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Docente:

- Ing. Fiorella Guere Salazar


Integrantes:
- Calderón Chipayo, Anthony
- Martel Rosales, Alexandra
- Quispe Enríquez, Alexander
- Quispe Salas, María
- Solier Quispe, Romina
La alteración por hidrocarburos del petróleo es un problema amplio y de carácter mundial,
teniendo en cuenta que independiente de áreas dañadas y contaminadas por procesos
industriales, los contaminantes (Hidrocarburo) tienen como destino final mares y ríos.

En el agua, los hidrocarburos se esparcen de manera considerable, debido a la


diferencia de densidades entre ambos líquidos.

Perú, es uno de los países que se ha visto afectado en los últimos tiempos por la alteración de
hidrocarburos producto de los trabajos industriales y marítimos. A su vez, por fases relacionadas
con la utilización, traslado, manejo del petróleo y sus derivados.
Las actividades navales son responsables del 33% de los derrames de petróleo, los accidentes de
los buques petroleros son 12%, empresas industriales y descargas urbanas del 37%.
En el presente trabajo de Investigación propone la aplicación de un tratamiento biotecnológico
con “BACTERIAS NATIVAS”, para evaluar su capacitad de degradación en suelos hidrocarbonados.
En la mayoría de los bioprocesos las células y los biocatalizadores están sumergidos y
suspendidos en un medio en el que pueden mantenerse activos.
General
• Biodegradar hidrocarburos totales de petróleo presente en agua y suelo
contaminado aplicando bacterias nativas en un biorreactor piloto tipo
airlift sometidas a óptimas condiciones de cultivo.

Específicos
• Determinar la influencia de las condiciones de cultivo de las bacterias
nativas en el proceso de biodegradación de hidrocarburos totales de
petróleo de agua y suelo contaminados en un biorreactor piloto tipo
airlift.
• Determinar la influencia de pH y la temperatura en el proceso de
biodegradación de hidrocarburos totales de petróleo en un biorreactor
piloto tipo airlif.
Solución hidropónica A y B Bombas de aire

Baldes aforados Mangueras tipo sondas


Dimensiones de los baldes aforados Estación Meteorológica
Cubre Objeto Difusores

pH metro y Termómetro
Solución hidropónica A 150 mL - 10 10
Solución hidropónica B 50 mL - 8 8
Bolsa zip-ploc 2u plástico 1.00 2.00
Baldes aforados 2u 10 L 14 28
Mangueras 8m 0,5 cm de diámetro 1.00 8.00
Cinta negra 1u 3M 3 3
Centímetro 1u regla 2 2
Difusores 4u - 3.00 12.00
Silicona 1u Barra 0.50 0.50
Petróleo 2L - 5 5
Bomba de aire 2u 2 entradas 25.00 50.00
Porta y cubre objeto 4u vidrio 3 3
Extracto de carne 10 g líquido 1 1
Detergente 2g - 1 1
Termómetro 1u comprado 60 60
Phmetro 1u Alquilado 80 80
Microscopio 1u - - -
Estación meteorológica 1u Alquilado 140 140
Parte experimental
La muestra de suelo fue
recolectada del distrito de Villa
María del Triunfo en la zona de
José Gálvez, presentando un
núcleo humano formando un
centro poblado “Las Palmas de
José Gálvez”.
La muestra fue aleatoria simple
representada por una muestra
de un kilogramo.
Selección de un consorcio microbiano degradador
de hidrocarburos totales de petróleo
Materiales
- Agua (500 mL)
- Petróleo (5 mL)
- Sacarosa (0,1 g)
- Solución hidropónica A
(2,5mL)
- Solución hidropónica B
(1mL)
- Bolsa zip-ploc (1 unidad)
- Detergente (1,5 g)
Diseño de un Sistema de biorreactores tipo airlift
para la biodegradación de hidrocarburo
Materiales
 Baldes de plástico limpios y aforados de diámetro mayor 26cm, altura 27.4 cm y
diámetro menor 20.6 cm
 Mangueras de plástico de 0.5 cm de diámetro (8 metros)
 Bomba de aire Sebo ® de modelo SB-348A de doble salida de aire
 Cinta adhesiva marca 3M
 Tijeras simples
 Centímetro
 Difusores
 Silicona
Para el desarrollo del trabajo experimental, se trabajó con un
biorreactor del tipo airlift, cuyo esquema se presenta en la Figura.
Producción de microorganismos que degradan
hidrocarburos totales de petróleo empleando
tratamiento por suspensión

