UNIVERSIDAD AGRARIA DEL ECUADOR

FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS

CARRERA DE ING. AGROINDUSTRIAL
 ASIGNATURA: BIOLOGÍA MOLECULAR Y CELULAR
DOCENTE: DRA. TAMARA BORODULINA PHD
 TEMA: TÉCNICAS MOLECULARES
GRUPO: #4
INTEGRANTES:
KEVIN JOSUÉ PEÑAFIEL SOLÍS
CAMILA MICHELLE MOREJÓN CHÁVEZ
LAURA ALEXANDRA NARANJO QUIROZ
LUIS ENRIQUE MONCAYO MACIAS
DOMENICA ADRIANA MORA CEREZO
JUNEY LISMARY PAREJA BRAVO
GENESIS ADRIANA CUADROS CHÁVEZ
DOMENICA BRIGGITTE MORALES ANDRADE
 CAMPUS/SEDE: GUAYAS – GUAYAQUIL
MAYO – SEPTIEMBRE
2020
 TECNICAS DE BIOLOGIA
MOLECULAR

COMUNES PARA ADN PARA ARN PARA

PROTEINAS

PCR (reacción en
ELECTROFORESIS cadena de la HIBRIDACIÓN IN
EN GEL polimerasa) SITU WESTERN BLOT

PCR cuantitativa o en
HIBRIDACIÓN tiempo real INMUNO-HISTO-
QUIMICA

ELISA (Enzyme
MICROARRAY CLONING
linked
immunosorbent
assay)

BIOCHIPS SOUTHERN BLOT

CITOMETRIA DE
FLUJO

SECUENCIACION
 ELECTROFORESIS EN GEL

• Es una técnica de separación molecular en el que el DNA, el RNA

o las proteínas se separan en una matriz de gel según su peso
molecular, gracias a la aplicación de un campo eléctrico para atraer
las moléculas a través del gen en una dirección determinada.

• Esta nos permite ver cuántos fragmentos diferentes de ADN están

presentes en una muestra y cuán grandes son unos con respecto a
otros.
 HIBRIDACIÓN

• La hibridación es un proceso por el cual se combinan dos

cadenas complementarias simples de ácidos nucleicos
(ADN o ARN) y se permite que formen una única molécula
de doble cadena por apareamiento de sus bases. Y el
proceso inverso, una doble cadena de moléculas de ADN (o
ARN o ADN/ARN) puede ser calentada para romper el
apareamiento de las bases y separar las dos hebras.

• La hibridación es parte de muchas técnicas importantes en

el laboratorio como la reacción en cadena de la polimerasa y
la hibridación de Southern.
 MICROARRAY

• Los microarrays son una tecnología en desarrollo para estudiar la expresión de

muchos genes a la vez. consiste en colocar miles de secuencias génicas en
lugares determinados sobre un portaobjetos de vidrio llamado chip.

• Una muestra que contiene ADN o ARN se pone en contacto con el chip. el
apareamiento de las bases complementarias entre la muestra y las secuencias
de genes en el chip produce una cantidad de luz que se puede medir. las áreas
del chip que producen luz identifican los genes que se expresan en esa
muestra.
 BIOCHIPS

Los biochip son empleados para la obtención de información biológica. En general el término biochip se
emplea dentro de este campo para referirse a los dispositivos en los que se alcanza una elevada densidad

de integración de un material biológico inmovilizado sobre una superficie sólida teniendo una analogía

con una elevada densidad de circuitos electrónicos presente en un chip microelectrónico.

Clasificación de acuerdo a su uso

• Biodispositivos: son aquellas aplicaciones de dispositivos
electrónicos en los seres vivos como los implantes de chips para
controlar los temblores en la enfermedad de Parkinson o los
implantes cocleares.

• Biocomputación: se emplean sustancias biológicas con la finalidad

de desarrollar nuevo hardware para procesos computacionales,
como ejemplo encontraríamos las memorias basadas en
conformaciones proteicas y la computación con ADN.
 La reacción en cadena de la polimerasa (PCR)

•Es una técnica de laboratorio utilizada para amplificar

secuencias de ADN. Este método utiliza secuencias
cortas de ADN llamados cebadores para seleccionar
la parte del genoma a amplificar.
•La PCR también es valiosa en varias técnicas de
laboratorio y clínicas, incluida la identificación de la
huella genética, la detección de bacterias o virus
(especialmente el del sida) también como el
coronavirus, y el diagnóstico de trastornos genéticos.
PCR cuantitativa o en tiempo
real

• Es una variante de la reacción en

cadena de la polimerasa (PCR)
utilizada para amplificar y
simultáneamente cuantificar de
forma absoluta el producto de la
amplificación de acido
desoxirribonucleico (ADN).
• Para ello emplea, al igual que la
PCR convencional, un molde de
ADN, al menos un par de
cebadores específicos, dNTPs, un
tapón de reacción adecuado y una
ADN polimerasa termoestable.
 CLONING

• La clonación de ADN es una técnica de biología

molecular que hace muchas copias idénticas de un
fragmento de ADN, como un gen.

