Producción y

titulación de
virus

Santiago Serna Castaño

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Virus
• Vida parasita celular obligada.
• Gran especificidad sobre un tipo
celular.
• Infectan todo tipo de organismo.
• Entidad biológica mas abundante.

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Morfología
• Material genético (ADN / ARN)
• Cubierta proteica: Cápside.
• Bicapa lipídica.

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Ciclo reproductivo
• Adhesión: Unión entre
proteínas de la cápside
vírica y receptores de la
célula hospedera.

• Penetración: los virus ingresan a la célula (Endocitosis)

• Despojo de la cápside vírica (Liberación material genético)

• Replicación del genoma viral

• Ensamblaje: producción de nuevas partículas virales

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Producción de virus
Cultivo celular:
• Extraer células adecuadas para
aislar virus.
• Método mas preciso y sensible
• Línea celular adecuada aumenta
producción de virus.
• Líneas mas usadas: Células riñón de
mono, de conejo, MRC5,
fibroblastos de prepucio, Hep2 y
A549.

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Protocolo
1. Tejido sospechoso se agita para precipitar entes y
el virus permanece en fase dispersar en el liquido.
2. Se agrega una alícuota a medio de cultivo y se
incuba (35°C, 5% CO2 ).
3. Se agrega virus incubado al cultivo celular. El virus
comienza a crecer (1día-Varias semanas)
4. Observación por microscopio.

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• Los cambios en las células indican presencia de
virus y a esto se le conoce como efecto citopatico.

• De acuerdo con el tipo de línea celular usada, el

tipo de muestra, el periodo de incubación, y el ECP
se puede predecir el tipo de virus.
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Titulaciones
Ensayo de placas
• Método clásico y confiable de determinación de virus in
vitro.
• Se basa en infección y replicación del virus dentro de una
monocapa que da como resultado un área aislada
desprovista de células vivas.
• Se tiñen para poder ser enumeradas y para producir un
titulo infeccioso expresado como PFU.

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Ensayo de foco fluorescente.
• Similar a PA se basa en infección y replicación en las
células.
• Se pueden detectar proteínas virales dentro y fuera
de la celula atraves de anticuerpos marcados
fluorescentemente contra el virus

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 Viroterapia

VIROTERAPIA ONCOLITICA DE CANCER DE MAMA

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Virus Oncoliticos

• Virus que se dirigen selectivamente a las células

cancerosas.
• Prometedores agentes anticancerígenos.
• De gran interés para controlar el cáncer en etapas
primarias y en metástasis

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• Virus que actualmente se están estudiando en fase
clínica para la viroterapia contra cáncer de mama
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Tratamiento de cáncer de mama con VO diseñados
para replicación selectiva de tumores.

Los VO pueden diseñarse genéticamente para

dirigirse específicamente a células malignas:

1. Eliminación de genes virales o regiones génicas

virales
2. Manipulación de la superficie viral
3. Vinculación de los genes virales esenciales con los
promotores específicos del tumor

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Conclusiones
• La viroterapia oncolítica es una técnica muy versátil
que ofrece diversos enfoques innovadores para
combatir el cáncer. 
• Los VOs administrados por vía intravenosa pueden
dirigirse eficazmente contra las células de cáncer de
mama.
• Los Vos pueden armarse para expresar genes
antitumorales o para estimular la respuesta
antitumoral del huésped, permitiendo así efectos
antitumorales a largo plazo. 

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¡GRACIAS!

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Referencias

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