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Pruebas Bioqumicas Pruebas Bioqumicas

Medios Selectios y Dierenciales Medios Selectios y Dierenciales


Microbiologa General Microbiologa General
Por. Maribel Irizarry Por. Maribel Irizarry
Glorivee Rosario Glorivee Rosario
Pruebas Bioqumicas Pruebas Bioqumicas
Metabolismo de carbohidratos Metabolismo de carbohidratos
ntroduccin ntroduccin
C
6
H
12
O
6
+ 6 O
2
F 6 CO
2
+ 6 H
2
O + ENERGIA
Oxidacin de glucosa por
gluclisis y respiracin
aerbica
ntroduccin cont. ntroduccin cont.
ntroduccin cont. ntroduccin cont.
as bacterias transfieren
aproximadamente 40% de
energa de una molcula de
glucosa a ATP durante
metabolismo aerbico y 5%
durante procesos
anaerbicos de fermentacin.
ntroduccin cont. ntroduccin cont.
ntroduccin cont. ntroduccin cont.
OCURRE EN Clostridium
$!ECIE$ QUE CAU$A
TETANO, BOTULI$O
Y GANGRENA
!ARA DETECTAR
Klebsiella pneumoniae
ermentacin de carbohidratos ermentacin de carbohidratos
,Glucosa, ,Glucosa,
Medio para inocular Phenol Red Glucosa (broth) + Tubo Durham
Color del medio Rojo - Anaranjado
Sustrato Glucosa
Indicador o Reactivo Rojo Fenol
Principio El rojo fenol es un indicador que cambia a amarillo en
una solucin cida cuando la bacteria fermenta glucosa.
El tubo Durham es utilizado para atrapar el gas.
Reaccin Alcalina (negativa)
pH 8.5
Color rojo- anaranjado (no fermenta glucosa)
Turbidez (crecimiento de la bacteria)
Reaccin cida (positiva)
pH 6.9
Color amarillo (fermenta glucosa)
Turbidez (crecimiento de la bacteria)
Reaccin cida (positiva) + Gas
pH 6.9
Color amarillo (fermenta glucosa)
Turbidez (crecimiento de la bacteria)
Presencia de gas en el tubo Durham
ermentacin de carbohidratos ermentacin de carbohidratos
,Glucosa, ,Glucosa,
Medio para inocular Phenol Red Glucosa (broth) + Tubo Durham
Color del medio Rojo - Anaranjado
Sustrato Glucosa
Indicador o Reactivo Rojo Fenol
Principio El rojo fenol es un indicador que cambia a amarillo en
una solucin cida cuando la bacteria fermenta glucosa.
El tubo Durham es utilizado para atrapar el gas.
Reaccin Alcalina (negativa)
pH 8.5
Color rojo- anaranjado (no fermenta glucosa)
Turbidez (crecimiento de la bacteria)
Reaccin cida (positiva)
pH 6.9
Color amarillo (fermenta glucosa)
Turbidez (crecimiento de la bacteria)
Reaccin cida (positiva) + Gas
pH 6.9
Color amarillo (fermenta glucosa)
Turbidez (crecimiento de la bacteria)
Presencia de gas en el tubo Durham
ermentacin de carbohidratos ermentacin de carbohidratos
,Lactosa, ,Lactosa,
Medio para inocular Phenol Red Lactose (broth) + Tubo Durham
Color del medio Rojo - Anaranjado
Sustrato Lactosa
Indicador o Reactivo Rojo Fenol
Principio El rojo fenol es un indicador que cambia a amarillo en
una solucin cida cuando la bacteria fermenta lactosa.
El tubo Durham es utilizado para atrapar el gas.
Reaccin Alcalina (negativa)
pH 8.5
Color rojo- anaranjado (no fermenta lactosa)
Turbidez (crecimiento de la bacteria)
Reaccin cida (positiva)
pH 6.9
Color amarillo (fermenta lactosa)
Turbidez (crecimiento de la bacteria)
Reaccin cida (positiva) + Gas
pH 6.9
Color amarillo (fermenta lactosa)
Turbidez (crecimiento de la bacteria)
Presencia de gas en el tubo Durham
ermentacin de carbohidratos ermentacin de carbohidratos
Prueba ermentacin Prueba ermentacin--Oxidacin de Oxidacin de
Carbohidratos Carbohidratos
Medio para inocular OF Medium Glucose (agar deeps) : uno en condiciones aerbicas y otro en
condiciones anaerbicas (aceite)
Color del medio Verde
Sustrato Glucosa
Indicador o Reactivo Bromotimol azul
Principio El bromotimol azul es un indicador que cambia a amarillo en una solucin cida
cuando la bacteria fermenta glucosa.