• En un experimento típico de clonación, se inserta un gen

blanco en un fragmento circular de ADN llamado
plásmido.

• Las bacterias con el plásmido correcto se utilizan para

hacer más ADN plasmídico o, en algunos casos, se
induce la expresión del gen para hacer proteína.
 SOUTHERN BLOT

• Es una técnica de laboratorio utilizada para detectar una

secuencia específica de ADN en una muestra de sangre o
tejido.
• Una enzima de restricción se utiliza para cortar una muestra
de ADN en fragmentos que se separan mediante
electroforesis en gel.
• Los fragmentos de ADN son transferidos del gel a la
superficie de una membrana. la membrana se expone a una
sonda de ADN marcada con un marcador radiactivo o
químico. si la sonda se une a la membrana, entonces la
secuencia de la sonda está presente en la muestra.
 SECUENCIACION DEL
ADN

La secuenciación de ADN es un conjunto de métodos y

técnicas bioquímicas cuya finalidad es la determinación
del orden de los nucleótidos (A, C, G y T) en un
oligonucleótido de ADN. La secuencia de ADN constituye
la información genética heredable del núcleo celular, los
plásmidos, la mitocondria y cloroplastos (En plantas) que
forman la base de los programas de desarrollo de los
seres vivos. Así pues, determinar la secuencia de ADN es
útil en el estudio de la investigación básica de los
procesos biológicos fundamentales, así como en campos
aplicados, como la investigación forense.
HIBRIDACIÓN IN SITU

• Es una técnica de laboratorio

donde se utiliza una sonda, la
cual suele estar hecha de
ADN o ARN.
• Una molécula de cadena
sencilla con una porción
química o radiactiva puede
ser detectada; la zona de
cadena sencilla es entonces
hibridada, y ahí es cuando
comienza el proceso que
llamamos hibridación.
 WESTERN BLOT

• Es una prueba de laboratorio que

detecta anticuerpos para el VIH en la
sangre.
• Es un método confirmatorio solo se hace
si el resultado de ELISA es positivo. Esta
prueba permite fotografías para ser
representados los resultados.
 Inmunohistoquímica (IHC)

• Es un procedimiento histopatológico que se basa en la

utilización de anticuerpos mediante reacciones antígeno-
anticuerpo.
• Permite identificar marcadores antigénicos en los tejidos
embebidos en parafina y que luego se observan en el
microscopio óptico.
• Mide la expresión proteica utilizando especialmente
anticuerpos etiquetados o marcados que se unen a las
proteínas de interés.
 ELISA (Enzyme linked immuno
sorbete assay)

• Es una técnica de laboratorio que

identifica pequeñas partículas
antígenos y gérmenes que causan
enfermedades.
• Generalmente es la primera prueba
que se hace, para detectar la
presencia de anticuerpos ANTI-VIH.
• Los resultados son de lectura
numéricos, y no pueden ser
representados en forma de imagen.
 CITOMETRIA DE FLUJO

• Es una tecnología biofísica basada en la utilización de luz láser.

• Permite obtener información sobre poblaciones celulares a
partir de un estudio individualizado de un gran número de
células (habitualmente entre 5000 y 10000)
• Empleada en la clasificación de células según sus
características morfológicas, presencia de biomarcadores, y en
la ingeniería de proteínas.
 BIBLIOGRAFÍA
S
• https://es.khanacademy.org/science/biology/biotech-dna-technology/dna-sequencing-pcr-
electrophoresis/a/gel-electrophoresis

• https://www.genome.gov/es/genetics-glossary/Hibridacion#:~:text=La%20hibridaci%C3%B3n%20es
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• https://www.genome.gov/es/genetics-glossary/Tecnologia-de-microarrays#:~:text=La%20tecnolog
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• https://www.ecured.cu/Biochips

• https://www.genome.gov/es/genetics-glossary/Reaccion-en-cadena-de-la-polimerasa

• https://quimica.unam.mx/investigacion/servicios-para-la-investigacion/usaii/pcr-en-tiempo-real/

• https://es.khanacademy.org/science/biology/biotech-dna-technology/dna-cloning-tutorial/a/overview-
dna-cloning
• https://www.genome.gov/es/genetics-glossary/Southern-Blot

• https://ingenieriagen.weebly.com/la-secuenciacioacuten-del-adn.html

• https://www.genome.gov/es/genetics-glossary/Hibridacion-in-situ

• https://www.genome.gov/es/genetics-glossary/Western-Blot

• https://infosida.nih.gov/understanding-hiv-aids/glossary/4091/western-blot

• https://www.cancerquest.org/es/para-los-pacientes/deteccion-y-diagnosis/inmunohistoquimica

• https://www.grupogamma.com/alcanes-inmunohistoquimica/

• https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK555922/

• https://www.deidiagnostico.com/que-es-la-prueba-de-elisa/

• http://wwwuser.cnb.csic.es/~fotonica/Photonic_en/Review/citometria_de_flujo.htm