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ANÁLISIS INSTRUMENTAL

Espectrofotometría Visible-UV
 Espectroscopía.- Rama de la ciencia en la que la energía radiante se descompone en su longitudes de onda componentes, originándose espectros que se usan para estudios teóricos de la estructura de la materia o para análisis cualitativos y cuantitativos.  Radiación electromagnética.a) Naturaleza Ondulatoria: Se propaga a través de ondas. b) Naturaleza Energética: Constituida por fotones. Energía Radiante como onda

Ecuación de Planck:
 (a) E= γh E= Energía γ = Frecuencia h = Constante de Planck 6.6262x10-34 Joule/seg C = Velocidad de la luz λ = Longitud de onda

 (b) γ = C λ

 Reemplazando (b) en (a) tenemos:  (c) E = C x h

λ

 (d) γ = 1

_

_

γ= número de onda

λ
 Reemplazando (b) en (c):

(e) E = C x γ x λ

 λ = Distancia en que se mueve la onda durante un ciclo; (Long/ciclo)  A = Amplitud: alteración máxima de la onda con respecto al eje horizontal.  T = Período: tiempo requerido para un ciclo completo; (seg/ciclo).  γ = Frecuencia de oscilación: número de ciclos que se representa en cada segundo; (ciclos/seg o Hertz).  Relación entre λ y γ para una onda de luz: C = γh  C= Velocidad de la luz (3x108 m/seg)

λ = cm, Å, nm, μm 1 Å = 10-10 nm = 10-8 cm 1nm = 10-9 m = 10-7 cm 1 μm = 10-6 m = 10-4 cm

LEYES DE LA ABSORCIÓN I0 : Intensidad del rayo incidente I1 : Intensidad del rayo emergente T = I1 I0 T = Transmitancia: energía radiante transmitida. %T = I1 x 100 I0 En términos de absorción de energía radiante: .

I0 = Intensidad de la radiación incidente I1 = Intensidad de la radiación emergente. . I2 = 25 . I2 = 25 I0 100 I1 50 I0 100  Obtenemos relaciones logarítmicas y viene dada por: A = log I0 . A= log I0 I1 I2 I2 A= Absorbancia o Intensidad óptica: Cantidad de radiación absorbida por una muestra. A= log I1 . Si escribimos las relaciones: I1 = 50 .

La relación mutua de estas medidas viene dada por: A= ab = -logT = -log I1 = log I0 I0 I1 . la relación puede ponerse en la forma: A= ab donde a es la absortividad del líquido y b la longitud del recorrido óptico. Para una solución de concentración unidad.LEY DE LAMBERT  La ecuación A= log10 I0 = -log10T I1  constituye la base de la Ley de Lambert (también conocida como ley de Bouguer).

I0 = I1 10ab . I0 = 10ab I1  y.Luego. Log I0 = ab I1  Entonces. I1= I010-ab  o bien.

LEY DE BEER  La Ley de Beer muestra que existe una relación logarítmica entre la transmitancia y la concentración de la especie absorbente o solución.  En consecuencia para un trayecto óptico b dado. la absorción vendrá dado por: A = ac ó A = єc c = Concentración del material absorbente a = Coeficiente de extinción: grs/l є = Coeficiente de extinción: moles/l .

BEER Ley de Lambert A = ab ó A = єb Ley de Beer A = ac ó A = єc A = abc ó A = єbc o bien: A= abc= -logT= -log I1 = abc= log I0 = log 1 I0 I1 T log I0 = abc I1 I0 = 10abc I1 I0 = I1 x 10abc I1 = I0 x 10-abc .LEY DE LAMBERT .

A = ac = -log T = -log I1 = log I0 I0 I1 Además: A = log I0 I1 Log I0 = ac I1 I0 = 10ac I1 I1 = I0 x 10-ac ó I0 = I1 x 10ac Estas expresiones son todas ellas formas de la Ley de Beer y muestran la relación entre el grado de absorción y la concentración. para una longitud de onda y trayecto óptico o espesor de la celda dada. .

. Estas expresiones muestran que existe una relación lineal entre la Absorbancia A y la Concentración C de una solución dada. Luego la concentración de la muestra desconocida se determina midiendo la Absorbancia de la muestra y se obtiene su concentración por extrapolación en la curva de calibración. considerando constante el trayecto óptico b y la longitud de onda λ  Para determinar la concentración de una muestra desconocida se preparan soluciones estándar de concentración conocida de la muestra a analizar y se grafica A vs. C. y se obtiene la curva de calibración.

%T vs λ. y log ε vs λ para determinar la longitud de onda λ a la cual la absorción de las sustancia es máxima y con esta longitud de onda λ se obtiene la curva de calibración y la concentración de la muestra desconocida. .CURVAS ESPECTRALES  Se obtienen graficando A vs λ.

La Ley de Beer solo se aplica a soluciones de concentraciones bajas del analito en estudio.DESVIACIONES DE LA LEY DE BEER En la figura siguiente se pone de manifiesto la pérdida o desviación de la linealidad de la relación concentración y absorbancia. A elevadas concentraciones del analito. la distancia promedio entre especies disminuye hasta el punto en que cada una afecta la distribución de carga de las moléculas vecinas. Causas de las desviaciones de la Ley de Beer a) Altas concentraciones de la especie Absorbente.. la que a su vez puede alterar la capacidad de que las especies absorban a una determinada longitud de onda de la radiación. .

b) Desviaciones químicas. Los indicadores ácido-base contituyen un ejemploi frecuente de este comportamiento.. Ejemplo: El cambio de color asociado a un indicador típico HIn proviene del desplazamiento del equilibrio: HIn  H+ + InColor 1 Color 2 . para dar un producto que presenta un espectro de absorción diferente que el espectro del analito. asocia o reacciona con un disolvente.se producen cuando el analito se disocia.

en cambio la banda B se desvía porque ε experimenta cambios significativos en esta zona con la λ .La ley de Beer sólo se cumple cuando la radiación es monocromática o de una determinada longitud de onda.Radiación Policromática. La banda A no se desvía porque ε no varía..c) Desviaciones Instrumentales. es constante.

Aplicaciones Ultravioleta visible Análisis Cuantitativo.  1. Determinacion mezclas Estudio de reacciones . Determinacion directa  2.

Cualitativo .

 Análisis cuantitativo  Calculo de la concentración por interpolación en recta calibrado .

Adición standard .

.

Mezclas .

Espectros superpuestos parcialmente .

Espectros completamentame superpuestos .

Mezclas .

Mezclas .

Ejemplo Mezcla .

Hoja Excel .

Resolución con Mathcad .

Variaciones fotométricas  La Ley de Beer se cumple  Al menos una de las especies debe absorber la radiación .

Determinación de las constantes de disociación de ácidos y bases .

.

Determinación de la estequimetria de complejos .

Estequiometría con variaciones continuas .

Método de la relación molar .

Determinación de constantes .

Error fotométrico .

Curva de Ringbon Error de método espectrofotométrico .

Espectrofotometría de derivadas .

Ventajas de la espectrofotometría de derivadas .

Instrumentación UV .

INSTRUMENTOS .

Fotómetros .

Espectrofotómetros .

Fuente de energia .

.

Detectores .

Haz sensillo .

Calibrado del instrumento .

49O209748 .

974149O209748 .850.

:0390/00307. .

.

090.94708 .

.80384 .

-7../4/0 3897:20394 .