Reactor 1 (agua) Reactor 2 (suelo)


Petróleo 1L Petróleo 1L
Solución A 50 mL Solución A 50 mL
Solución B 20 mL Solución B 20 mL
Alícuota del cultivo 150 mL Suelo contaminado
Carne 5 g Carne 5 g
Sacarosa 1g Sacarosa 1g
Agua c.s.p. 5 L Agua c.s.p. 5 L
Análisis en el laboratorio
Detección de microorganismos degradadores

Materiales
- Porta y cubre objeto
- Alícuota de la muestra a analizar
- Microscopio marca Primo Star.
- Muestra a analizar
Medición con el PH metro y termómetro

Materiales
- Phmetro Tracer ® Pocketester
- Termómetro digital Omron ®
- Vaso bícker
- Muestra a analizar
Análisis de la temperatura ambiental

Para hallar determinar cómo influye


la temperatura ambiental en la
biodegradación de hidrocarburos, se
empleó una estación meteorológica
de marca PCE-FWS 20

La cual entró en funcionamiento el


19 de octubre del 2018, y se instaló
en el mismo lugar donde se realiza la
investigación con los reactores.
H: 1mm
Medición: 7 H: 3mm
Día: 09/11/18 Medición: 20
Día: 05/12/18
H: 1mm H: 2mm
Medición: 6 Medición: 10
Día: 07/11/18 Día:15/11/18
H: 5mm H: 6mm
Medición: 22 Medición: 23
Día: 09/12/18 Día: 11/12
Biodegradación
Mediación -
Día HR1 HR2
Biodegradación
1 - 28/10 0 0 7
2 - 30/10 0 0
3 - 01/11 0 0 6
4 - 03/11 0 0
5 - 05/11 0 0
6 - 07/11 0 1 5
7 - 09/11 1 1
8 - 11/11 1 1 4
9 - 13/11 1 1
10 - 15/11 1 2 3
11 - 17/11 1 2
12 - 19/11 1 2
13 - 21/11 2 2 2
14 - 23/11 2 2
15 - 25/11 2 3 1
16 - 27/11 2 3
17 -29/11 2 3
0
18 - 01/12 2 3
1 - 28/10
2 - 30/10
3 - 01/11
4 - 03/11
5 - 05/11
6 - 07/11
7 - 09/11

9 - 13/11

17 -29/11
10 - 15/11
11 - 17/11
12 - 19/11
13 - 21/11
14 - 23/11
15 - 25/11
16 - 27/11

18 - 01/12
19 - 03/12
20 - 05/12

22 - 09/12
23 - 11/12
8 - 11/11

21 - 07/12
19 - 03/12 2 4
20 - 05/12 3 4
21 - 07/12 3 4
22 - 09/12 3 5 HR1 HR2
23 - 11/12 3 6
Temperaturas de Reactores
Mediación -
Día Temp R1 Temp R2
1 - 28/10 20,1 20
Temperaturas de Reactores
2 - 30/10 20,2 20,1 22
3 - 01/11 20,1 20,2
4 - 03/11 20,2 20,3
5 - 05/11 20,3 20,3 21.5
6 - 07/11 20,2 20,5
7 - 09/11 20,4 20,4 21
8 - 11/11 20,4 20,6
9 - 13/11 20,3 20,9
10 - 15/11 20,4 20,8 20.5
11 - 17/11 20,4 20,6
12 - 19/11 20,5 20,8
20
13 - 21/11 20,4 20,7
14 - 23/11 20,5 20,9
15 - 25/11 20,6 20,8 19.5
16 - 27/11 20,5 21,1
17 -29/11 20,6 20,9
18 - 01/12 20,7 21,3 19

21 - 07/12
10 - 15/11
11 - 17/11
12 - 19/11
13 - 21/11
14 - 23/11
15 - 25/11
16 - 27/11

18 - 01/12
19 - 03/12
20 - 05/12

22 - 09/12
23 - 11/12
1 - 28/10
2 - 30/10
3 - 01/11
4 - 03/11
5 - 05/11
6 - 07/11
7 - 09/11
8 - 11/11
9 - 13/11

