ANÁLISIS INSTRUMENTAL

DOCENTE: Ing. Betty Salazar Pinto

 SÍLABO
UNIDAD I: Introducción a la
instrumentación

SEMANA TEMA
1 Conceptos básicos del análisis instrumental
2 Clasificación de las técnicas instrumentales y etapas
del análisis instrumental
3 Calibración en análisis instrumental
4 Validación de métodos analíticos
5 Técnicas ópticas
6 Evaluación
UNIDAD II: Métodos de Espectroscopía
Atómica, Molecular y de Masas

SEMANA TEMA

7 Espectroscopía de adsorción UV-Visible

8 Fluorescencia y quimioluminiscencia
9 Aplicaciones de métodos luminiscentes y
quimioluminiscencia
10 Espectroscopía de emisión de flama y Absorción atómica

11 Espectroscopía de masas

12 Evaluación
UNIDAD III: Métodos electroquímicos y
Cromatográficos

SEMANA TEMA

13 Cromatografía líquida de alta resolución (HPLC)

14 Cromatografía iónica (IC)

15 Cromatografía de gases

16 Métodos electroquímicos

17 Evaluación

18 Evaluación final de la asignatura

 EVALUACIÓN

ÍTEMS PUNTAJE

Asistencia 1

Participación 1
* Exposición 3

E. parcial 15
 ANTECEDENTES

• 1802 William Hyde Wollaston-. Notó que en el espectro

del sol a ciertas frecuencias aparecen líneas oscuras.

• 1815 Joseph Von Fraunhofer: Estudió a fondo los

espectros del sol y sustancias, y contabilizó las líneas
oscuras.

• 1859 Gustav Robert Kirchoff: Mostró que cada elemento

produce un único modelo de líneas.

• 1861 Robert Wilhem Bunsen: Identificó elementos

presentes en la atmósfera del sol
1903 Kuster y Gruters :sentaron las bases
de las valoraciones conductimétricas,
desarrolándose posteriormente las
valoraciones potenciométricas .

1922 Jaroslav Heyrovský: inventó la

polarografía donde el electrodo de trabajo
es uno de gota de mercurio (DME), útil por
su amplio rango catódico y su superficie
renovable.

1930 pHmetro: Se construyeron los

primeros electrodos de vidrio sensibles al
pH
1950 La Espectrofotometría UV visible – Infrarroja
eliminó el comparador de color y los análisis fueron
más cuantitativos, confiables, reproducibles, más
precisos y exactos.

1950 Primer espectrómetro de masas que se

vendió a nivel comercial.

Mediados del siglo XX: Aparecieron en el

mercado los primeros equipos de cromatografía
de gases. En 1960 comenzó a desarrollarse la
cromatografía líquida de alta resolución (HPLC).
 DEFINICIÓN
Juega un papel importante
en la producción y en la
Es una parte atractiva y evaluación de nuevos
fascinante del análisis productos y en la protección
químico que interacciona al consumidor y medio
con todas las áreas de la ambiente.
química y con muchos
otros campos
OBJETIVOS DEL ANÁLISIS INSTRUMENTAL

• Conocer las herramientas del análisis químico instrumental

para obtener información cualitativa y cuantitativa, así
como adquirir los conocimientos básicos (fundamentos) de
los diferentes métodos de análisis.
• Aplicar y seleccionar técnicas y metodologías analíticas
según la sustancia a analizar.
• Montar y validar metodologías analíticas realizando
demostraciones prácticas en el laboratorio, trabajando en
equipo con responsabilidad y actitud crítica, tomando
decisiones pertinentes y presentando reportes escritos
claros.
• Búsqueda de métodos de análisis más rápidos, selectivos y
sensibles.
 CONCEPTOS BÁSICOS

Método Ejemplo
Técnica analítica analítico
Es un proceso Es una La
científico aplicación espectrometría
fundamental específica de de infrarrojo es
que ha una técnica una técnica
demostrado ser para resolver analítica; y el
útil para un problema análisis por
proporcionar analítico. infrarrojo de
información los copolímeros
acerca de la estireno y
composición de acetonitrilo es
las sustancias. un método
instrumental.
Procedimiento Protocolo
• Son las instrucciones • Es la descripción más •ASTM: Sociedad
escritas para aplicar un específica de una americana para ensayos y
método. método. materiales
• Supone que el usuario • Deben seguirse, sin •ADAC: Asociación de
tiene algún excepción, las directrices químicos analíticos
conocimiento previo de detalladas
oficiales.
la metodología analítica. • Se usa cuando los
No proporciona gran •EPA: Agencia de
resultados deben ser
detalle. aceptados. protección ambiental
• Métodos estándares de • Ejemplo: EPA o
la ASTM, ADAC, u otros dictámenes legales
 ESTADARIZACIÓN

