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Fundamentos de

microbiología
Maria Eugenia Castaño O.
Historia
 Siglo 19, reinos animal y vegetal.
 Luego de comenzar a conocerse la
existencia de microorganismos, en 1866,
Ernst Kaeckel creó un tercer reino que
llamó los Protistas.
 Procariotae: Robert G. E. Murray en 1968.
5 reinos
 1969, R. H. Whittaker:
 Monera: incluye a todos los microorganismos
procariotas.
 Protista: todos los microorganismos eucariotas
unicelulares u ocasionalmente multicelulares.
 Fungi: hongos en sus diversas formas.
 Plantae: corresponde al reino vegetal
 Animalia: corresponde al reino animal.
Con la biología molecular…
 En 1978, Carl R. Woese propuso elevar
los tres tipos de células a un nivel por
encima del reino, llamado dominio y de
ahí surgió el sistema de clasificación de
tres dominios:
 Dos tipos de células procariotas (arqueas
y bacterias) y un tipo de células
eucariotas.
ARN ribosómico…
Árbol filogenético universal
Diferencia entre la estructura celular de
Bacteria, Archaea y Eucarya
Propiedad Bacteria Eucarya Archaea
Membrana NO SI NO
nuclear
Organelos NO SI NO
Tamaño 70S 80S 70S
ribosoma
Peptidoglicano SI NO NO
en la pared
Esteroles en NO SI SI
membrana (hopanoides)
Lípidos de Ester unidos Ester unido a Eter,
membrana a glicerol glicerol ramificados
Identificación de especies
Criterio Metodología de ejemplo

Observación Macroscópica Observación de colonias


(formas, pigmentos, etc.)

Observación Microscópica Tinciones (Gram)


(formas, agrupación)
(esporas, cápsula, flagelos, etc.)

Metabolismo Baterías bioquímicas


(uso de sustratos)
[fermentación]
(producción de metabolitos
secundarios)

Otras propiedades Resistencia a antibióticos


(antibiograma, MIC, etc.)
TAXONOMÍA

La taxonomía ordena, describe y clasifica


a todos los seres vivos, teniendo como la
unidad de una clasificación a la especie.
Taxonomía bacteriana

CLÁSICA
 Algunos genotípicos: % G+C, hibridación ADN-
ADN
 Caracteres filogenéticos
 Caracteres fenotípicos (morfología, nutrición,
etc.)
 Ponderación de caracteres
Características fenotípicas clásicas
de valor taxonómico

Morfología: forma, tamaño y tinción


Nutrición y fisiología: fotótrofo, quimiótrofo,
aerobio o anaerobio, temperatura y pH óptimos,
fuentes alternativas de C, N y S
Movilidad: tipo y disposición de flagelos
Otros: pigmentos, inclusiones celulares, sensibilidad
a antibióticos, patogenicidad
Reino: Bacterias
División (filum)
Clase
Orden
Familia
Genero
Especie
Proteobacteria
Gamma Proteobacteria
Enterobacteriales
Enterobacteriaceae
Escherichia
Escherichia coli
Términos taxonómicos
(clasificación)
 Familia: un grupo de géneros relacionados.
 Género: un grupo de la especies relacionadas.
 Especie: un grupo de cepas relacionadas.
 Cepa: aislamiento de una especie en particular
 Tipo: los grupos de cepas dentro de las
especies (por ejemplo biotipos, serotipos).
Bacterias: 23 filum (divisiones), 3 de importancia clínica
•Proteobacteria
•Firmicutes
•Actinobacteria
•Bacteroides, Spirochaetes y Chlamydiae
Sistema binomial de nomenclatura
(Linneo)

Escherichia coli

Escherichia coli o E. coli

El creador de la Taxonomía fue el botánico


sueco Carl von Linneo
Formas
Cocos (esferas) Bacilos (bastones) Espiroquetas
Tamaños
Componentes de la bacteria
Membrana celular
Coloración de Gram
Flagelos
Sólo detectados por técnicas de tinción específicas
FLAGELOS

