PROTEINAS TOTALES Y

ALBÚMINA

Sebastián Gómez Herrera

Ayudante de Cátedra de Bioquímica
Logros del Diferenciar las principales proteínas presentes en el plasma
aprendizaje sanguíneo.

Describir la estructura y funciones de las proteínas plasmáticas.

Identificar las principales alteraciones clínicas de las proteínas

plasmáticas

Realizar la dosificación de albúmina y globulinas en suero

 Justificación
El plasma constituye la fracción líquida de la sangre que contiene varios componentes tales como: agua,
electrolitos, metabolitos, hormonas, proteínas entre otros, por lo tanto, es fundamental el estudio de
estos componentes para el desarrollo de la Bioquímica Clínica.
En esta práctica se analizará la concentración de proteínas plasmáticas, las cuales constituyen un grupo
heterogéneo de sustancias que han sido identificadas como: fibrinógeno (proteína ausente en el suero
debido a su consumo durante la coagulación), albúmina y globulinas, que cumplen diversas funciones
biológicas esenciales. El estudio de la concentración de las proteínas plasmáticas o séricas, constituye un
importante marcador en la identificación de distintos estados patológicos.
 PROTEINAS - características
4 Kcal/g

 C-H-O-N  Construcción de hormonas  PP estructural  colágeno

 Enzimas  catalizadores  Ab  defensa  Neuropéptido
 Transporte  PP construcción  actina –  Ag bacteriano
O2  Hb miosina
  Presión oncótica
 Lípidos  lipoproteínas
 Almacén de aa
 PP de coagulación 
fibrinógeno
 Según su morfología y solubilidad
 Fibrosas
 Insolubles en H2O
 Alargadas
 Estructurales – soporte
 Colágeno – elastina – queratina
 Globulares
 Mas solubles en H2O
 Formas esféricas
 La mayoría
 Albumina – enzimas – pp plasmáticas – membrana celular
 PROTEÍNAS PLASMÁTICAS

 Mediante electroforesis ha sido posible identificar las siguientes proteínas presentes en el suero
sanguíneo: albúmina y globulinas: α1, α2, β y ϒ

Las proteínas plasmáticas pueden clasificarse en dos

grupos: las que son sintetizadas en el hígado, como la

albúmina, y las inmuno- globulinas, que son

producidas por las células plasmáticas de la médula

ósea, normalmente como parte de la respuesta

inmunitaria.
 Electroforesis
La electroforesis es una técnica para la separación
de moléculas según la movilidad de estas en un campo
eléctrico
Se basa en la separación de moléculas de ADN o de
proteínas, según su carga y tamaño.
Los ácidos nucleicos ya disponen de una carga eléctrica
negativa, que los dirigirá al polo positivo, mientras que
las proteínas se cargan al unirse con sustancias como
el SDS (detergente) que incorpora cargas negativas de
una manera dependiente de la masa molecular de la
proteína
 ALBUMINA
 Principal componente proteico del plasma, Carece de actividad enzimática u hormonal conocida
 60% del contenido proteico del suero
 585 aminoácidos, 17 enlaces disulfuro y pesa alrededor de 69 kDa
 Soluble en agua debido a su carga negativa a pH fisiológico
 Sintetizada en el parénquima hepático  14-15 g diarios
 Regulada por el ingreso proteico diario e inhibida por citosinas inflamatorias
 Su catabolismo se realiza por pinocitosis en todos los tejidos, su vida media es de 15 a 19 días
 FUNCIONES
 Tamaño relativamente pequeño y abundante en el plasma
 Contribuye a la osmolaridad del  responsable del 80% de la presión oncótica
 Descenso  desencadenaría la salida de líquido al espacio extravascular produciendo edema
 Unirse a varios ligandos tales como: ácidos grasos libres, fosfolípidos, calcio, fármacos,
hormonas esteroideas y tiroideas, triptófano y bilirrubina para transportarlos en el plasma
 TRANSFERRINA
La unión de los iones férricos a la
transferrina protege contra los efectos
tóxicos de estos iones.

