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Pared Celular

• Protección física.
• Prevención de lisis osmótica.
• Ausente en Micoplasmas.
• 10 – 40% peso bacteriano.
• Capa gruesa en gram positivas, en gram negativas
es mucho mas delgada.
• Constituido principalmente por peptidoglicano o
mureina.
• Superficie externa cubierta de proteinas
• Lugar de acción antibióticos β-lactámicos.
CLASIFICACION BACTERIANA
COLORACIÓN GRAM: Gram fue un microbiólogo Danes que introdujo la
coloración Gram con la cual se divide a las bacterias en dos grupos:

BACTERIAS GRAM POSITIVAS : son las que retienen el colorante Cristal


Violeta ó Violeta de Genciana luego de decolorarla con el alcohol-
acetona por lo que se observarán de color AZUL.

BACTERIAS GRAM NEGATIVAS : son las que no retienen el colorante


Cristal Violeta al decolorar con alcohol-acetona, luego toman el color del
colorante de contraste Safranina por lo que se observarán de color ROJO.
Composición Pared Celular

 Péptidoglicano
(mureína)
2 azúcares: N-
acetilglucosamina (NAG) y
ácido N-acetilmurámico
(NAM) (ß 1-4).
Ac. Muramico: L-Alanina,
D-Alanina, D-Glutámico,
Lisina ( o
ácidodiaminopimélico)
Diferencias entre Gram (+s) y (-s)

• Gram (+) • Gram (-)


– Varias capas de – Una sola capa de
peptidoglicano peptidoglicano.
– Acidos teicoicos, carga (-): – No se tiñen con Cristal
• Poliglicerol fosfato: Acidos violeta, si no con fucsina
lipoteicoicos (MC) básica.
• Poliribitol fosfato: Acidos
teicoicos (P) – En acido-alcohol
resistentes,
– Funciones tipo adhesinas.
• NAM es sustituido por N-
– Retienen colorante Gram glicosil muramico.
(Cristal Violeta) • Acidos micolicos
PARED CELULAR GRAM (+)
…pared celular en Gram (-)

• PC compleja:
– Membrana externa con fosfolípidos – proteínas
(porinas) y LPS
– Espacio periplasmico (periplasma: mureína y
abundantes enzimas).
– Fina capa de peptidoglicano.
– Membrana citoplasmatica.
ENVOLTURA DE LAS GRAM NEGATIVAS

ESPACIO PERIPLASMICO :

Espacio entre la membrana citoplásmica y la membrana externa, que


contiene una solución como gel compuesta por:

Enzimas degradativas : fosfatasas, proteasas.


Enzimas que inactivan antibióticos : beta lactamasas.
Proteínas fijadoras : que absorben azúcares y aminoácidos.
LPS (Lipopolisacarido)
• Potente endotoxina.
• Constituido por:
– Lipido A (porción tóxica,
solo actúa en lisis celular)
– Core (4-5 azucares)
heptosas y ceto-
deoxioctanoico (KDO)
– Antigeno “O” (clasificacion
de microorganismos).
Pared Celular Gram (-)
Bacterias que no poseen pared

• Membrana celular mas gruesa pueden tener


esteroles y lipoglicanos.
• Son pleiomórficos
• Micoplasma
• Archea
– No contiene peptidoglicano
– Puede ser de
• pseudopeptidoglicano (pseudomureina) tiñe G+
• pseudomureina cubierta de proteina,tiñe G+
– monocapa superficial de proteina o glicoproteina,
sin pseudomureina. tiñe G-
– Existen Archaea sin pared
División Firmicutes
Mycoplasma Clase Mollicutes
Order Mycoplasmatales
Familia Mycoplasmataceae

Los micoplasmas se caracterizan por carecer de pared celular. Se les


considera las bacterias mas pequeñas capaces de crecer y vivir de forma
independiente.
En su membrana plasmática presentan esteroles, para compensar la falta de
pared celular, ya que dan una mayor estabilidad.

Son resistentes a penicilina y β-lactamicos, pero si son sensibles a los antibióticos que afectan a la síntesis de
proteínas como tetraciclina y cloranfenicol. Son sensibles a polienos, que afectan a la síntesis de esteroles y
que inhiben el crecimiento de hongos y levaduras.