17 -29/11
19 - 03/12 20,9 21,4
20 - 05/12 21 21,7
21 - 07/12 20,9 21,5
22 - 09/12 21,1 21,7
23 - 11/12 20,9 21,8 Temp R1 Temp R2
Temperatura Ambiental Máximas y Mínimas
Mediación
- Día Temp Máx Temp Mín
Temperaturas Máximas y Mínimas
1 - 28/10 22,2 15,9 30
2 - 30/10 22 16,1
3 - 01/11 22,1 15,9
4 - 03/11 22,3 16,5 25
5 - 05/11 22,1 16,4
6 - 07/11 22,4 16,3
7 - 09/11 22,3 16,1 20
8 - 11/11 22,8 16,7
9 - 13/11 22,6 16,8
10 - 15/11 23,1 16,4 15
11 - 17/11 23,3 16,5
12 - 19/11 23,8 16,4
13 - 21/11 23,2 16,9 10
14 - 23/11 23,9 16,8
15 - 25/11 24,1 16,9
16 - 27/11 24,6 17,3
5
17 -29/11 24,7 17,6
18 - 01/12 25,2 18,1
19 - 03/12 24,2 17,9
0
20 - 05/12 26 18,1
21 - 07/12 24,5 18
22 - 09/12 25,1 17,9
23 - 11/12 25 18,1
Temp Máx Temp Mín
pH de los Reactores 1 y 2
Mediación - pH de los Reactores
Día pH R1 pH R2
1 - 28/10 8,91 9,79 10.50
2 - 30/10 8,94 9,85
3 - 01/11 8,89 9,91 10.00
4 - 03/11 8,90 9,13
5 - 05/11 8,86 9,05
6 - 07/11 8,89 8,96 9.50
7 - 09/11 8,88 8,81
8 - 11/11 8,81 8,79
9.00
9 - 13/11 8,83 8,78
10 - 15/11 8,80 8,69
11 - 17/11 8,84 8,70 8.50
12 - 19/11 8,85 8,71
13 - 21/11 8,79 8,63
14 - 23/11 8,80 8,58 8.00
15 - 25/11 8,78 8,59
16 - 27/11 8,81 8,55 7.50
17 -29/11 8,79 8,55

17 -29/11

22 - 09/12
1 - 28/10
2 - 30/10
3 - 01/11
4 - 03/11
5 - 05/11
6 - 07/11
7 - 09/11
8 - 11/11
9 - 13/11
10 - 15/11
11 - 17/11
12 - 19/11
13 - 21/11
14 - 23/11
15 - 25/11
16 - 27/11

18 - 01/12
19 - 03/12
20 - 05/12
21 - 07/12

23 - 11/12
18 - 01/12 8,77 8,53
19 - 03/12 8,79 8,54
20 - 05/12 8,78 8,47
21 - 07/12 8,76 8,48
22 - 09/12 8,77 8,47 pH R1 pH R2
23 - 11/12 8,76 8,42
Se evidencia la disminución de HTP

Disminución Altura Inicial

3mm 6mm

13,04 % 26,09 %
Bacterias Bacterias
Nativas Nativas
de Agua de Suelo
Por la diferencia de altura y aspectos
visuales (turbidez y formación de
coágulos)
Conforme pasaban los días…
La biodegradación de HTP permitía:

pH de la mezcla tiende
a la Neutralidad
Siendo la Neutralidad una condición
favorable para la proliferación de
bacterias
Tienden a la
Neutralidad

Por lo tanto, se comprueba la eficacia en la biodegradación


En los días de mayor Temperatura Ambiental aumentaba la temperatura
de los reactores

Brindándoles así una mejor condición para la


actividad biodegradadora.
Temperatura
Aumento de
Temperatura Ambiental
Ambiental

Influye
En el cambio de
estación
significativamente

Favoreció el Eficiencia de los


aumento de
Temperatura de Reactores
los Reactores
• Condiciones operativas de cultivo más propicias:
Solución Hidropónica A

Solución Hidropónica B

Temperatura Ambiental

Sacarosa

Sistema de aireación

Extracto de carne molida


Bacilos GRAM positivos: Los bacilos - Género Rhodococcus: El Rhodococcus es un
grampositivos son cosmopolitas ya género de bacterias Gram-positivas aerobias.
que forman esporas, tenemos a las Aunque algunas especies son patógenas, la
especies y sus estudios confirman mayoría son benignas y se ha encontrado que
que tienden a degradar cadenas de prosperan en una amplia gama de ambientes,
hidrocarburos. incluyendo el suelo, el agua.
• Pseudomonas Auriginosas: Es una especie de bacterias Gram-
negativas, aeróbica.. Es capaz de crecer en combustibles
como gasóleo, ya que es un microorganismo capaz de nutrirse a
partir de hidrocarburos, creando una gelatina oscura.