ASIGNATURA:

BIOQUIMICA

DEPARTAMENTO: CIENCIAS FISIOLGICAS SECCIN: BIOQUMICA

Ms.C. Luz Marina Prez V.

TEMA: ENZIMAS
OBJETIVOS
Al finalizar la conferencia de ENZIMAS los estudiantes estarn en capacidad de: Definir el termino de Enzima Mencionar las caractersticas de una enzima Diferenciar a las enzimas de los catalizadores inorgnicos Mencionar cuales son los factores que pueden intervenir en la catlisis enzimtica Definir el centro cataltico, energa de activacin Explicar cual es la teora mas acertada para explicar la accin enzimtica y por qu. Mencionar los parmetros que influyen en la actividad enzimtica Definir el Km. Mencionar los tipos de inhibicin enzimtica Mencionar los diferentes mecanismos de regulacin enzimtica Mencionar la importancia de la Enzimologa clinica. clinica.

SUMARIO: Introduccin Localizacin, clasificacin y Nomenclatura Bases de la accin Enzimtica Catlisis Enzimtica Especificidad Enzimtica Mecanismos de la catlisis Cintica Enzimtica Factores que afectan la actividad Enzimtica Ecuacin de Michaelis-Menten MichaelisSignificado del Km y Vmax Regulacin enzimtica

Kuhne 1878 Zyme = levadura

PROTEINAS (EXCEPT0 LAS RIBOSIMAS) son

Catalizadores Biolgicos Altamente Especificas

Necesarias

ENZIMAS

EN LAS REACCIONES BIOQUMICAS Para Aumenta la Velocidad de reaccin sin verse alteradas en el proceso.

Caractersticas en la catlisis enzimtica

Que se produzcan a una velocidad adecuada para la clula

Que se canalicen hacia rutas que sean tiles y no se despilfarre energa

Que pueda regularse la produccion de sustancias segn las necesidades

No modifican la Constante de equilibrio de la reaccin.

E+S

ES

E+P

LOCALIZACIN CELULAR DE LAS ENZIMAS

EXTRACELULARES Son Enzimas plasmticas funcionales: lipoproteinlipasa, seudocolinesterasa, proenzimas de la coagulacin sanguinea etc. INTRACELULARES Son Enzimas plasmticas no funcionales: sangre Amilasa pancretica, Lipasa, Fosfatasa alcalina, Fosfatasa cida etc.

ENZIMAS INTRACELULARES
Los enzimas que se utilizan en el diagnstico son enzimas intracelulares cuya concentracin en plasma es muy baja. Su relacin concentracin plasma/concentracin tejidos es < 1:1000 La presencia de niveles elevados de enzimas en el suero implica que ha habido lesin (muerte?) celular lo que permite la salida a la circulacin de enzimas normalmente confinados en el interior de las clulas. La cantidad de actividad enzimtica medible depende de su liberacin al medio, de la estabilidad del enzima, de su velocidad de eliminacin. Se trata de enzimas (o isoenzimas) que se expresan mayoritariamente en un determinado tejido, pudiendo servir de marcador tisular especfico.

LOCALIZACIN CELULAR DE LAS ENZIMAS

Cadena Resp., F.O., TranshidrogenasaSistemas de transporte, transporte de Ac. grasos

PDH, CK, C.urea, Glutamato Deshidrogenasa, Oxidacin de los Ac. Grasos, Replicacin, Transcripcin, Traduccin,

Elongacin de los Ac. Grasos Desaturacin de los Ac. Grasos, Sintesis de fosfolipidos, Monoamino Oxidasa.

CLASIFICACION DE LAS ENZIMAS

1.Oxidoreductasas: transferencia de electrones 2. Transferasas: reacciones de transferencia de grupo (no agua) 3. Hidrolasas: reacciones de hidrlisis 4. Liasas: adicin de grupos a dobles enlaces o formacin de dobles enlaces por eliminacin de grupos 5. Isomerasas: transferencia de grupos dentro de la misma molcula para dar ismeros 6. Ligasas: formacin de enlaces C-C, C-S, C-O y C-N por reacciones de condensacin acopladas a hidrlisis de ATP

NOMENCLATURA DE LA COMISIN ENZIMTICA un cdigo numrico, encabezado por las letras EC (enzyme commission). cuatro nmeros separados por puntos. El primer nmero indica a cual de las seis clases pertenece la enzima, el segundo se refiere a distintas subclases dentro de cada grupo, el tercero y el cuarto se refieren a los grupos qumicos especficos que intervienen en la reaccin.