No reaccin
No sacaroltica
Color verde (No hay fermentacin)
Turbidez (crecimiento de la bacteria)
Oxidacin Color amarillo (pH 5.2) en la superficie del tubo sin aceite (metabolismo de
glucosa en condiciones aerbicas)
Color verde (pH 6.8) en el tubo con aceite (no hay fermentacin de glucosa)
Turbidez (crecimiento de la bacteria)
Fermentacin Color amarillo (pH 5.2) en la superficie del tubo sin aceite (metabolismo de
glucosa en condiciones aerbicas)
Color amarillo (pH 5.2) en el tubo con aceite (hay fermentacin de glucosa)
Turbidez (crecimiento de la bacteria)
Prueba ermentacin Prueba ermentacin--Oxidacin de Oxidacin de
carbohidratos carbohidratos
Medio para inocular OF Medium Lactose (agar deeps) : uno en condiciones aerbicas y otro en
condiciones anaerbicas (aceite)
Color del medio Verde
Sustrato Lactosa
Indicador o Reactivo Bromotimol azul
Principio El bromotimol azul es un indicador que cambia a amarillo en una solucin cida
cuando la bacteria fermenta lactosa.
No reaccin
No sacaroltica
Color verde (No hay fermentacin)
Turbidez (crecimiento de la bacteria)
Oxidacin Color amarillo (pH 5.2) en la superficie del tubo sin aceite (metabolismo de
glucosa en condiciones aerbicas)
Color verde (pH 6.8) en el tubo con aceite (no hay fermentacin de lactosa)
Turbidez (crecimiento de la bacteria)
Fermentacin Color amarillo (pH 5.2) en la superficie del tubo sin aceite (metabolismo de
lactosa en condiciones aerbicas)
Color amarillo (pH 5.2) en el tubo con aceite (hay fermentacin de lactosa)
Turbidez (crecimiento de la bacteria)
O medium O medium
nterobacterias nterobacterias
,MViC, ,MViC,
nterobacterias nterobacterias
acterias Gram negativo
astones
Flora del tracto gastrointestinal
Causan:
Infecciones gastrointestinales,
respiratorios, entre otras.
nterobacterias cont. nterobacterias cont.
Enterobacteriaceae Non-Enterobacteriaceae
Gram negativa Gram negativa
Fermentan glucosa No fermentan glucosa
Oxidasa negativo Oxidasa positivo

'
INDOLE
METHYL RED
VOGES-PROSKAUER
CITRATE
Prueba de ndole Prueba de ndole
etermina la habilidad de un
microorganismo para utilizar el
amino acido tryptophan.
TRYPTOPHAN
INDOLE + PYRUVIC ACID + AMMONIA
TRYPTOPHANASE
Produccin de ndole Produccin de ndole
Medio para inocular Tryptone (broth)
Color del medio Transparente
Sustrato Triptfano
Reactivo Kovac (5 gotas)
Principio Indole es un producto del metabolismo de amino
cidos. Algunos microorganismos producen una
enzima (triptofanasa) que cataboliza el triptfano y
produce indole, cido pirvico y amonia. Indole
forma un anillo rojo cuando se mezcla con el
reactivo Kovac.
Reaccin negativa Color amarillo. No se produjo indole por medio del
catabolismo de triptfano.
Reaccin positiva Anillo color rojo. Se produjo indole por medio del
catabolismo de triptfano.
Negativo Positivo
ndol ~ Medio 1ryptone ndol ~ Medio 1ryptone
ndol ~ Medio 1ryptone ndol ~ Medio 1ryptone
Prueba de Methyl Red Prueba de Methyl Red
$e utiliza para diferenciar entre las
especies de bacterias entricas
(Enterobacterias) anaerbicas
facultativas.
