“BIORREMEDIACIÓN CON

Pseudomonas spp”
MICROBIOLOGÍA AMBIENTAL

DR. FCO. JAVIER ZAVALA DÍAZ DE LA SERNA

Equipo #5
Grecia Melo Zacarías 271930
Jesús Adrián Barraza Portillo 282963
Luis Donaldo Medina Acosta 290122
Diana Karely Yáñez Márquez 298088
María Alexandra Robles Alvarado 311202
 • En México existen extensas áreas de suelos

INTRODUCCIÓN: contaminados por hidrocarburos, debido a las

tareas de exploración, refinación, falta de
mantenimiento y robo de combustible.

• Los suelos contaminados son alterados en sus

características físico-químicas y biológicas, con lo
que afectan el ámbito social.

• Por un lado, la contaminación del suelo por

hidrocarburos afecta la flora, fauna y
microorganismos del suelo, la fertilidad de los
suelos, el crecimiento de las plantas, así como la
existencia y sobrevivencia de los animales que se
alimentan de éstas. 
El papel de la Pseudomonas spp. en la
Biorremediación.
• Es una consecuencia de su importancia ambiental y su diversidad
metabólica. • Se encuentran típicamente en
las plantas y en el suelo,
donde actúan como actores
clave en eventos cruciales
para el medio ambiente,
como el ciclo del carbono, el
ciclo del nitrógeno, la
biodegradación y la
descomposición.
• Se caracterizan por una gran diversidad metabólica y contienen
información genética necesaria para la producción de vías enzimáticas
responsables de utilizar una amplia gama de fuentes de carbono,
incluidos los compuestos que pocos otros organismos son capaces de
degradar. • Conocidas por su mayor tolerancia a
condiciones ambientales desfavorables al
crecimiento como:
• Ambientes de salinidad moderada tales
como agua marina.
• Ambientes que contienen sustancias tóxicas
tales como Compuestos Orgánicos Volátiles
(VOC) entre otros.
• pH: Neutro Temperatura: 5-42°C
Objetivo
• Realizar el análisis de los diferentes métodos de Biorremediación de suelos
contaminados a partir de dos cepas de Pseudomonas spp.
Hipótesis
• A partir de Pseudomonas putida y Pseudomonas fluorescens se utilizo tierra
contaminada con Diésel, tal hidrocarburo fue puesto a disposición de las
Pseudomonas como su única fuente de Carbono.
• Comparar los resultados finales e iniciales, y determinar si realmente hubo
una mejora.
Justificación
• Para interés y mejoramiento del medio ambiente y del nuestro, sería
aprovechar el potencial de estos microorganismos únicos y versátiles para
los fines de la Biorremediación y la sostenibilidad del medio ambiente.
MATERIALES Y MÉTODOS
Cepas: Pseudomonas putida & Pseudomonas fluorescens
Materiales y equipo:
Espectrofotómetro
Diésel Diésel molecular structure.
2 Matraz Erlenmeyer de 250 mL
1 Matraz Kitazato
Manguera
Papel filtro
Tubos de ensaye
• Sulfato de Amonio
• Fosfato de Potasio Monobásico
• Sulfato de Magnesio
• Sulfato Dibásico
Espectrofotómetro Perkin Elmer
• Extracto de Levadura
 PREPARACIÓN DEL MEDIO LEBAC E
INOCULACIÓN
Se agregaron: DE LAS CEPAS.
• 0.7g Sulfato de Amonio
Se utilizaron dos • 0.57g Fosfato de Con forme se
matraz Potasio Monobásico agregaban se
Erlenmeyer de • 0.225g Sulfato de agitaba el
250 mL y se Magnesio matraz para
puso una cama • 0.23g Sulfato Di básico solubilizar.
Una vez
de agua. • 0.01g Extracto de
solubilizados
Levadura todos los
reactivos se
aforaron los
matraz a 100 mL
Se dejaron enfriar y
En uno de los se colocó 1mL de Se sellaron y
matraz se añadió Diésel se colocaran
0.1 g de estas (previamente en la
cepas. filtrado) en cada autoclave
uno de los Matraz
RESULTADOS:
• Los medios LEBAC se incubaron a 37°C (Temperatura optima para
Pseudomonas spp.), durante 7 días
Caldo LEBAC Absorbancia a 600 nm.
Tiempo Sin microorganismos Con microorganismos
Tiempo 0 0.4442 0.4069
Tiempo 1 0.4418 0.1111
Resultado 0.0024 0.2958

• Se tomo como referencia el tiempo 0 sin microorganismos para

compararlo contra el tiempo 1, después de una semana a 37°C, la
diferencia entre ellos podría deberse a la volatilización del combustible.
• Comparando los resultados entre el tiempo 0 y 1, en el caldo con
microorganismos, podemos determinar que hubo una proliferación de
estas cepas, ya que el consumo aproximado del combustible fue del
72.69%.
CONCLUSIÓN
• De acuerdo con los resultados obtenidos, podemos determinar que las cepas de
Pseudomonas podrían ser un factor muy importante para la Biorremediación,
ya que estas son resistentes a múltiples factores ambientales, tal como lo es la
contaminación con compuestos de difícil degradación, ahí es donde entran
ellas, es importante tomar en cuenta que su utilización podría mejorar de
manera considerable el ambiente en cual habitamos.
• Con este proyecto concluimos que, el futuro de la contaminación, podría tomar
un giro muy importante, al utilizar organismos para su eliminación o
degradación como los son estas cepas.
BIBLIOGRAFÍA