A) Monótrico B) Anfítrico

C) Lofótrico D) Perítrico
CÁPSULA

Funciones
• Fijación o adherencia
• Evasión de fagocitosis
ESPORAS
Metabolismo y
Fisiología
Metabolismo heterotrófico
ATP
ATP
ATP

ATP

Síntesis
Hidrólisis

Compuestos complejos

 Fermentación: Algunas moléculas de ATP


 Respiración: Producción de energía. O2, NO3-, SO4--, CO2
Metabolismo
Condiciones para el crecimiento microbiano
Agua
Medios de cultivo
Fuente de energía
Nutrientes Fuentes de C, N, otros
Crecimiento elementos
Micronutrientes,
factores de crecimiento
Temperatura
Condiciones pH
de cultivo Luz
Aireación
Agua
Crecimiento de un microorganismo en
medio de cultivo líquido

1- Fase de latencia
2- Fase exponencial
3- Fase estacionaria
4- Fase de muerte
Cinética de crecimiento
 Fase lag o latencia - las células se adaptan al nuevo
ambiente, aún no se dividen
 Fase exponencial (log) - velocidad máxima de crecimiento
bajo condiciones particulares, tiempo de generación mínimo
 Fase estacionaria - sin crecimiento neto,
 nutrientes limitados, pero suficientes para mantener
actividad
 acumulación de desechos, inhibición del crecimiento
 Fase de muerte - velocidad de muerte celular > velocidad
de división celular
Requerimientos de Oxígeno
Clasificación de los microorganismos según el efecto del oxígeno:

Aerobios

Obligados: Requieren oxígeno (21% o más)

Microaerofílicos: Requieren O2 pero a niveles menores que el


atmosférico (5-10%)

Anaerobios

Facultativos: No requieren O2, pero el desarrollo es mejor


con él.

Obligados: No toleran el O2, muere en su presencia


Clasificación de los medios de cultivo
Según su naturaleza física
* líquidos
* sólidos - solidificante: agar-agar, silico-gel
* semi-sólidos

Según su composición
* definidos o sintéticos: composición química conocida
* no definidos o complejos: composición química no
definida, enriquecidos con peptonas, extracto de
carne, de levadura, de suelo, sangre
Clasificación de los medios de cultivo
Según su uso en el laboratorio
* Enriquecidos
* Selectivos o inhibitorios: Contienen sustancias que inhiben
el desarrollo de algunos microorganismos permitiendo el
crecimiento de otros o cuya composición permite el desarrollo de
un grupo determinado
Ej. agar-antibióticos; agua, sales, luz, para algas, medios con
NaCl superior a la concentración fisiológica
* Diferenciales: Contienen indicadores para diferenciar los
distintos tipos de microorganismos que puedan crecer en él.
Ej. azúcar fermentable: lactosa, indicador de pH
Medios de cultivo
MEDIO SELECTIVO Y
DIFERENCIAL
Colonia Lactosa negativa

Colonia Lactosa positiva


Agar sangre
S. epidermidis en agar sangre
Agar sangre

HEMOLISIS EN AGAR SANGRE

HEMÓLISIS COMPLETA HEMÓLISIS PARCIAL


Infección

Presencia y replicación de un
microorganismo en los tejidos de
un huésped.
RELACIÓN CON LA CÉLULA HUÉSPED

Membrana
celular
Intracelulares
facultativos

Intracelulares
obligados

Célula
huésped

Extracelulares
Infección
 La intensidad de la respuesta depende de
factores asociados con el huésped y el agente
infeccioso.
 La enfermedad es la expresión clínica de la
infección.
 Infección subclínica: Limitada a una respuesta
inmunológica del huésped. Puede ser
diagnosticada sólo por métodos serológicos
(presencia de Ac muy elevados iniciales o
aumento igual o superior a 4 veces)
RELACIONES
ENTRE HUÉSPED
Y BACTERIA
HOSPEDERO/HUÉSPED

CUALQUIER ORGANISMO QUE


PERMITE EL CRECIMIENTO DE
UN MICROORGANISMO
Modos de Transmisión
 Contacto directo
 Contacto indirecto
 Transmisión por gotas
 Manos
 Vectores
 Nosocomial
Resultado de las
interacciones

 VIRULENCIA DEL ORGANISMO


INFECTANTE
 RESISTENCIA DEL HOSPEDADOR
Flora normal
 Microorganismos de baja virulencia que
siempre están presentes en un hospedero
adulto, al cual colonizan en la infancia.

