacin por 24 horas a 37 c empezamos a observar las cajas de petri empezando por la # 1 y nos detenemos en aquella que sea factible contar las bacterias a simple vista y aumentamos tantos ceros como tenga la dilucin.

Ejemplo:
Si en la caja de petri # 2 (dilucin de 1/1000) encontramos 4 colonias, diremos que hay 4000 bacterias por cada ml de orina. Si no hemos podido contar las colonias en ninguna de las disoluciones diremos que en la muestra existen incontables colonias bacterianas por ml hasta la dilucin de 1/100000