Escherichia
Yersinia
Enterobacter
Salmonella Shigella
Klebsiella Serratia
Proteus
Erwinia
Prueba de Methyl Red Prueba de Methyl Red
Fermentacin "mixed acid" de
glucosa excreta grandes
cantidades de:
Acido actico, frmico, lctico y
succnico y etanol.
pH (+/- 4.2) pH (+/- 4.2)
Prueba Methyl Red Prueba Methyl Red
Medio #'P broth (clear)
Sustrato Glucosa
Reactivo ethyl red
Tiempo 2448 horas
Reaccin positiva Produccin de cido - color rojo
Reaccin negativa No produccin de cido - otro color
que no es rojo.
Negativo Positivo
MR ~ Methyl Red MR ~ Methyl Red
MR ~ Methyl Red MR ~ Methyl Red
Prueba de Voges Prueba de Voges--Proskauer Proskauer
W$e utiliza para diferenciar entre las
especies de bacterias entricas
(Enterobacterias) anaerbicas
facultativas.
Wiferencia Escherichia coli de las
especies de Enterobacter aerogenes
y Klebsiella.
Wetecta acetoina (acetylmethyl
carbinol).
Medio #'P broth (clear)
Sustrato Glucosa
Reactivo dNaphtol ($olucin de arritts A) Y
KOH ($olucin de arritts ) mas
creatina
Tiempo 48 horas
Reaccin positiva Produccin de acetoina - color rojo.
Reaccin negativa No produccin de acetoina - otro
color que no es rojo.
Prueba de Voges Prueba de Voges--Proskauer Proskauer
Positivo Negativo
VP ~ Voges Proskauer VP ~ Voges Proskauer
VP ~ Voges Proskauer VP ~ Voges Proskauer
Prueba de Citrato Prueba de Citrato
etermina la presencia de enzimas que
permiten al citrato entrar a la clula y
luego ser utilizado como nica fuente de
carbono para su metabolismo y
crecimiento.
Simmons citrate
Koser citrate
&tilizacin de citrato &tilizacin de citrato
Medio para inocular Simmonscitrate agar(slant)
Color del medio Verde
Sustrato Sodium Citrate
Indicador o Reactivo Bromotimol azul
Principio El bromotimol azul es un indicador que cambia a
azul en una solucin alcalina cuando la bacteria
fermenta citrato. El citrato es un carbohidrato
que algunas bacterias utilizan como fuente de
energa. Citrato es una de las molculas en el
ciclo de Krebs.
Reaccin cida (negativa) Color verde (no utiliza citrato)
Reaccin Alcalina (positiva) Color azul (utiliza citrato)
Citrate Citrate
MViC MViC
MViC MViC
MViC MViC
nterobacterias nterobacterias
,Pruebas adicionales a MViC, ,Pruebas adicionales a MViC,
idrlisis de gelatina idrlisis de gelatina
Medio para inocular Nutrient Gelatin (deep agar)
Color del medio Transparente amarilloso
Sustrato Gelatina
Indicador o Reactivo Ninguno. Refrigerar despus de la incubacin.
Principio La hidrlisis de la gelatina puede distinguir a las
especies Serrata y Pseudomonas de otras
Enterobacterias. La gelatina est slida inicialmente.
Despus de la incubacin, el tubo es refrigerado. Si el
medio se mantiene slido la bacteria no hidroliza la
gelatina. Si est lquida, la reaccin es positiva.
Reaccin negativa Gelatina slida despus de refrigeracin.
Reaccin positiva Gelatina lquida despus de la refrigeracin.
(Caracterstico en Serrata y Pseudomonas)
Gelatin liqueaction test Gelatin liqueaction test
Motilidad,ndol, Motilidad,ndol,

S S
Medio para inocular Sulfide Indole Motility (SIM) medium (deep agar)
Color del medio Transparente amarilloso
Sustrato Ninguno
Indicador o Reactivo Ninguno
Principio Luego de inocular el medio con la aguja en lnea recta
se observar crecimiento bacterial en la lnea (no
motil) o difundida a travs del medio (motil).
Puede ser utilizado para hacer la prueba de indole
(aadir reactivo Kovac) y produccin de H
2
S (con
sustrato tiosulfato de sodio)
Reaccin no motilidad Crecimiento solo a travs de la lnea de inoculacin.
Reaccin motilidad Turbidez a travs del medio.
