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GENÉTICA Y

BIOTECNOLOGÍA
Ms. Augusto Mechato Anastasio
mechato@gmail.com
Genética y biotecnología
• Todas las propiedades de los organismos dependen de la suma de sus
genes.
• Estos pueden dividirse en dos categorías: estructurales y reguladores.
• Los genes estructurales codifican para proteínas que, como las
enzimas, determinan las capacidades bioquímicas del organismo al
catalizar reacciones sintéticas o catabólicas o, de manera alternativa,
desempeñar un papel más estático como componente de las
estructuras celulares.
Genética y biotecnología
• Los genes reguladores controlan la expresión de los genes
estructurales determinando la velocidad de producción de sus
productos proteicos en respuesta a señales intra o extracelulares.
• Los primeros estudios de Watson y Crick y otros, a principios de los
años cincuenta, condujeron a la construcción del modelo de la doble
hélice describiendo la estructura molecular de DNA y las siguientes
hipótesis, las implicaciones para la comprensión de la replicación
génica.
Genética y biotecnología
• Los cambios en el DNA de un organismo pueden ocurrir de dos
maneras:
• (1) Por mutación, que consiste en la adición o eliminación de uno o
más componentes químicos de la molécula de DNA.
• (2) Por intercambio de información genética o DNA entre organismos
similares normalmente por reproducción sexual y por transferencia
horizontal en bacterias.
Genética y biotecnología
Manipulación de un organismo
• La manipulación genética de organismos completos ha estado
sucediendo de manera natural por reproducción sexual desde el
comienzo de los tiempos. El progreso evolutivo de la mayoría de las
criaturas vivientes ha implicado la interacción entre sus genomas y el
medio ambiente.
• El control activo de la reproducción sexual se ha practicado en
agricultura durante décadas, incluso siglos.
• En tiempos más recientes se ha utilizado con varios microorganismos
de carácter industrial, como levaduras.
Genética y biotecnología
Manipulación de un organismo
• Este tipo de manipulación implica procesos de selección, mutación,
cruzamientos sexuales, hibridaciones. Sin embargo, es un proceso
altamente aleatorio y puede llevar mucho tiempo conseguir los
resultados deseados.
• En el campo de la agricultura los beneficios han sido cuantiosos con la
mejora de plantas y animales.
• En las industrias biotecnológicas se ha conseguido incrementar
considerablemente la productividad, como es el caso de producción
de antibióticos y enzimas.
Genética y biotecnología
Manipulación celular
• Implican la fusión celular o el cultivo de células y la regeneración de
plantas enteras a partir de estas células.
• Este es un proceso casi al azar o directo a diferencia de las
manipulaciones en organismos, pudiéndose identificar los cambios de
manera mucho más rápida.
Genética y biotecnología
Manipulación molecular
• Las manipulaciones moleculares del DNA y del RNA han venido
ocurriendo durante las dos últimas décadas y han posibilitado una
nueva era en la manipulación genética haciendo posible, por primera
vez en la historia, un control directo de los cambios.
• Este proceso abarca el área conocida como ingeniería genética o
tecnológica del DNA recombinante, que está produciendo en la
actualidad cambios dramáticos en el campo de la biotecnología.
Genética y biotecnología
Manipulación molecular
• En la actualidad es posible añadir o suprimir partes de la molécula de
DNA con un alto grado de precisión, y el producto puede identificarse
fácilmente.
• La empresas industriales hoy en día están implicadas en la producción
de nuevos tipos de organismos y la producción de nuevos
compuestos de carácter farmacéutico o químico.
Genética y biotecnología
Genética industrial
• Hasta ahora se ha considerado a la biotecnología como la interacción
entre dos componentes, uno de los cuales es la selección del mejor
biocatalizador para un determinado proceso, mientras que el otro es
la construcción y operación de mejor ambiente para el catalizador
con el fin de conseguir un proceso óptimo.
• La forma más estable, efectiva y conveniente para un biocatalizador
es el organismo entero; en la mayoría de los casos se trata de un
microbio (bacteria, hongo o levadura), si bien los cultivos celulares de
células de mamífero, y en menor medida de vegetales, están
alcanzando un mayor uso biotecnológico con el tiempo.
Genética y biotecnología
Genética industrial
• La mayoría de los microorganismos utilizados en la actualidad en los
procesos biotecnológicos fueron aislados originalmente del medio
natural y posteriormente modificados genéticamente para conseguir
una mayor productividad.
• El éxito en la selección de cepas y de las mejoras genéticas
practicadas por la totalidad de las industrias de base biológica
(fermentaciones, antibióticos, etc.) es el resultado directo de una
estrecha colaboración entre tecnólogos y genetistas.