VALIDACIÓN
 CLASIFICACIÓN DE TÉCNICAS
INSTRUMENTALES
Espectrometría de absorción

Espectrometría de emisión

Espectrometría Raman

Proceso de “light scattering”

Basados en métodos
ópticos
Espectrometría de resonancia spin
Tienen que ver con
radiaciones Espectrometría de Rayos X
electromagnéticas y con su
interacción de cualquier
Refractometría
tipo con la materia.

Polarimetría
 Potenciometría

Conductimetría
Basados en métodos
eléctricos
Amperiometría, Polarografía
Magnitudes eléctricas en la
medición
Columbimetría

Espectrometría de masas

Basados en métodos Métodos radio-químicos

varios

Análisis térmico
Basados en métodos ópticos

• Atómica: referente a los propios átomos.

Espectrometría de • Molecular: que se aplica mediante pruebas de
absorción IR (rayos infrarrojos), técnicas UV (radiación
ultravioleta) y de visible.

Mide la luminiscencia.
• Fluorescencia: emite toda la energía.
Espectrometría de emisión
• Fosforescencia: parte se la energía se absorbe y
parte se emite

Espectrometría Raman Relacionada con la dispersión

Se relaciona con las partículas en suspensión.

Proceso de “light
• Turbidimetría.
scattering”
• Nefelometría.
Basados en métodos ópticos

Espectrometría de El giro del spin determina ciertas propiedades.

resonancia spin RSE: Resonancia de spin electrónico.
RMN: Resonancia magnética nuclear.

Espectrometría de Rayos X Realiza un bombardeo de electrones

Refractometría
Trata de la desviación de un haz de luz que
atraviesa un cuerpo, son menos sofisticadas pero
Polarimetría concluyentes
Basados en métodos eléctricos

Potenciometría Mide el potencial eléctrico mediante un pHmetro

Miden la resistencia eléctrica que se realiza en el

Conductimetría control de aguas. Se trata de analizar la resistencia
que opone el medio al paso de la corriente.

Método electroquímico que proporciona

Amperiometría,
información cualitativa y cuantitativa de sustancias
Polarografía
electro-reducibles y electro-oxidables

Columbimetría Miden la carga eléctrica

Basados en métodos varios

Se basa en el análisis de la presencia de algún

Espectrometría de masas elemento de la tabla periódica (TP).

Aprovecha las características radiactivas de las

Métodos radio-químicos reacciones para medir radiactividad mediante un
bombardeo de electrones

Se basan en el análisis de la temperatura

Análisis térmico
relacionados con el calor.
ETAPAS DEL ANÁLISIS INSTRUMENTAL
CRITERIOS PARA LA SELECCIÓN DE UNA
TÉCNICA

• Qué exactitud se requiere?

• Cuánta muestra se tiene?
• Cuál es el intervalo de concentración del analito?
Definición del • Qué componentes de la muestra podrían causar
problema interferencia?
• Cuáles son las propiedades físicas y químicas de la
matriz de la muestra?
• Cuántas muestras se realizarán?
Características de desempeño
CONCEPTOS BÁSICOS SOBRE CALIBRACIÓN

CALIBRACIÓN: Determina la relación entre la

respuesta analítica y la concentración del
analito. Se determina mediante el uso de
normas químicas

Comparación con
estándares

Estándar externo
Procedimientos

Adición estándar

Patrón interno
 • Comparación • Un estándar • Para analizar • Un patrón
directa: la externo se muestras interno es una
propiedad del prepara por complejas en sustancia que
analito debe separado de la las cuales se se añade en
concordar con muestra. podrían cantidad
la del • Se usan cuando presentar constante a
CALIBRACIÓN CON ESTÁNDARES

estándar. no hay efectos efectos matriz. todas las

de interferencia • Generalmente, muestras,
• Titulación: el de la matriz de se añaden uno blancos y
analito componentes o más patrones de
reacciona con sobre la incrementos de calibración
un reactivo disolución del una solución
estandarizado analito. patrón a
ESTÁNDAR EXTERNO