SM medium SM medium
Motilidad Motilidad
Medio para inocular Motility medium (deep agar)
Color del medio Transparente amarilloso
Sustrato Ninguno
Indicador o Reactivo Ninguno
Principio Luego de inocular el medio con la aguja en lnea recta
se observar crecimiento bacterial en la lnea (no
motil) o difundida a travs del medio (motil).
Reaccin no motilidad Crecimiento solo a travs de la lnea de inoculacin.
Reaccin motilidad Turbidez a travs del medio.
Motility test Motility test
Prueba de 1S Prueba de 1S
1riple Sugar ron Agar` 1riple Sugar ron Agar`
Es utilizado para diferenciar
organismos entricos Gram
negativo ya que pueden
fermentar dextrosa (glucosa),
lactosa, o sacarosa (sucrosa) y
reducir sulfitos a sulfuro.
Medio para inocular TSI agar (slant agar)
Color del medio Rojo
Sustrato Dextrosa, lactosa y sucrosa
Tiosulfato de sodio
Indicador o Reactivo Rojo fenol
Ferrous Ammoniun Sulfate
Principio Fermentacin de carbohidratos dextrosa, lactosa y sucrosa. El medio se torna
cido (amarillo).
Formacin de Sulfuro ferroso (H
2
S). La produccion de sulfato de hidrgeno por un
cultivo resulta en color negro. Este color es causado por la produccin de H
2
S de
un ingrediente del medio llamado tiosulfato de sodio, el cual combinado con otros
componentes del medio, sulfato de amonio ferroso, resulta en la formacin de un
compuesto insoluble (sulfuro ferroso).
Se puede observar presencia de gas.
Reaccin negativa
K/K
No cambi el color. Rojo dentro del agar. Alcalino (no fermentacin de dextrosa)
Superficie roja. Alcalino (no fermentacin de lactosa y sucrosa)
No color negro (No produccin de H
2
S)
Reaccin positiva
K/A, A/A
Color amarillo dentro del agar. cido (fermentacin de dextrosa)
Superficie color amarilla. cido (fermentacin de lactosa y sucrosa)
Color negro (Produccin de H
2
S)
Prueba de 1S Prueba de 1S
1riple Sugar ron Agar` 1riple Sugar ron Agar`
1S agar 1S agar
SLANT
ALCALINO ACIDO ALCALINO ALCALINO ALCALINO
MEDIO
ACIDO ACIDO ACIDO ACIDO ALCALINO
GAS
NO NO NO SI NO
H
2
S
NO NO SI SI NO
Metabolismo de amino acidos y Metabolismo de amino acidos y
nitrgeno nitrgeno
ntroduccin ntroduccin
os amino cidos y otros compuestos
de nitrgeno son metabolitos
importantes de algunos
microorganismos.
Ciertos microorganismos contienen
enzimas que pueden catabolizar los
amino cidos y utilizarlos como
fuente de energa.
Decarboxilacin de amino acidos Decarboxilacin de amino acidos
,lisina, ,lisina,
Medio para inocular Decarboxylase of lysine (broth): un tubo sin aceite (aerbico) y
otro tubo con aceite (anaerbico)
Color del medio Violeta
Sustrato Lisina
Indicador o Reactivo Bromocresol violeta o prpura
Principio El color violeta es un indicador de pH que en condiciones alcalinas
es violeta y en condiciones cidas es amarillo.
Las decarboxilasas son enzimas que pueden remover en
condiciones anaerbicas el grupo carboxilo de amino cidos como
lisina. El producto de esta reaccin es bixido de carbono y
cadaverina.
Si se remueve el cido del amino cido, el pH del medio aumenta
(alcalino).
Reaccin cidica (negativa) Color amarillo en el tubo con aceite. (la bacteria no remueve el
grupo carboxilo de la lisina)
Reaccin Alcalina (positiva) Color violeta en el tubo con aceite (la enzima decarboxilasa est
presente y remueve el grupo carboxilo de la lisina)
Decarboxilacin de amino acidos Decarboxilacin de amino acidos
,ornitina, ,ornitina,
Medio para inocular Decarboxylase of ornithine (broth): un tubo sin aceite (aerbico)
y otro tubo con aceite (anaerbico)
Color del medio Violeta
Sustrato Ornitina
Indicador o Reactivo Bromocresol violeta o prpura
Principio El color violeta es un indicador de pH que en condiciones
alcalinas es violeta y en condiciones cidas es amarillo.
