EXTRACCIÓN Y CARACTERIZACIÓN DE METABOLITOS

SECUNDARIOS A PARTIR DE Bacillus thuringiensis.

Autor(a): Q.F.B. Melanie Ramírez Rojano

BIOTECNOLOGÍA

DOCENTE ESTUDIANTES
SOTO GONZALES, Heberth Hernan CATACORA CCALLATA, Ernesto Elias
CHUCUYA TICONA, Sarai Antonia
 EXTRACCIÓN Y CARACTERIZACIÓN DE METABOLITOS SECUNDARIOS
APARTIR DE BACILLUS THURINGIENSIS

Los Bacillus son capaces de Los metabolitos primarios son
producir un amplio rango de los que se producen en la fase de
metabolitos secundarios de crecimiento de un microorganismo
RESUMEN naturaleza y estructura.
los secundarios son moléculas sintetizadas
por determinados microorganismos en la fase
estacionaria
son necesarios para la
sobrevivencia del
microorganismo
no son imprescindibles
para el microorganismo
. La amplia variabilidad estructural de estos
compuestos ha atraído la curiosidad de químicos
y las actividades biológicas han inspirado a la
industria farmacéutica para buscar nuevas
estructuras en cultivos microbianos .

la extracción y caracterizacion de metabolitos secundarios y su purificación a partir de un extracto crudo de un cultivo celular de Bacillus
OBJETIVO thuringiensis utilizando técnicas cromatográficas en columna, TLC y placa preparativa.

Dentro de todos las bacterias, el

La biotecnología emplea la biología, la microbiología
género Bacillus, es capaz de producir un
y la química, con gran uso en la farmacia, medicina,
amplio rango de metabolitos secundarios de
etc. A partir de estas áreas se pudo descubrir nuevos
naturaleza y estructura muy diferente.
fármacos.

INTRODUCCION
Esta resistencia patrones de uso indiscriminado de los aisló una bacteria de Bacillus se propuso
demanda que se haga un antibióticos que están actualmente en thuringiensis de un extraer y
esfuerzo para buscar agentes uso provocan la aparición continua de suelo de Mérida Yucatán que mostró purificar
antibacterianos organismos resistentes a estos una coloración marrón en placas de metabolitos
efectivos contra las bacterias antibióticos. cultivo en secundarios de
patógenas. crecimiento. esta cepa

La biotecnología se refiere a
toda aplicación tecnológica
que utilice sistemas
biológicos y organismos
ANTECEDENTES vivos o sus derivados para la
creación o modificación de
productos.
Objetivos generales
OBJETIVOS
Objetivos especiíficos
Metabolismo secundario: fuente de productos
Algunos ejemplos son el diseño de
Entre las aplicaciones antibactericidas y antifúngicos
organismos para producir
de la Biotecnología se
antibióticos, el desarrollo de vacunas
encuentra la Metabolismo secundario: fuente de productos
y nuevos fármacos, los diagnósticos
Biotecnología roja que antibactericidas y antifúngicos
moleculares, las terapias
se aplica a la
utilización de
regenerativas y el desarrollo de la
Metabolismo secundario: fuente de productos
ingeniería genética para curar
biotecnología en antibactericidas y antifúngicos
enfermedades a través de la terapia
procesos médicos
génica.
Metabolismo secundario: fuente de productos
antibactericidas y antifúngicos
Probar la actividad antibacteriana de los diferentes metabolitos secundarios contra bacterias
muy importantes como lo son: Vibrio cholerae, Vibrio parahemolyticus, Shigella, Klebsiella
pneumoniae y Listeria monocytogenes.
Obtener un extracto crudo del caldo de cultivo de B. thuringiensis.
Realizar pruebas de solubilidad al extracto crudo.
Purificar mediante cromatografía en columna los diferentes metabolitos secundarios.
Caracterizar mediante técnicas de espectroscopia cada uno de estos metabolitos secundarios.
Probar la actividad antibacteriana de los diferentes metabolitos secundarios contra bacterias
muy importantes como lo son: Vibrio cholerae, Vibrio parahemolyticus, Shigella, Klebsiella
pneumoniae y Listeria monocytogenes.
 Obtención del extracto crudo

Análisis de la solubilidad del extracto crudo

Elucidación del Ciclo (L-Pro-L-Leu) (3S,8aS)-hexahidro-3-

isobutilpirrolo[1,2-a]pirazin-1,4-diona.

DISCUSIÓN DE Elucidación del Ciclo (L-Pro-L-Val) (3S,8aS)-hexahidro-3-

isopropilpirrolo[1,2-a]pirazin-1,4-diona.
RESULTADOS
Elucidación del Ciclo (L-Pro-L-Phe) (3S,8aS)-3-
benzilhexahidropirrolo[1,2-a]pirazin-1,4-diona.

Elucidación del Ciclo (L-Pro-L-Tyr)

(3S,8aS)-3-(4-hidroxibenzil)-
hexahidropirrolo[1,2-a]pirazin-1,4-
diona.

Prueba de actividad antibacteriana de los

compuestos obtenidos.
 Se obtuvo un extracto crudo a partir de un cultivo de B. thuringiensis cuyo análisis espectroscópico por
RMN de 1H y 13C mostró una gran complejidad de composición.

Se realizaron las pruebas de solubilidad, mostrando una alta polaridad de los compuestos.

A pesar de esta gran complejidad, se encontraron los sistemas adecuados para la separación de cinco
productos puros mediante cromatografía en columna.

Por medio de todas las técnicas espectroscópicas y espectrométricas se pudieron identificar los cinco
CONCLUSIONES compuestos elucidando su estructura

Se pudo obtener la difracción de rayos X de una de ellas confirmando su estructura y estableciendo su

configuración absoluta como (S,S).

El compuesto L-Pro-L-Tyr presentó dos formas diferentes (polimorfos) uno en forma de polvo y otro
en forma de cristal.

Se comprobó mediante antibiogramas que estos compuestos tienen actividad antibacteriana contra bacterias
de gran interés médico como lo son V. cholerae, V. parahemolitycus, Klebsiella pneumoniae, Shigella spp y
L. monocytogenes.

Se pudo obtener la difracción de rayos X de una de ellas confirmando su estructura y estableciendo su

configuración absoluta como (S,S).

El compuesto L-Pro-L-Tyr presentó dos formas diferentes (polimorfos) uno en forma de polvo y otro
en forma de cristal.
 DIAGRAMA
GENERAL DE
TRABAJO