RESISTENCIA NEUMOCOCO

KATHERINNE SOTO
LUIS ZELADA
• Streptococcus pneumoniae es el patógeno predominante para
la neumonía bacteriana, meningitis y septicemia; da como
resultado una alta morbilidad y mortalidad, especialmente en
pacientes pediátricos. En China, de 2010 a 2015, 350,000
niños menores de 5 años murieron de neumonía cada
año; Esta cifra representa el 10% del número de niños en todo
el mundo que han muerto de S. pneumoniae .
• Actualmente, la vacuna conjugada neumocócica (PCV) se usa
para la prevención de la infección neumocócica pediátrica; los
subtipos de PCV de 7, 10 y 13 valentes se administran con
mayor frecuencia.
• El uso generalizado de la vacuna ha reducido efectivamente la
incidencia de infección neumocócica invasiva y no invasiva en
niños.
• Recientemente, la resistencia de S. pneumoniae a
múltiples antibióticos se ha vuelto más grave:
principalmente, resistente a cefalosporinas,
macrólidos, tetraciclina (TET) y antibióticos de
sulfonamida.
• El manejo de la infección neumocócica pediátrica se ha
convertido en un gran desafío debido a la resistencia a
los medicamentos y al mecanismo patogénico.
• En este estudio, cuantificamos el serotipo y la
resistencia a los medicamentos de los aislamientos de
pacientes pediátricos en Wenling Maternal and Child
Health Care Hospital que albergaban especies
neumocócicas.
MATERIALES Y MÉTODOS
 Recursos utilizados para aislar
cepas
En estos aislamientos,
Desde el 10 de octubre hubo 217 cepas no
de 2011 hasta el 23 de invasivas, que
En 67 cepas invasivas, 4
mayo de 2014, incluyeron 169 cepas
eran de líquido
recolectamos un total de esputo calificado
cefalorraquídeo (LCR) y
de 284 aislamientos de (leucocitos> 25 /
2 de sangre; los otros
pacientes pediátricos campo de baja
eran de derrames
en Wenling Maternal potencia [LPF],
pleurales y ascitis
and Child Health Care epitelios <10 / LPF) y 48
Hospital cepas de líquido de
lavado broncoalveolar.
• Equipos y reactivos
- Se utilizaron tiras de prueba de - Se inoculo las muestras en
sensibilidad al medicamento
Epsilomer test (E-test), incluyendo
amoxicilina (AMX) / ácido
clavulánico (CLA), ceftriaxona
(CRO), eritromicina (ERY) y
vancomicina (VAN)
- El método de susceptibilidad de
disco Kirby-Bauer (KB) se usó para
probar las sensibilidades de varios
medicamentos, incluida la
penicilina (PEN), el cloranfeniccol
(CHL), la eritromicina (ERY), el
trimetoprim-sulfametoxazol (SXT),
la levofloxacina (LEV), la
tetraciclina ( TET), clindamicina
(CLI) y rifampicina (RFP)
• Identificación de la cepa
placas de agar que
contienen 5% de sangre de
oveja y les incubó a 37 ° C en
un 5% de CO 2 atmósfera
durante 24 horas.
- Se recolecto colonias
sospechosas con hemólisis
alfa que tenían una forma
cóncava y habían surgido en
la sangre del cordón
umbilical. Todos estos
aislamientos se
almacenaron a -80 ° C en
tubos congelados que
contenían suero equino
 Serotipado
Los aislamientos Con los sueros Las tasas de cobertura
fueron serotipados utilizados en este para PCV7, PCV10 y
con reacciones de estudio, identificamos PCV13 se calcularon
Quellung los serotipos cubiertos como la tasa de cepas
por la vacuna de seleccionadas por
polisacárido 23-valent cada vacuna en todos
(1, 2, 3, 4, 5, 6B, 7F, 8, esos aislamientos
9N, 9V, 10A, 11A, 12F,
14, 15B , 17F, 18C,
19A, 19F, 20, 22F, 23F
y 33F)