Genética y biotecnología
Genética industrial
• En los procesos biotecnológicos, una de las metas es optimizar una
característica determinada realizada por un organismo, como podría
ser la producción de enzimas o productos enzimáticos, utilizándose
con asiduidad la modificación genética para conseguir incrementar la
productividad.
• El objetivo de incrementar la producción de determinados
metabolitos o macromoléculas (enzimas) es más sencillo que intentar
incrementar la producción de productos más complejos, tales como
los antibióticos, consiguiéndose avances en esta área mediante el uso
de técnicas de monitorización y selección para la obtención de
organismos mejorados.
Genética y biotecnología
Genética industrial
• En un sistema selectivo, todas las cepas raras o nuevas crecen
mientras el resto no lo hacen.
• En un sistema monitoreado, todas las cepas crecen, pero alguna de
estas cepas o cultivos se eligen debido a que muestran las
características deseadas por la industria en cuestión.
• Una vez que se encuentra una cepa de elevada producción, se toma
gran cuidado en su mantenimiento ya que a veces ocurren
mutaciones espontáneas a altas tasas que originan la degeneración
de la cepa.
Genética y biotecnología
Genética industrial
• La inestabilidad genética de dichas cepas, suele ser un problema
constante en los microorganismos de utilización industrial.
• La industria siempre ha puesto gran énfasis en el potencial de
productividad y la viabilidad de las cepas.
• La mayoría de los microorganismos de importancia industrial pueden
ser almacenados durante largos períodos, en nitrógeno líquido,
liofilizados o en aceite; y aún mantener sus propiedades biológicas
deseadas.
Genética y biotecnología
Genética industrial
• En años recientes, la genética industrial ha pasado a depender de
manera creciente de dos nuevas vías de manipulación del DNA:
• (1) Tecnologías de protoplastos y fusión celular
• (2) Tecnología de DNA recombinante (ingeniería genética).
• Siendo estas técnicas, dos nuevas adiciones al repertorio
metodológico de los genetistas implicados en las industrias
biotecnológicas.
Genética y biotecnología
Tecnologías de protoplastos y fusión celular
• Las células vegetales y la mayoría de los microbios se caracterizan por
presentar una pared celular o exoesqueleto que proporciona la forma
característica a las células o los organismos
• A continuación de la pared celular se encuentra la membrana
plasmática que retiene en su interior todos los componentes celulares
tales como el núcleo, las mitocondrias, vesículas, etc.
• En los últimos tiempos ha sido posible, utilizando técnicas especiales
(en particular enzimas hidrolíticas) eliminar la pared celular, liberando
estructuras esféricas mantenidas por la membrana celular conocidas
como protoplastos.
Genética y biotecnología
Tecnologías de protoplastos y fusión celular
• Estos protoplastos son extremadamente frágiles, pero pueden
mantenerse en aislamiento durante periodos variables de tiempo.
• Los protoplastos aislados no pueden propagarse por sí mismos de
modo que necesitan regenerar previamente la pared celular antes de
retomar la capacidad reproductora.
• En la práctica, es la pared celular la que impide en gran medida la
conjugación sexual entre organismos. Sólo con cepas sexualmente
compatibles completamente la pared celular degenera, permitiendo
el intercambio protoplasmático.
Genética y biotecnología
Tecnologías de protoplastos y fusión celular
• La fusión de protoplastos tiene obvias aplicaciones empíricas en la
mejora de producción de antibióticos mediante la combinación de
mutaciones que incrementan la productividad a partir de diferentes
cepas o inclusos especies.
• Los protoplastos serán también una importante parte de la ingeniería
genética al facilitar la transferencia de DNA recombinante.
• La fusión puede suministrar un método para la reclasificación de
grupos enteros de genes entre diferentes cepas de microorganismos.
Genética y biotecnología
Tecnologías de protoplastos y fusión celular
• Un área de mayor éxito desde el punto de vista comercial de la
biotecnología implica una forma de fusión celular de células de
mamífero conducente a la formación de anticuerpos monoclonales.
• Las células de organismos vertebrados (linfocitos β) tienen la
capacidad de secretar anticuerpos que pueden inactivar moléculas
extrañas contaminantes (antígenos) en el organismo del animal. El
anticuerpo tiene una estructura en forma de <<Y>> y utiliza una parte
de su estructura para unirse a los antígenos invasores y la otra parte
para disparar la respuesta del organismo con el fin de eliminar el
complejo antígeno-anticuerpo.
Genética y biotecnología
Tecnologías de protoplastos y fusión celular
• Se ha calculado que las especies de mamíferos pueden generar hasta
100 millones de anticuerpos diferentes, asegurándose de esta forma
que la mayoría de los antígenos invasores serán reconocidos por
algún anticuerpo.