Las decarboxilasas son enzimas que pueden remover en
condiciones anaerbicas el grupo carboxilo de amino cidos
como ornitina.
Si se remueve el cido del amino cido, el pH del medio aumenta
(alcalino).
Reaccin cidica (negativa) Color amarillo en el tubo con aceite (la bacteria no remueve el
grupo carboxilo de la ornitina)
Reaccin Alcalina (positiva) Color violeta en el tubo con aceite (la enzima decarboxilasa est
presente y remueve el grupo carboxilo de la ornitina)
Decarboxilacin de amino acidos Decarboxilacin de amino acidos
,arginina, ,arginina,
Medio para inocular Decarboxylase of arginine (broth): un tubo sin aceite (aerbico) y
otro tubo con aceite (anaerbico)
Color del medio Violeta
Sustrato Arginina
Indicador o Reactivo Bromocresol violeta o prpura
Principio El color violeta es un indicador de pH que en condiciones alcalinas
es violeta y en condiciones cidas es amarillo.
Las decarboxilasas son enzimas que pueden remover en
condiciones anaerbicas el grupo carboxilo de amino cidos como
arginina. El producto de esta reaccin es bixido de carbono y
putrecina.
Si se remueve el cido del amino cido, el pH del medio aumenta
(alcalino).
Reaccin Acdica (negativa) Color amarillo en el tubo con aceite (la bacteria no remueve el
grupo carboxilo de la arginina)
Reaccin Alcalina (positiva) Color violeta en el tubo con aceite (la enzima decarboxilasa est
presente y remueve el grupo carboxilo de la arginina)
Descarboxilacin aminoacidos Descarboxilacin aminoacidos
Medio para inocular Phenilalanina (slant agar)
Color del medio Transparente amarilloso
Sustrato Fenilananina
Reactivo Cloruro frrico 10%
Principio Se utiliza para distinguir Enterobacteras (negativa) que
remueven el grupo amino de los amino cidos. El reactivo
cambia a color verde (el inclinado) en la presencia de las
enzimas de deaminacin difenilananina.
Reaccin negativa No hay cambio en el color despus de echar el reactivo
Reaccin positiva Cambio en color verde (inclinado) (Caracterstico de
Proteus)
Deaminacin de amino acido Deaminacin de amino acido
,enilananina, ,enilananina,
Deaminacin enilalanina Deaminacin enilalanina
In Nitrato
xido Nitroso
In Nitrito
Gas Nitrgeno
Reduccin de nitrato Reduccin de nitrato
Reduccin de nitrato Reduccin de nitrato
Medio para inocular Tryptic nitrate medium (broth)
Color del medio Transparente amarilloso
Sustrato Nitrato
Reactivo Solucin A: cido sulfamlico (5 gotas)
Solucin B: Dimethyl-alpha-naphthylamine (5 gotas)
Principio La bacteria puede tener enzimas que reducen nitrato (NO
3
) a nitrito (NO
2
) y de nitrito
a gas nitroso (N
2
) .
Si los reactivos A y B son aadidos a los tubos se desarrolla un color rojo que indica la
presencia de nitrito.
Si no hay cambio en color indica que hay nitrato en el tubo o el nitrato fue reducido a
gas nitroso. Si no hay color se le echa zinc a estos tubos. El zinc es un metal (agente
reductor). Si se aade zinc a los tubos que contienen nitrato, el nitrato podra ser
reducido a nitrito y como el tubo ya tiene la solucin A Y B, el medio que contiene
nitrato se pone rojo. La presencia de color rojo indica un reaccin negativa ya que fue
el zinc y no las enzimas bacteriales las que causaron la reduccin.
Si no hay cambio en color cuando se le aade zinc, significa que el nitrato no se
redujo. Si el tubo tenia ya la solucin A Y B, la nica posibilidad es que la bacteria
redujo el nitrato en gas nitroso.
Reaccin negativa Color rojo despus que se aade el zinc.
Reaccin positiva para nitrito Color rojo.
Reaccin positiva para gas nitroso No hay cambio en color despus que se aade el zinc.