Prueba de susceptibilidad a antibióticos

Detectamos la susceptibilidad de 284 aislamientos a PEN, AMX / CLA, CRO, ERY y VAN a
través de E-test. Las pruebas de sensibilidad de estos aislamientos contra CHL, SXT, LEV, TET,
CLI y RFP se llevaron a cabo utilizando el método de difusión de disco KB. Se utilizo las pautas
del 2014 del Instituto de Normas Clínicas y de Laboratorio (CLSI) para ayudarnos a
determinar e interpretar la sensibilidad, la intermediación y la resistencia de esos
aislamientos
 Análisis estadístico
Detección del gen de macrólidos
resistente a los medicamentos
Software WHONET 5.6.

La significación estadística de
los datos se probó utilizando
el software Statistical
Package for Social Science
(SPSS) para Windows, versión
17.0 (SPSS Inc.)

Se utilizó la prueba χ 2 o la
prueba exacta de Fisher. Un
punto de corte de 2 colas
de P  <.05 se consideró
estadísticamente significativo
RESULTADOS
 Información general sobre pacientes
pediátricos
• Entre el total de 284 pacientes pediátricos
infectados con S. pneumoniae , 193 eran niños
y 91 niñas, de 0 a 107 meses, con una
mediana de edad de 15 meses. La mayoría de
los pacientes (81.4%) tenían menos de 3 años:
126 pacientes (44.4%) tenían menos de 12
meses, 103 pacientes (36.3%) tenían entre 12
y 36 meses, 37 pacientes (13.0%) tenían entre
36 meses y 60 meses (13.0%), y 18 pacientes
(6.3%) eran mayores de 60 meses.
Distribución de serotipos de S. pneumoniae
Prueba de susceptibilidad a antibióticos
DISCUSIÓN
• En este informe, los serotipos más comunes de cepas
no invasivas fueron 19F, 19A, 23F y 6A. Los 4
principales serotipos, aislados de muestras
respiratorias de pacientes pediátricos infectados con
neumococos en 5 hospitales infantiles en China
continental, se informaron en 2011 como 19F, 19A, 23F
y 6B; los 3 más comunes fueron 19F, 19A y 23F,
• Los serotipos más comunes de cepas neumocócicas no
invasivas de las vías respiratorias superiores de los
niños fueron 6B, 19F, 23F y 6C
• En esta investigación, los serotipos más comunes de
cepas invasivas fueron 23F, 14, 6B y 19A
• La primera vacuna utilizada para la prevención de la
infección neumocócica pediátrica fue PCV7. Desde
2000, cuando comenzaron a usar PCV7 en los centros
de salud estadounidenses, las tasas de incidencia de
meningitis, neumonía y septicemia se han reducido
significativamente.
• Según un estudio de investigación realizado en
California, entre 2000 y 2005, la tasa de incidencia de
infección neumocócica invasiva en niños menores de 5
años disminuyó de 62.5 por 100,000 individuos por
año a 15.3 por 100,000 individuos por año, y la tasa de
enfermedades neumocócicas invasivas causado por
serotipos dirigidos por PCV7 se redujo en un 90%.
• Sin embargo, las enfermedades causadas por serotipos no
relacionados con las vacunas ocurrieron con mayor
frecuencia: los serotipos 1, 3, 6A, 7F y 19A se han convertido
en los principales patógenos causantes en algunos países
europeos. PCV10 y PCV 13 apuntan a más serotipos que PCV7
y, por lo tanto, han reemplazado a PCV7 en uso general.
• Una estimación del efecto del sistema inmune de PCV10
mostró que la tasa de incidencia de infección neumocócica
invasiva de niños entre las edades de 0 y 2 años se redujo de
16.47 por 1,000 a 0.44 por 1,000, y la tasa de disminución fue
del 89%.
• Estos resultados también mostraron que PCV13, cuyo rango
de selección de serotipos incluía 19A, produjo fuertes efectos
preventivos contra la infección neumocócica, especialmente
contra la mastoiditis.
• Según esta investigación, la tasa de cobertura de
PCV13 detectada a partir de cepas no invasivas fue un
31,7% mayor que la de PCV7 y PCV10. En las manchas
