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Métodos para la manipulación genética de bacterias marinas

Zahraa Zeaiter, Francesca Mapelli, Elena Crotti Sara Borin.


Electronic Journal of Biotechnology

INTRODUCCIÓN METODOLOGIA Y MATERIALES  La presencia de sales, que son necesarias para el cultivo de la mayoría
La mayoría de los estudios sobre transformación natural se centraron en el género Vibrio
de las cepas marinas ( V. parahaemolyticus )..
 La vida microbiana marina son una reserva fascinante de Transferencia de genes Ventajas Criticas
 Dependiendo del tipo de sistema de restricción bacteriano, el ADN no
diversidad genetica y funcional, sus productos podrían metilado también podría usarse con éxito en experimentos de
aprovecharse en muchos sectores biotecnológicos diferentes. TRANSFORMACIÓN NATURAL -Procedimiento sencillo; - Procedimiento que consume transformación. (B. marinus B-9987).
-Método bien establecido para mucho tiempo;
 Muchos microorganismos marinos siguen sin utilizarse ya que Vibrio Strains (protocolo basado en - Requiere células naturales  En Vibrio splendidus LGP32, los intentos de transferencia de plásmidos
existe una falta de métodos de aislamiento o cultivo eficientes y quitina) competentes; utilizando electroporación fallaron, pero cuando los autores transfirieron
- Requiere grandes cantidades de
la consecuencia de los procedimientos de manipulación genética un nuevo vector suicida basado en RP4, lograron obtener varios
ADN
inadecuados disponibles. mutantes.
 Los investigadores utilizaron estos mecanismos naturales de  Se han desarrollado recientemente técnicas de ingeniería de genoma
TRANSFORMACIÓN QUÍMICA - procedimiento fácil - Dependiente de las
multiplex por transformación natural (MuGENT) para el V. cholerae
transferencia horizontal de genes (HGT) para la manipulación endonucleasas de restricción de la
bacteria receptora marino y V. natriegens.
celular a través de la transformación y conjugación. - Requiere celdas químicas
competentes
Para insertar ADN en bacterias, se han desarrollado diferentes
métodos artificiales, que incluyen técnicas químicas y físicas.
ELECTROPORACIÓN - Método bien establecido y -Dependiente de las
Generalmente se usan como vectores lanzadera en rápido; endonucleasas de restricción de la
electroporación y procedimientos basados ​en conjugación debido - Aplicado en una amplia gama de bacteria receptora
especies, incluidas bacterias y - Afectado por la presencia de sal y
a su relativa facilidad de manipulación. arqueas; la composición de los medios y
- Procedimiento de transformación tampones
de alta ciencia; - Afectado por la topología, el CONCLUSIONES
- Requiere una pequeña cantidad tamaño y la concentración de ADN
de ADN - Afectado por la fuerza del campo; • Se ha demostrado que diferentes sistemas de manipulación genética,
• Conjugación del genoma • Competencia - Requiere células electro incluida la transformación química, la electroporación y la conjugación,
competentes
• Electroporación • Bacterias natural son útiles para manipular bacterias marinas
• Manipulación marinas • Transformación - Método bien establecido; -Laborioso (método lento); • Es una tarea desafiante predecir qué método sería el más efectivo para
- Desvía la barrera de -Posibles problemas en la selección
genética • Biblioteca CONJUGACIÓN
endonucleasa de restricción del de transconjugantes después del
una bacteria determinada.
• Ingeniería metagenómica huésped bacteriano apareamiento. • En general, la electroporación y la conjugación se consideran los
métodos más eficaces para manipular genéticamente las cepas marinas.
RESULTADOS • El éxito de la manipulación genética se basa en diferentes variables que
OBJETIVOS:  La bacteria V. cholerae sirve como colonizador de superficies basadas en deben examinarse en profundidad y que deben optimizarse para cada
quitina especie.
• Describir los métodos de manipulación genética utilizados hasta  Pollack-Berti utilizó un protocolo simple y eficiente para transformar V. • El uso de NaCl para el crecimiento de bacterias marinas es el principal
ahora en las bacterias marinas, destacando así los factores fischeri de forma natural con ADN exógeno. obstáculo que afecta la manipulación de las bacterias.
limitantes de las diferentes técnicas disponibles en la actualidad  El uso de un mutante DNasa-negativo de V. cholerae mostró resultados • Aunque existen varios métodos eficientes de manipulación genética, es
para aumentar la eficacia de la manipulación. positivos. muy difícil diseñar una estrategia universal para transformar
• Considerar las transformaciones naturales y artificiales y los  La electroporación se utilizó como un método exitoso para la eficientemente cualquier bacteria con ADN exógeno. Por lo tanto, se
transformación de V. parahaemolyticus, V. alginolyticus and V. cholerae. requiere más investigación en este campo, con el objetivo de optimizar
procedimientos basados en la conjugación porque estos
 Piekarski intentó transformar 12 Roseobacter sp. cepas usando el los protocolos para especies o grupos bacterianos específicos.
métodos se han adoptado en la en la mayoría de los estudios sobre
procedimiento de transformación estándar de E.coli. BIBLIOGRAFIA
la manipulación de bacterias marinas. http://fernando-amaro.com/densidad-de-palabras-clave/
https://nebulosa.icesi.edu.co:2148/S0717345818300083/1-s2.0-S0717345818300083-main.pdf?_tid=7de51a1b-ebad-4c2e-b241-
54063b94420d&acdnat=1525305508_4327ed4ccb741f844e9627c56919525d
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