Ureaplasma urealyticum, y Mycoplasma hominis, forman parte de la flora del aparato genital, en ocasiones
pueden producir infecciones que causan inflamación en el aparato genital de hombres y mujeres, su
transmisión guarda relación con la la actividad sexual. Son sensibles a las tetraciclinas y la mayoría resistentes
a eritromicina.
Mycoplasma pneunomiae es causante de la neumonía atípica. La transmisión, es por contacto directo o por
gotitas transmitidas por el aire. Es bastante frecuente en lactantes y niños pequeños y puede ser mas grave en
niños mayores y adultos. Sensible a eritomicina.
ARQUEBACTERIAS
agrupa a organismos unicelulares que en la nomenclatura antigua
pertenecían al reino Mónera; ya que carecen de núcleo como el resto de
los procariontes
• Se distinguen de las bacterias por las grandes diferencias existentes en
el análisis de los ARNr y la composición de su membrana
• Habitan ambientes extremos: termófilos, halófilos, metanófilos
• Se han encontrado en el sist. digestivo de las vacas, termitas, y
animales (fermentación de la materia vegetal)

IMPORTANCIA
• Participan en el metabolismo de rumiantes.
• Producción comercial de metano.
• Procesos bioquímicos que sostienen a las comunidades
biológicas de gran profundidad.
ESTRUCTURA DE
ARQUEOBACTERIAS
• generalmente pequeños (0,5-5 micras)
• presentan envolturas características, unas veces formadas por
proteínas y polisacáridos,
• también es característica la presencia de ARN-polimerasas de
constitución compleja y un gran número de nucleótidos
modificados en los ácidos nucleicos ribosomales.
• contienen glicerol e isoprenos en la membrana plasmática
• Termófilos extremos (“heat-lovers”)
– habitan ambientes muy calientes (ventanes termales, manantiales
cálidos cerca de volcanes), cualquier ambiente donde la temperatura
>250 oC.
– Usan H2S como fuente de electrones para la formación de ATP
• Metanógenos extremos (“methane-makers”)
– viven en habitat libres de O2 (pantanos, aguas de
alcantarillas,intestina de animales)
– producen ATP anaerobicamente al convertir CO2 e hidrogeno
gaseoso en metano
• Halófilos extremos (“salt-lovers”)
– Toleran ambientes muy salinos
– producen ATP aerobicamente, pero algunos pueden producir ATP,
por via fotosintética, usando bacteriorodopsina
Thermoplasma
• Thermoplasma es un género de microorganismos del dominio Archaea.
Pertenece a la clase Thermoplasmata, que prospera en ambientes ácidos
y de alta temperatura. Thermoplasma es un anaerobio facultativo que
respira azufre y carbono orgánico. No tiene pared celular, pero en vez de
ello dispone de una membrana única compuesta principalmente de un
lipoglicano tetra-eter que contiene un lípido tetra-eter unido a un
oligosacárido que contiene glucosa y manosa. Este lipoglicano es
presumiblemente responsable de la estabilidad ácida y térmica de la
membrana de Thermoplasma.

• Actualmente el género Thermoplasma comprende dos especies, T.


acidophilum y T. volcanium. Ambas especies tienen numerosos flagelos.
T. acidophilum fue aislado originalmente de una pila de carbón
encendida a pH 2 y 59 °C. Numerosas cadenas de T. volcanium se han
aislado en mananiales termales sulfurosos en muchos lugares. Los
genomas de ambas especies han sido secuenciados.
Lisozima

- También conocida como Muramidasa.

- Cataliza la hidrólisis de las uniones β-1,4 entre el ácido N-


acetilmurámico y la N-acetil-D-glucosamina.

- Presente en saliva, lagrimas y moco.

- Puede actuar como opsonina. Cubriendo la bacteria para


facilitar su fagocitosis.
Penicilina
- Bactericida perteneciente a la familia de los β-lactámicos.

- Actúa sobre los peptidoglucanos de la pared celular de bacterias.

- Inhibe la formación de enlaces que permiten la reticulación de los


peptidogluganos.

- Induce la lisis osmótica.

- La pared celular es indispensable para la división celular, transporte y


patogenicidad.

- Tiene un efecto sinérgico con los aminoglucósidos.