invasivas, la tasa de cobertura de PCV13 aumentó
14.4% en comparación con la de PCV7 y aumentó 9.5%
en comparación con PCV10.
• Al comparar la distribución de serotipos de cepas
neumocócicas invasivas y no invasivas, notamos
claramente que el PCV13 era el blanco de 19A, lo que
proporcionó la explicación principal de por qué PCV13
tenía una tasa de cobertura más alta, como también se
observó en los resultados de un informe anterior
• Durante muchos años, PEN fue el tratamiento estándar de
la infección neumocócica pediátrica. Sin embargo, el
aumento de la resistencia de muchas cepas bacterianas a
PEN ha desafiado el tratamiento clínico aceptado de esta
enfermedad.
• Desde 2008, el requisito de cepas de neumococo
resistentes a PEN aisladas de muestras que no son LCR ha
sido revisado por CLSI.
• El estándar anterior era una sensibilidad de 0.06 mL por L o
menos y una resistencia de 2 mg por L o más, mientras que
el estándar revisado era una sensibilidad de 2 mg por L o
menos y una resistencia de 8 mg por L o más. Este estándar
revisado ayudó a reducir significativamente la tasa de
resistencia PEN.
• En los resultados de este estudio, los resultados de la prueba
MIC50 (la concentración más baja del antibiótico en la que se inhibe
el 50% de los aislamientos) de cepas de PEN que no son LCR fue de
1 mg por L. Este valor es mayor que el valor de 0.032 mg por L a
0.25 mg por L que se informó en un trabajo de investigación
anterior.
• Nuestros aislamientos tuvieron resistencia de 0 a VAN, LEV y RFP. La
resistencia de los aislados de neumococos pediátricos en la región
asiática a los macrólidos mostró una mayor tendencia a la
resistencia a los medicamentos, que no pudimos ignorar.
• Hubo 2 mecanismos principales de resistencia a los macrólidos en
los neumococos. El primero fue el cambio del sitio objetivo causado
por la enzima de metilación ribosómica codificada por el ermBgen,
que metilaba las adeninas individuales del ARN ribosómico 23s
(ARNr) para reducir la afinidad entre los macrólidos y el sitio
objetivo del ribosoma en cuestión.
• El otro mecanismo era el sistema de flujo de salida activo, a través
del cual los antibióticos eran bombeados fuera de la célula por
proteínas codificadas por el gen mef .
• La resistencia de 284 aislamientos a ERY fue del
100%; Además, el 38,4% de estas muestras contenían
el gen mefA , y todas las muestras contenían ermB .
• En los 284 aislamientos, las cepas que contenían la
mayor proporción del gen mefA fueron 19F y 19A.
• Se ha informado que estas 2 cepas tienen tasas más
altas de mefA que otros serotipos. Se supuso que, bajo
las presiones de detección de antibióticos, 19F y 19A
probablemente tenían transmisión de clonación.
• Se detecto y analizo los serotipos y la resistencia a los
medicamentos de 284 aislamientos de pacientes clínicos pediátricos
con infección neumocócica; Se identificaron 17 serotipos, los más
comunes fueron 19F, 19A, 23F, 6A y 14.
• En comparación con PCV y PCV10, PCV13 apuntó a 19A, que tenía
una mayor tasa de aislamiento y resistencia a los medicamentos
que otros aislamientos.
• PCV13 desempeñó un papel más destacado en la prevención de
enfermedades neumocócicas y el control de la resistencia a
múltiples fármacos que otras variantes de PCV. La tasa de
susceptibilidad a PEN en cepas sin meningitis fue del 95,0%. Todos
los especímenes eran resistentes a ERY y contenían el gen ermB ; El
38,4% también contenía el gen mefA .
• Teniendo en cuenta el número limitado de cepas totales y cepas
invasivas que examinamos en nuestra investigación, aún se
necesitan más datos, en un período más largo, para verificar aún
más nuestros resultados.