FERRITINA
Actúa como la reserva de hierro en el
hígado y en la médula ósea. La cantidad de
ferritina en plasma es proporcional a la
cantidad de hierro almacenado

CERULOPLASMINA
Ayuda a exportar cobre del hígado a los
tejidos periféricos y es esencial para la
regulación de las reacciones de oxidación-
reducción, transporte y utilización del hierro.
Aumenta en hepatopaías
 GLOBULINA
Las globulinas son un grupo de proteínas de la sangre. El sistema inmunitario las produce en el
hígado. Las globulinas juegan un papel importante en el funcionamiento del hígado, la
coagulación de la sangre y el combate contra las infecciones. Hay cuatro tipos principales de
globulinas: alfa 1, alfa 2, beta y gamma
Las globulinas son proteínas más grandes que la albúmina.
GLOBULINAS FUNCIONES

α1 globulinas Alfa 1 – antitripsina Inhibidor de la tripsina y elastasa

Antiquimiotripsina Inhibidor de la quimiotripsina
transcobalamina Transporte de la Vitamina B12
Alfa 1 lipoproteínas Transporta colesterol ( HDL) y vitaminas liposolubles

Plasminógeno Disuelve trombos

Protrombina Factor de coagulación
α2 globulinas Haptoglobina Unión a la hemoglobina
Ceruloplasmina Transporte de Cobre
α2 macroglobulina Inhibidora de proteasas
α2 lipoproteínas Transporte de lípidos ( VLDL)
β globulinas Beta – lipoproteínas Transporte de lípidos ( LDL)
Transferrina Transporte de hierro
Hemopexina Se une al Hem libre
Complemento principales C3 y C4 Fracciones del complemento
Fibrinógeno Factor de coagulación
ϒ globulinas Inmunoglubilnas G–M–A–E–D
 INMUNOGLOBULINAS
 Componente principal de la inmunidad humoral sintetizadas por los linfocitos B maduros
capaces de reconocer antígenos para su posterior destrucción
 Tetrámeros  2 cadenas ligeras (L) idénticas y 2 cadenas pesadas (P) idénticas unidas entre sí
mediante puentes de disulfuro
 Región constante (Fc) y región variable (Fab)
 Fab  reconocimiento y unión con el antígeno
 Fc  funciones específicas de cada inmunoglobulina
Ig G
 Inmunoglobulina más abundante (75% del total de inmunoglobulinas), que se producen en la
respuesta inmunitaria secundaria frente a la mayoría de bacterias, virus y toxinas. Facilita la
fagocitosis mediante la opsonización y fija complemento
IgA
 Representa del 10 al 15% de las inmunoglobulinas, presente en las secreciones
gastrointestinales, bronquiales, saliva, lágrimas y leche materna. Evita la fijación de bacterias
a las membranas mucosas

Ig M
 Representa del 5 al 10% del total de inmunoglobulinas, se produce durante la respuesta
inmune primaria a un antígeno, actúa como receptor de superficie de los linfocitos B
Ig D
 Actúa como receptor de antígeno en los linfocitos B. Su función específica es incierta