- La resistencia a los antibióticos β-lactámicos esta dada por una enzima llamada β-
lactamasa que rompe el anillo β-lactámico (3 Carbonos y 1 Nitrógeno)
PROTOPLASTOS Y ESFEROPLASTOS
• Mediante procedimientos de laboratario se puede lograr eliminar
total o parcialmente la pared celular bacteriana. Se denominan
protoplastos las células bacterianas a las que se ha desprovisto
totalmente de pared celular, mientras que esferoplastos son aquellas
células bacterianas que poseen restos de pared.

• Obtención. Existen dos posibles métodos alternativos:

• 1. Por destrucción del entramado del PG mediante enzimas líticas


(lisozima, peptidasas). En el caso de bacterias Gram-negativas,
previamente hay que desorganizar la membrana externa para hacerla
permeable a estas enzimas. Ello se logra usando el quelante EDTA y/o
sometiendo las células a bajas temperaturas.

• 2. Por inhibición de la formación de nuevo PG en las células en


crecimiento, tratándolas p. ej., con penicilina. Si se parte de un mutante
auxotrofo para un componente del PG basta hacer crecer a la bacteria en
un medio carente de dicho componente.
PROTOPLASTOS Y ESFEROPLASTOS

• Estos métodos permiten:

• En el caso de Gram-positivas, la desorganización total de su


pared, por lo que se obtienen protoplastos;

• En el caso de las Gram-negativas, quedan restos de


membrana externa y de peptidoglucano atrapados en ella,
por lo que se obtienen esferoplastos.

• En ambos casos, protoplastos y esferoplastos pueden


revertir a la forma normal eliminando el tratamiento
(retirando la lisozima, o la penicilina).
PROTOPLASTOS Y ESFEROPLASTOS
• Protoplastos y esferoplastos son formas osmóticamente sensibles debido
precisamente a que al no existir o estar desorganizado parcialmente el
PG, ya no se pueden contrarrestar las fuerzas de presión osmótica
existentes en los medios hipotónicos en que normalmente se cultivan o
suspenden las bacterias. Por lo tanto, si se quieren obtener suspensiones
estables de estas formas, hay que obtenerlas en medios o soluciones
isotónicos o ligeramente hipertónicos, para evitar su lisis. En estos
medios los protoplastos y esferoplastos poseen formas esféricas,
independientemente de la forma que tuviera la bacteria con pared de
que proceden.
PROTOPLASTOS Y ESFEROPLASTOS
• Se emplean en varios aspectos de investigación básica:

• Método suave para luego obtener extractos libres de células


y fracciones subcelulares.

• En algunas bacterias, método para hacerlas permeables al


ADN, en experimentos de transformación genética.

• Para realizar fusión entre protoplastos de diferentes cepas


de la misma especie e incluso entre especies distintas. Se
trata de un método de obtención de “recombinantes
somáticos” usado para determinados estudios genéticos en
bacterias que no tengan sistemas naturales de transferencia
genética.
FORMAS L
• Son células bacterianas carentes total o casi totalmente de
P.C., con formas pleomórficas, irregulares y globulares, que
se producen de forma espontánea en algunas especies
bacterianas (p. ej., Streptobacillus moniliformis) cuando se
cultivan en medios a base de suero (que son hipertónicos).
Estos microorganismos reciben el nombre de Formas L (L:
proviene de Lister Institute, Londres). Estas bacterias tienen
una morfología colonial muy parecida a la de los
Micoplasmas.

• Las Formas L se pueden presentar también en otras


bacterias, siempre que la síntesis de PC esté alterada.

• Las colonias de las formas L naturales son muy


características: en “huevo frito”.

• Se pueden obtener de forma inducida formas L en


diversas bacterias Gram-positivas y Gram-negativas,
tratándolas con penicilina en medios hipertónicos.
FORMAS L
• Las formas L inestables se generan por tratamientos
breves, y pueden revertir con frecuencia a la forma
normal con pared. Poseen algo de PG, aunque éste
se encuentra alterado respecto al PG de la célula
normal.

• Las formas L estables se producen por


tratamientos más prolongados, y no suelen revertir
al tipo normal. La mayoría carecen totalmente de
peptidoglucano.

• Así pues, en las formas L el peptidoglucano


ha sido eliminado total o parcialmente, pero de
manera que ya no puede servir de aceptor de nuevo
PG.

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