ADICIÓN ESTÁNDAR
(el titulante), alícuotas de la

PATRÓN INTERNO
en una muestra con
Reacción volúmenes
estequiométri idénticos.
ca conocida
y: señal
m: pendiente de la recta.
x: concentración.
b: intercepto de la recta.
R2: coeficiente de
determinación
Búsqueda bibliográfica

Definir las condiciones

Estandarizar el métodos

Validar el método
 VALIDACIÓN DE MÉTODOS ANALÍTICOS

REQUISITOS:
Estandarizados

Instrumentos Métodos
calificados y calibrados documentados

Patrones de referencia
Analistas calificados
confiables

Integridad de la
muestra
VALIDACIÓN DE MÉTODOS ANALÍTICOS

DEFINICIÓN
OBJETIVO
• Es el proceso por el cual
• Demostrar si un
se establece, por medio
procedimiento analítico es
de estudios de
demostrar que es apto
laboratorio, que un
para el propósito
método es apropiado para
indicado.
el uso propuesto.
 Métodos
Métodos reproducibles
confiables
 PROTOCOLO DE VALIDACIÓN

• Lista de materiales y equipos.

• Características de desempeño que se
evaluarán.
• Análisis estadístico.
• Criterio de aceptación para cada
parámetro de desempeño.
PARÁMETROS

Límite de Sensibilidad
Linealidad
detección

Límite de Precisión
cuantificación

Intervalo

Selectividad

Exactitud Reproducibilidad
SELECTIVIDAD

• Es la capacidad de un método
para evaluar inequívocamente
el analito en presencia de
interferentes.
• Se refiere al grado por el cual el
método analítico está libre de
interferencias de otras especies
contenidas en la matriz de la
muestra.

Generalmente, se utiliza en:

• Identificación de analitos.
• Pruebas de pureza.
• Valoración.
• Análisis cualitativos.
 SENSIBILIDAD

• Es una medida de la aptitud de

un método para discriminar
entre pequeñas diferencias de
concentración de un analito.
• Factores que la limitan:
La pendiente de la curva
de calibración y la
reproducibilidad o
precisión del dispositivo
de medición.
LINEALIDAD

• Es la capacidad de producir
resultados directamente
proporcionales a la
concentración del analito
dentro de un intervalo.
• Debe utilizarse un mínimo de 5
puntos de datos para una
evaluación adecuada.
• Es necesario un intervalo para
resultados exactos y precisos.
• Valor de R2 entre 0.99 y 0.9999.
 INTERVALO

• Se refiere al intervalo de
concentraciones del analito que
pueden ser determinadas con
precisión, exactitud y linealidad.
• El extremo inferior está
determinado por el límite de
cuantificación.
• Debe abarcar del 0 al 150 % o
del 50 al 150 % de la
concentración susceptibe de ser
hallada.
• Se expresa con las mismas
unidades que los resultados.
PRECISIÓN

• Es el grado de concordancia
entre los datos que se
obtuvieron de la misma
manera.
• Proporciona una medida del
error aleatorio o indeterminado
de un análisis.
• Parámetros de calidad:
desviación estándar, error
estándar de la media,
coeficiente de variación.
 REPETIBILIDAD REPRODUCIBILIDAD

• Supone dar la menor • Supone dar la mayor

variación en los resultados. variación en los resultados.
• Es una medida de • Es una medida de la
variabilidad en los variabilidad en los
resultados cuando la resultados entre
medición se lleva a cabo por laboratorios
un solo analista y utilizando
el mismo equipo.
 LÍMITE DE
DETECCIÓN

• Es la concentración o masa
mínima del analito que puede
ser detectada con un nivel de
confianza conocido.
• Depende de la relación entre la
magnitud de la señal analítica y
el tamaño de las fluctuaciones
estadísticas en la señal del
blanco.
 LÍMITE DE
CUANTIFICACIÓN

• Es la menor concentración del

analito que puede determinarse
con precisión y exactitud en una
muestra.
• Se expresa en las mismas
unidades de concentración
empleadas para el analito.
EXACTITUD

• Medición de la diferencia entre los resultados

previstos del análisis y el valor de referencia
aceptado, debido a un error sistemáticos del
método y del laboratorio.
• Normalmente se expresa en porcentaje de
recuperación.
 INCERTIDUMBRE EN LA MEDICIÓN

• Como no es posible realizar

mediciones absolutamente
exactas, toda medición va a
tener un margen de duda.
• La incertidumbre es el valor de
ese margen de duda.
• Determina la calidad de las
mediciones
FUENTES:

La naturaleza de la magnitud que se mide.

El instrumento de medición

El observador

Condiciones externas