Ig E
 Participa en la hipersensibilidad inmediata al liberar histamina y citocinas inflamatorias de
los mastocitos tras la exposición a un alérgeno, también se produce frente a infecciones
parasitarias especialmente por helmintos
 PROTEINAS DE FASE AGUDA
 Las proteínas de fase aguda se denominan reactantes de fase aguda
 Procesos inflamatorios elevan su concentración desde solo el 50% hasta mayores valores como
1000 veces su concentración inicial y mantienen sus valores elevados en procesos
inflamatorios crónicos y neoplásicos
 Son proteínas de fase aguda la proteína C reactiva (PCR) que estimula la vía clásica del
complemento y se utiliza como un marcador de inflamación, infección y lesión tisular
 α1- antitripsina  inhibidor de la inflamación al neutralizar las proteasas liberadas en estos
procesos; haptoglobina; α1-glicoproteína acida y fibrinógeno
Desarrollo de la Práctica
 MATERIALES
 Pipetas de 1 mL
 1 Pipeta automática 10 µL
 1 Pipeta automática 10 µL
 6 Tubos de ensayo
 6 cubetas para espectrofotómetro
 REACTIVOS
 Suero
 Set de determinación de proteínas totales y albúmina en suero.
 EQUIPOS
 Espectrofotómetro
 Baño María
 FUNDAMENTO QUIMICO
 Proteínas Totales: El principio químico es análogo al de la reacción de Biuret. En un medio
alcalino el ion cúprico interacciona con los enlaces peptídicos de las proteínas para formar
complejos de color violáceo que pueden ser medidos en el espectrofotómetro a una longitud de
onda de 578 nm.
 Albúmina: El verde de bromocresol forma con la albúmina en buffer de citrato un complejo
coloreado. La absorbancia de este complejo es directamente proporcional a la concentración de
la albúmina en la muestra
 Procedimiento – Proteínas Totales
 Rotular los tubos de ensayo: B = blanco, S = estándar y D = desconocido
 Tomar 20 µL de estándar con una pipeta automática y colocarlos en el tubo S.
 Tomar 20 µL de suero desconocido con una pipeta automática y colocarlos en el tubo D.
 Colocar 1 mL de reactivo de trabajo en cada tubo (B, S y D)
 Incubar en el Baño María los tres tubos de ensayo a 25 °C durante 10 minutos.
 Trasvasar el contenido de los tubos en cubetas para espectrofotómetro rotuladas de la misma
manera que los tubos de ensayo.
 Leer la absorbancia en el espectrofotómetro a 578 nanómetros
 Procedimiento – Albúmina
 Rotular los tubos de ensayo: B = blanco, S = estándar y D = desconocido
 Tomar 10 µL de estándar con una pipeta automática y colocarlos en el tubo S.
 Tomar 10 µL de suero desconocido con una pipeta automática y colocarlos en el tubo D.
 Colocar 1 mL de reactivo de trabajo en cada tubo (B, S y D)
 Incubar en el Baño María los tres tubos de ensayo a 25 °C durante 5 minutos.
 Trasvasar el contenido de los tubos en cubetas para espectrofotómetro rotuladas de la misma
manera que los tubos de ensayo.
 Leer la absorbancia en el espectrofotómetro a 578 nanómetros
 VALORES DE REFERENCIA
 Los valores referenciales para nuestra población son:
 Proteínas totales: 7 - 8 g/dL
 Albumina: 4,27 – 4,88 g/dl
 Globulinas: 2,49 – 2,84 g/Dl
 Relación A/G: 1,5/ 1 - 2/ 1
 CORRELATO CLINICO

 La hipoalbuminemia
 disminución en la síntesis de albúmina
 malnutrición proteica – calórica
 daño del parénquima hepático
 pérdidas gastrointestinales a causa de enteropatías
 pérdidas renales como ocurre en la nefrosis
 Edema disminución de la presión coloidosmótica del plasma
 Valores elevados de albumina  estados de hemoconcentración por perdida de volumen
plasmático o debido a una técnica de dosificación incorrecta
 Valores bajos de inmunoglobulinas se presentan en Inmunodeficiencia humoral
caracterizada clínicamente por infecciones recurrentes y oportunistas
 Valores elevados de inmunoglobulinas  hiperinmunoglobulinemia policlonal o
monoclonal.
 IgM infecciones virales primarias y parasitosis sanguíneas como malaria
 IgG respuesta inmune secundaria a varios antígenos y también en casos de autoinmunidad
 IgA predomina en infecciones de la piel, tracto respiratorio e infecciones renales.
 Además, la multiplicación sin control de las células plasmáticas puede incrementar las
inmunoglobulinas conforme crece la masa clonal, presente principalmente en linfomas, leucemia
linfocítica crónica y macroglobulinemia
COVID 19
Diagnóstico serológico
COVID-19: Es una nueva enfermedad, causada por un nuevo coronavirus que no se había visto
antes en seres humanos
SARS CoV 2: Versión acortada del nombre del nuevo coronavirus “Coronavirus 2 del Síndrome
Respiratorio Agudo Grave”
Los  coronavirus son virus de ARN de cadena positiva envueltos
 ¿Por qué es importante la detección oportuna?
Evitar que un caso “asintomático” pueda esparcir el virus en sobremedida a su circulo social
cercano, pudiendo ocasionar un caso sintomático y grave en población vulnerable

Como vamos a detectar:

1. PCR
2. Anticuerpos en sangre