• Los anticuerpos presentan elevadas capacidades de afinidad y
especificidad para los antígenos reconocidos.
• En mamíferos constituyen una de las principales defensas contra
organismos patógenos y otras moléculas de carácter tóxico.
Genética y biotecnología
Tecnologías de protoplastos y fusión celular
• Los intentos de cultivar las células productoras de anticuerpos en
medios artificiales han sido generalmente infructuosos,
produciéndose la muerte de las células o bien perdiendo la capacidad
de producir anticuerpos.
• Hoy día es conocido que cada subtipo de linfocitos β produce un
único anticuerpo. Sin embargo, en 1975, Georges Köhler y Cesar
Milstein demostraron de forma exitosa la producción de anticuerpos
puros (monoclonales) a partir de un producto de fusión (hibridoma)
de linfocitos β (células productoras de anticuerpos) y células
tumorales de mieloma.
Genética y biotecnología
Tecnologías de protoplastos y fusión celular
• El proceso de obtención de anticuerpos monoclonales se realiza
mediante la inyección a un ratón o conejo del antígeno en cuestión, la
posterior extracción del bazo del animal y la fusión de las células
aisladas del bazo con células de mieloma.
• Aproximadamente el 1% de las células aisladas del bazo son
productoras de anticuerpos y el 10% de los hibridomas finales
consisten en células secretoras de anticuerpos. (Figura 1).
Genética y biotecnología
Tecnologías de protoplastos y fusión celular
• En la actualidad, los anticuerpos monoclonales se utilizan de forma
extensiva en muchas técnicas diagnósticas que requieren un alto
grado de especificidad.
• Los anticuerpos monoclonales específicos se combinan en ensayos
comerciales no sólo para el diagnóstico de enfermedades sino
también en agricultura, ganadería o en la industria alimentaria.
• Los anticuerpos monoclonales podrán ser utilizados en el futuro en la
terapia de anticuerpos para llevar de forma específica las drogas
citotóxicas a las células cancerígenas. En la industria de la
fermentación se utilizan hoy en día de manera rutinaria como
ligandos de afinidad para la purificación de productos altamente
costosos.
Genética y biotecnología
Ingeniería genética
• Los genes son la base fundamental de toda la vida, determinan las
propiedades de todos los seres vivientes y son secuencias definidas
de DNA.
• Debido a que la estructura y composición de DNA de todos los seres
vivientes es esencialmente la misma, cualquier tecnología que pueda
aislar, cambiar o reproducir un gen es probable que tenga un impacto
sobre cada uno de los aspectos de la sociedad.
Genética y biotecnología
Ingeniería genética
• La recombinación genética, tal como ocurre durante la reproducción
sexual normal, consiste en la rotura y ligación de las moléculas de DNA
de los cromosomas, y es de importancia fundamental en todos los
seres vivos para el reordenamiento del material genético.
• Las técnicas han evolucionado a una velocidad sorprendentemente
elevada y se han desarrollado vías para la introducción de DNA en
otros organismos como levaduras y cultivos de células vegetales y
animales.
• Una vez comprobado que el material genético transferido por estos
medios puede replicarse y ser expresado en el nuevo tipo celular, en
principio no habría limite a la obtención de organismos con nuevas
propiedades que podrían ser producidos mediante ingeniería genética.
Genética y biotecnología
Ingeniería genética
• Estos métodos permiten potencialmente la adición de funciones
totalmente nuevas a las capacidades de un organismo y abren el
campo para la ingeniería genética de microorganismos de uso
industrial, plantas de interés agrario y animales con unas expectativas
asombrosas.
• Esta es, sin lugar a duda, la más significativa de las nuevas tecnologías
en las ciencias de la vida y la biotecnología.
• En la microbiología industrial permitirá la producción en
microorganismos de una extensa cantidad de productos de otra
manera impensables, como proteínas y enzimas de origen humano o
animal tales como la insulina o la quimosina; en medicina mejores
vacunas, hormonas y terapias para el tratamiento de enfermedades.
Genética y biotecnología
Ingeniería genética
• En agricultura la mejora de la productividad, calidad de los productos y
resistencia a enfermedades de plantas y animales.
• En la producción alimentaria una mejora en la calidad, aroma, sabor y
seguridad de los productos.
• En el medio ambiente pueden esperarse una extensa gama de
beneficios implicados en el control de la polución.
• En la tecnología microbiana, estas técnicas se utilizarán ampliamente
para mejorar los procesos microbianos existentes incrementando la
estabilidad de los cultivos actuales y eliminando los productos
laterales no deseados.