Flagelos bacterianos.

Asignatura.- Microbiología

Alumnos:

Bustamante Rojas D. Alejandra

Canela Gamboa J. Antonio

Docente.- L.N. Leonor Onofre Chacón

U-III

16/10/19
Composición de la ponencia

1.1) ¿De donde inicia el flagelo?

1.2) Composición química
1.3) Función
1.4) Tinción para ver el flagelo
1.5) Tipo de microscopio usado
Definición de flagelo

Flagelo.- Es un apéndice móvil con forma de látigo

presente en muchos organismos unicelulares y en algunas
células de organismos pluricelulares. Un ejemplo es el
flagelo que tienen los espermatozoides.

• Flagelo Eukaryano
• Flagelo Bacteriano
• Flagelo Arqueano

.
1.1 ¿De donde inicia el flagelo?

Formación.

Está asociada a la división celular.

• Los elementos del cuerpo basal se sintetizan en

el interior de la célula.

• Se ensambla el cuerpo basal, luego se secretan

los anillos L y P estabilizadores a través de un
agujero. Se secretan sus componentes al
espacio periplásmico y se ensamblan . También
salen a través del cuerpo basal los del gancho.
Gram negativa Gram positiva
Tipos de flagelo

a) Monotrico – Presentan un solo flagelo

b) Lofotrico.- Múltiples flagelos situados en

el mismo punto

c) Anfitrico - Solo flagelo en cada uno de los

dos extremos opuestos

d) Peritricos - Proyectan flagelos en todas

las direcciones
Microorganismos con flagelos

Tipo de flagelo Microorganismos

Monotrico Vibrio cholerae (gram negativa)
Anfitrico Selenomonas (gram negativa)
Lofotrico Spirillum volutans (gram
negativa)
Perítricos Escherichia coli (gram
negativa)
Clostridium difficile (gram
positiva)
C. perfringens, C. ramosum y C.
innocuum de todo el género
clostridium son los que no
presentan movilidad por
flagelo.
Vibrio cholerae, imagen
proporcionada por un
microscopio electrónico de
transmisión.
Bacteria anfritrica, imagen
proporcionada por un
microscopio electrónico de
transmisión.
1.2. Estructura y composición química
Composición: Compuesta alrededor por 20 proteínas estructurales.

Algunas como componentes del motor (Mot A y Mot B, FliG C-terminal), la base
(FliF,FliN, FliG N-terminal), la maquinaria de exportación (FlhB, FliQ, FliR, FlhA, FliL),
el eje de transmisión (FlgG), el gancho y los adaptadores (FlgF, FlgK).

-CAP: al final del cuerpo basal (arriba)

-HAP: pegan y unen al codo

Estructura:

Filamento: Es una estructura cilíndrica fina, hueca y rígida, con aspecto helicoidal.
Compuesta por la flagelina.

Codo o gancho: Estructura curvada, acodada, de 55 nm de longitud, y 22 nm de

diámetro, que conecta el filamento al corpúsculo basal. Consta de unas 120 unidades
de una proteína elongada, distinta de la flagelina.
Corpúsculo basal.- Consta esencialmente de un
cilindro que ensarta 1 o 2 parejas de anillos. Contiene
subestructuras que la hace tener varias funciones:

• Anclar el flagelo a las envueltas

• Suministrar el mecanismo del movimiento (un

motor rotatorio que puede girar en ambos
sentidos)

• Albergar la maquinaria de exportación de

subunidades de proteínas para su ensamblaje en la
estructura flagelar “acabada”
1-filamento, 2-espacio periplásmico, 3-codo, 4-
juntura, 5-anillo L, 6-eje, 7-anillo P, 8-pared
celular, 9-estátor, 10-anillo MS, 11-anillo C, 12-
sistema de secreción de tipo III, 13-membrana
externa, 14-membrana citoplasmática, 15-punta.
 1.3. Función

Los flagelos presentan como función primordial garantizar el movimiento de la célula.

Además de la función de locomoción, los flagelos pueden usarse con otras finalidades. En
algunos organismos, como en algunas algas, los flagelos desempeñan un papel
importante en la alimentación, ayudando en la captura de alimento.
1.4 Tinción del flagelo

Tinción de Leifson.- Es una tinción para lograr observar

flagelos de bacterias. Es usada en laboratorios, pero no de
rutina. Los pasos que sigue son el de usar rosanilina sirve
como tinción principal, y ácido tánico es agregado a la
solución como mordiente.

Reactivos:
- Fucsina básica en alcohol etílico
- Acido tánico en agua destilada
- NaCl en agua destilada

Procedimiento:
- Esterilización.- Hacer un circulo en un portaobjetos y
sumergirlo por 24 hras en mezcla crómica, para luego
lavarlo con agua destilada, enjuagado con alcohol,
secando para posteriormente pasarlo por el mechero
varias veces.
- Extensión de muestra.- Colocar una gotita
de solución bacteriana y extender la muestra

- Fijación.- Ponerla al aire, ya que si se expone

al mechero los flagelos se pueden destruir

- Secado.- Humedecer la preparación con el

colorante de Leifson por 10 min

- Lavado.- Lavar con agua destilada y ver

resultados
1.5 Técnica de microscopia para visualización

A microscopía óptica
En preparaciones en fresco, no se pueden detectar los flagelos individuales,
debido a su extrema delgadez (están ligeramente por debajo del límite
resolutivo del microscopio).
En cambio, la microscopía óptica de alta intensidad en campo oscuro sí logra
discernir los flagelos.
El microscopio de contraste de fases logra visualizar los penachos densos de
flagelos de ciertas bacterias.

Pueden estudiarse fácilmente mediante impregnación argéntica en

preparaciones previamente fijadas por procedimientos suaves que no destruyan
la estructura (alcohol-éter) y con mordientes que la engruesan artificialmente:
ácido tánico, sales de Al y Cr.

A microscopía electrónica: Se suelen emplear las técnicas habituales de

sombreado o tinción negativa con ácido fosfotúngstico.
La tinción negativa con ácido fosfotúngstico.- Especie de preparación de una muestra de microscopía electrónica bajo la cual la imagen es
contraste para observar material de partículas o biomacromolécula biológica en la muestra. Utilice sal de metal para manchar la muestra en la
red de transporte, no hay manchas se acumula en la partícula convexa. Después del teñido, observado por microscopía electrónica, el objeto
observador es ligero, el fondo oscuro.

Principio de tinción negativa del ácido fosfotúngstico.- Se utiliza una sal de metal pesado, teñiendo la muestra sobre la red portadora,
absorbiendo colorantes, secando la muestra, extendiendo una capa delgada de muestra con sal de metal pesado, el lugar de proyección no tiene
deposición de colorante, por lo tanto aparece una tinción negativa efecto. Preparación de tinción negativa con ácido fosfotúngstico.

La preparación de la solución de tinción negativa con ácido fosfotúngstico utiliza principalmente el tungstato de sodio y el ácido
fosfotúngstico como materia prima, es necesario un acidificante como el ácido clorhídrico. Utilizar solución tampón de ácido destilado o
fosfórico para preparar una solución al 1% ~ 3%. Antes de usar la solución, ajuste el valor del pH a 6,4 ~ 7,0 o el valor necesario del experimento
con una solución de hidróxido sódico de 1 mol / l.
¡GRACIAS POR LA ATENCION PRESTADA!