Reduccin de nitrato Reduccin de nitrato
Urea
Dixido de carbono
Amonia
Ureasa y Agua
Produccin de ureasa Produccin de ureasa
Produccin de ureasa Produccin de ureasa
Medio para inocular Urea agar (slant)
Color del medio Salmn
Sustrato Urea
Indicador o Reactivo Rojo Fenol
Principio Esta prueba determina como la bacteria utilizada
produce la enzima ureasa capaz de catabolizar urea
en amonia y bixido de carbono. Esto resulta en un
aumento en pH (alcalino).
Reaccin negativa Color salmn (la ureasa no cataboliz urea en
amonia) (si se observa amarilla el pH del medio est
cido)
Reaccin positiva Color rosa Fuschia (la ureasa cataboliz la urea en
amonia) (Caracterstico en Proteus)
Prueba de &rea Prueba de &rea
Medios selectios y dierenciales Medios selectios y dierenciales
Medios de cultio selectios Medios de cultio selectios
WPermiten el crecimiento de ciertos
organismos, mientras previenen o retardan el
crecimiento de otros.
Wa seleccin puede ser llevada a cabo a travs
del:
WControl de los ingredientes del medio
WAlteracin de componentes atmosfricos
WAjuste de la temperatura de incubacin
Medios de cultios dierenciales Medios de cultios dierenciales
WNo previene el crecimiento del organismo
pero podra causar que las colonias se
desarrollen diferentes a otras colonias de los
otros organismos presentes en el medio.
WTiene un ingrediente que produce un cambio
observable (cambio en color o pH) en el
medio cuando ocurre una reaccin
bioqumica.
Medio: MB Medio: MB
osin osin--Methylene Blue agar` Methylene Blue agar`
Agente selectivo Eosin y methylene blue
Organismo que
crece
acilos Gram negativo
Sustrato actosa, sucrosa
Reacciones y
descripciones
W Fermentadores de lactosa: colonias
violeta oscuro o colinas con el
centro oscuro y bordes sin color
transparentes.
W No fermentadoras de lactosa o
sucrosa: colonias sin color.
osin methylene blue osin methylene blue
Medio: Mannitol Medio: Mannitol--Salt Agar` Salt Agar`
Agente selectivo $odium chloride
Organismo que
crece
$taphylococcus aureus
Sustrato anitol
Reacciones y
descripciones
W Fermentadores de manitol:
colonias rodeadas por zona
amarilla.
W No fermentadoras de manitol:
colonias pequeas que no cambian
en color o rodeadas por zona roja.
Mannitol salt agar Mannitol salt agar
Medio: MacConkey Agar` Medio: MacConkey Agar`
Agente selectivo ile salts, crystal violet
Organismo que
crece
acilos Gram negativo
Sustrato actosa
Reacciones y
descripciones
W Fermentadores de lactosa: colonias
rosas rodeadas por zona rosada.
W No fermentadoras de lactosa:
colonias sin color.
MacConkey MacConkey
Medio: Brillant Green Agar` Medio: Brillant Green Agar`
Agente selectivo rillant green
Organismo que
crece
acilos Gram negativo
(no se utiliza para $almonella typhi)
Sustrato actosa, sucrosa
Reacciones y
descripciones
W Fermentadores de lactosa: colonias
amarillas/verdosas rodeadas por
una zona amarilla/verdosa.
W No fermentadoras de lactosa:
colonias blancas/rosadas rodeadas
por una zona rojo brillante.
Brilliant Green Agar Brilliant Green Agar
Medio: ektoen nteric Agar` Medio: ektoen nteric Agar`
Agente selectivo ile salts
Organismo que crece acilos Gram negativo
Sustrato actosa, sucrosa, salicina y amino
cidos que contienen sulfuro.
Reacciones y
descripciones
W Fermentadores de lactosa:
colonias rosas.
W No fermentadoras de lactosa:
colonias verdes.
W Fermentadores de salicina:
colonias rodeadas de zonas rosas.
W No fermentadores de salicina: no
cambia.
W Productores de h
2
s: colonias con
los centros negros.
ektoen ektoen
Produccin de DNAse Produccin de DNAse
Sustrato na
Reactivos y
tiempo
0.1n cido hidroclrico
24 a 48 horas
Reaccin positiva Zonas claras alrededor de la colonia
despus de aadir HCl.
Reaccin negativa Zonas no claras ("Cloudy") alrededor de
la colonia despus de aadir HCl.
Prueba Prueba DNAsa DNAsa