 Microambientes específicos
 Población estable
 Asociados íntimamente a epitelios

INFECCIÓN????
Flora
normal
humana
Defensas anatómicas

 Piel, mucosas, conjuntiva


 Aparato digestivo
 Aparato respiratorio
 Aparato genito-urinario
Antagonismo microbiano
 Bacteriocinas
 Producción de metabolitos tóxicos (ej ácidos
grasos de cadena corta)
 Producción de peróxido de hidrógeno
 Degradación de toxinas bacterianas por enzimas
proteolíticas
 Consumo de nutrientes esenciales
 Competencia por receptores de adherencia
 Inducción de anticuerpos contra la flora no
residente
Factores que influencian
infecciones
 Influencian exposición: manejo, alimentación,
raza, género, etc.
 Influencian infección y severidad de enfermedad:
edad, infecciones coexistentes, constitución
genética, estado inmune, etc.
 Stress
 Infecciones crónicas
 Temperaturas extremas
Consecuencias de la interacción

 Ausencia de infección
 Colonización

 Infección subclínica
 Enfermedad clínica
 Muerte
Mecanismos de patogenicidad
bacteriana
 Se ve favorecida por la secreción de una
serie de enzimas que facilitan la rotura de
las barreras tisulares (piel y mucosas).
 Los estafilococos y estreptococos son los
productores más importantes de ellas:
hemolisinas, fibrinolisinas, hialuronidasa,
leucocidinas, coagulasas,etc
Mecanismos de patogenicidad bacteriana

CLASIFICACIÓN DE LAS TOXINAS

Patrón de liberación: endotoxina o exotoxina

Blanco celular / tejido: enterotoxinas, neurotoxinas,


leucotoxinas, hemolisinas.

Mecanismo de acción:
Toxinas que dañan la membrana (citolisinas)
Toxinas moduladoras de receptor
Toxinas internalizadas / enzimáticamente
Toxinas ADP-ribosilantes
Toxinas adenilato ciclasa

Efectos biológicos: dermonecrótica, productoras de


edema, hemolítica, productoras de diarrea.
TOXINAS BACTERIANAS
EXOTOXINAS ENDOTOXINAS

• Excretadas • Parte de pared celular


• En G+ y G- • En G-
• Proteínas • LPS
• Inestables • Estables
• Muy antigénicas • Poco antigénicas
• Muy tóxicas • Toxicidad moderada
• Producen toxoides • No producen toxoides
• Muy específicas • Muy específicas
• Actividad enzimática • No tienen actividad enzimática
• Pirogénicas • Ocasionalmente dan fiebre
Mecanismos de patogenicidad bacteriana

 Capacidad de adherencia a la superficie


de las mucosas y los epitelios de
diferentes microorganismos
 En la boca las bacterias, principalmente
Estreptococo viridans, se adhieren a los
dientes, encías, mucosa bucal y la lengua.
Mecanismos de patogenicidad bacteriana

 En las vías urinarias, la patogenicidad de E.


coli está directamente relacionada con su
grado de adherencia; aquellas con mayor
grado se asocian a cuadros de pielonefritis.
 La adherencia a la mucosa intestinal es un
requisito para la producción de diarreas por
cepas de E. coli y V. cholerae.
FACTORES DE ADHERENCIA
BACTERIANA

• Adhesina
• Fimbria
• Glucocálix y Cápsula
• Lipopolisacárido (LPS)
• Ácidos teicoicos y ácidos lipoteicoicos (LTA)
PILIS
Proyecciones moleculares.
Compuestos de moléculas de proteína,
pilina, agrupadas en forma de tubo con
un centro hueco
Hay dos tipos:
- común
- sexual

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