EL NOMBRE SISTEMTICO DE UNA ENZIMA:

Consta actualmente de 3 partes: el sustrato preferente el tipo de reaccin realizada terminacin "asa"
Ejemplo: Identificacin EC 5.3.1.1. Nombre sistemtico Triosa fosfato isomerasa

BASES DE LA ACCIN ENZIMTICA: ENERGA DE ACTIVACIN Para que se de una reaccin qumica tienen que verificarse 3 condiciones: 1.- Los reactivos, llamados sustratos en enzimologa, deben colisionar 2.- La colisin molecular tiene que ocurrir con una orientacin adecuada (las enzimas aumentan la probabilidad) 3.- Los reactivos deben poseer suficiente energa para alcanzar el estado de transicin. Esta energa se llama energa de activacin

EN LAS REACCIONES BIOQUIMICAS

1. Energa de activacin: barrera de energa que hay que superar para que se produzca la reaccin. Es la energa necesaria para: Alinear grupos reactivos Formar cargas inestables transitorias Reordenar enlaces 2. Superada esta barrera, se llega a un estado activado o de transicin en el que se produce la orientacin y condiciones adecuadas para la reaccin.

LAS ENZIMAS ACELERAN LAS REACCIONES DISMINUYENDO LA ENERGA DE ACTIVACIN

La enzima se une a la molcula de sustrato y la hace adoptar un estado intermediario semejante al de transicin pero de menor energa Esta energa de activacin y la conversin del intermediario en producto son menores que la energa de activacin de la reaccin sin catalizar Bioqumica Mathews, van Holde y Ahern. Addison Wesley 2002

CMO ACTAN LAS ENZIMAS

Una enzima une la molcula de sustrato de forma especfica en una regin denominada CENTRO ACTIVO que suele ser un bolsillo o una hendidura que se forma entre las cadenas laterales de los aminocidos. Estas cadenas: Facilitan la unin del sustrato (especificidad de sustrato) Intervienen en la catlisis (centro cataltico) CENTRO CATALTICO: puede incluir tambin: Coenzimas (molculas orgnicas derivadas de vitaminas) Cofactores (molculas inorgnicas como iones metlicos) puede o no coincidir con el centro activo

CENTRO ACTIVO
Regin que se une al sustrato y contribuye con los residuos que participan en la formacin y rotura de enlaces (grupos catalticos) 1.- Supone una porcin relativamente pequea del volumen total de la enzima 2.- Es una entidad tridimensional 3.- Se unen a los sustratos por fuerzas relativamente dbiles 4.- Son hoyos o hendiduras de las que suele quedar excluida el agua, salvo que sea un componente de la reaccin 5.- La especificidad del enlace depende de la disposicin de los tomos del centro activo

ESPECIFICIDAD DE ACCION
Las enzimas difieren de los catalizadores no proteicos.
Especificidad optica o estereoespecificidad: Las E. muestran una especificidad ptica absoluta, por lo menos para una porcin de la molcula del sustrato o puede extenderse en su totalidad. Maltasa cataliza la hidrlisis de los alfa. La d aminooxidasa. Especificidad de grupo o relativa: actua sobre una clase de unin covalente en substratos extrechamente relacionados,

TEORAS PROPUESTAS PARA EXPLICAR LA ACCIN ENZIMTICA

CINETICA ENZIMATICA

FHGHH GGFGDFG GGDFGDF GGFGDFGDFG

HIPOTESIS BSICA DE LA ECUACION DE MICHAELIS -MENTEN

LAS ENZIMAS SE SATURAN

ECUACION DE MICHAELIS -MENTEN

VKJ FDFDFDF FDFDF DFDFSD FDFF FDFFDFFF

PARAMETROS QUE INFLUYEN EN LA VELOCIDAD DE REACCIN ENZIMTICA

EFECTO DEL pH SOBRE LA ACTIVIDAD ENZIMTICA

INHIBICIN DE LA ACTIVIDAD ENZIMTICA

INHIBIDORES REVERSIBLES COMPETITIVOS

INHIBICIN COMPETITIVA

INHIBIDORES REVERSIBLES NO COMPETITIVOS

INHIBICIN NO COMPETITIVA

INHIBICIN IRREVERSIBLE

REGULACIN DE LA ACTIVIDAD ENZIMTICA

MECANISMOS DE REGULACIN ENZIMTICA

Regulacin de Rutas Metablicas

ALOSTERISMO

MODIFICACIONES COVALENTES
Regulacin de la Glucgeno Fosforilasa

ACTIVACIN PROTEOLTICA

OTROS MODOS DE REGULACIN ESPECFICOS