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• MORFOLOGIA CELULAR

INTRODUCCIÓN A LA MICROBIOLOGÍA

I SEMESTRE PERÍODO 2020-2

DOCENTES: LISY GRACIA HERRERA


ANDREA DORIA PEDRAZA

PREPARACIONES EN FRESCO
COLORACIÓN SIMPLE
COLORACIONES COMPUESTAS
Los microorganismos se encuentran
en muchos ambientes naturales:
suelos, agua, aire, alimentos, tracto
intestinal, piel, etc.

Sólo unos pocos lugares de la


naturaleza con condiciones extremas
y tejidos sanos de órganos de
hombres y animales están libres de
ello.
Cuando se manifiestan
como causantes de
infección, producen
determinada sintomatología.

Tomar muestras : realizar


frotis y coloraciones.

Información características
básicas del microorganismo
identificar con exactitud el
agente causal.
DIFERENCIACIÓN DE LAS FORMAS TÍPICAS
DE LAS BACTERIA
MÉTODOS DE OBSERVACIÓN MORFOLOGÍA BACTERIANA
Preparaciones no coloreadas:
Se observan las bacterias vivas, y se puede detectar con facilidad la movilidad, en las
que la poseen, y su forma.

Preparaciones coloreadas:
Bacterias son incoloras y tienen el mismo índice de refracción del agua, es necesario
utilizar colorantes para poderlas visualizar.
COLORANTES:
son sales compuestas por un ión
positivo y un ión negativo, uno de
los cuales está coloreado y se
conoce como cromóforo.
COLORANTES:
El color de los colorantes básicos está en
el ión positivo.

El color de los colorantes ácidos está en


el ión negativo.

Bajo condiciones de crecimiento la mayoría


de las bacterias tienen un pH interno de 7 y
superficie celular cargada negativamente;
por lo que atrae el ión positivo coloreado
del colorante básico.
COLORANTES MÁS UTILIZADOSEN MICROBIOLOGÍA
Son los básicos:

La violeta de genciana

Safranina

Verde de malaquita

Azul de metileno.
PASOS PRINCIPALES COLORACIÓN
DIFERENCIAL

1.un colorante primario, el cual se utiliza


para teñir a todas las células en la
tinción.

2. paso de decoloración, el cual remueve


el colorante solo de ciertos tipos de
células .
TINCIÓN DIFERENCIAL :

REQUERIMIENTO:

Más de un tipo de colorante.

UTILIDAD:
Distinguir entre varios tipos de células bacterianas.
3. un colorante de contraste, el cual tiñe
las células recién decoloradas pero no
tiene efecto sobre las células que aún
retienen el colorante primario.
COLORACIÓN DE GRAM. Desarrollada
por el médico Danés Christian Gram en
1884
Es una de las tinciones diferenciales más
utilizadas en bacteriología.

clasifica los cultivos bacterianos en menos


de 24 horas en Gram positivas y Gram
negativas.

FUNDAMENTO La reacción de la tinción


de Gram se basa en la cantidad de
peptidoglucano que se encuentra en las
paredes celulares de estas bacterias.
Fundamento

BACTERIAS GRAM POSITIVAS


Tienen muchas capas de peptidoglucano,
las cuales a su vez, sostienen moléculas
de ácido teicoico que reacciona con el
cristal violeta y el yodo y retiene estos
compuestos, y por eso es más difícil
decolorar una célula Gram positiva que
una Gram negativa.
FUNDAMENTO
BACTERIAS GRAM NEGATIVAS
La mezcla de alcohol acetona disuelve mucho de la
capa exterior de lipopolisacáridos.
Acelera la remoción del colorante primario cristal
violeta de estas células.

Al agregar otro colorante, usualmente safranina.


Las células Gram positivas siguen de color azul-violeta
mientras que las Gram negativas absorben el color
rojizo de la safranina.
OBSERVACIÓN DE LAS BACTERIAS DESPUES
DE LA COLORACIÓN DE GRAM
1-PREPARACIONES NO COLOREADAS (PREPARACIONES EN
FRESCO)

Realice una infusión

Tome un escobillón estéril y frótelo sobre cualquier parte de


la superficie del cuerpo.

Introduzca el escobillón en un tubo que contiene 1cc de


Solución Salina estéril, mezcle y deje reposar por uno
segundos.

Insertar Coloque una gota de la infusión con el asa


sobre el portaobjeto limpio, coloque un cubreobjetos
sobre la gota evitando la formación de burbujas

Observe en el microscopio con objetivos de 10x y 40 x


• Leer rápidamente, para que la muestra no se seque.
2-PREPARACIONES COLOREADAS COLORACIÓN SIMPLE O DIRECTA

1. Tome un escobillón estéril y frótelo sobre cualquier parte de la superficie del cuerpo.

2. Haga una extensión sobre la lámina y déjela secar al aire.

3. Pásela rápidamente sobre la llama de un mechero (2 – 3 veces) para fijarla.

4. Coloque los portaobjetos sobre un puente para tinción.

5. Cubra el extendido con una pequeña cantidad del colorante y déjelo actuar por un minuto.

6. Lave con agua hasta eliminar el exceso de colorante.

7. Secar al aire libre.


TINCIÓN SIMPLE DE UNA MUESTRA DE CULTIVO
BACTERIANO
GRACIAS