Neisseria

Meningitidis
Neisseria meningitidis
 Agente etiológico de enfermedad
neningococica.
 La bacteria N. meningitidis es encapsulada y se
clasifica en serogrupos, según la reactividad
inmunológica del polisacárido de la capsula
 Los serogrupos que causan enfermedad más
comúnmente son A, B, C, Y y W135
 Medidas de precaución
 Elpersonal de laboratorio en riesgo de
exposición a aerosoles de N. meningitidis debe
mantener actualizadas sus vacunas.
 Trabajar en gabinetes de seguridad bilógica.
 Debe considerarse la quimioprofilaxis con
antimicrobianos para aquellos laboratoristas que
manipulan aislamientos de N. meningitidis en una
muestra abierta.
PRUEBAS DIAGNOSTICAS DE LABORATORIO
Muestras
 Sangre (cultivo
 Líquido cefalorraquídeo (frotis)
 Exudado nasofaríngeo
 Punción de petequias
Frotis
 Diplococo gramnegativo carente de
motilidad, de 0,8um.
 Por lo general muestran las neisserias
típicas dentro de los leucocitos
polimorfonucleares
Cultivo
 Medio de cultivo sin  El crecimiento en agar
sulfanato de sangre o chocolate es
polianetol sódico grisáceo, no hemolítico,
(muestras de sangre). redondo, convexo, liso,
 Agar chocolate húmedo, de colonias
(líquido relucientes con bordes
cefalorraquídeo) claramente definidos.
 Incubar a 37ºC en
una atmosfera de 5%
de 𝐶𝑂2 .
 Medio de Thayer-
Martin favorece el
crecimiento de
neisserias.
Prueba de oxidasa de Kovac
 Determina la presencia de citocromo oxidasa.
 El reactivo de oxidasa de Kovac (1%
tetrametil-p-hidroclorofenilendiamina) se torna
en un compuesto purpureo por la presencia
de microorganismos que contienen
citocromo.
Procedimiento
a) Separar la porción de la colonia que deseemos poseer a la
prueba.
b) Frotarla sobre un papel filtro tratado utilizando un asa de
inoculación de platino. No se debe utilizar un asa de Nicromo
porque puede producir reacción falsa positiva.
c) La reacción positiva se vera en solo 10 segundos.

Resultados
• Reacción positiva color purpura
• Reacción negativa ningún color
 Prueba de aglutinación en lamina para la
seroagrupacion de los aislamientos con
sospecha de ser N. meningitidis.

Este método requiere:

o Solución salina fisiológica formalizada
para hacer la suspensión.
o Solución fisiológica no formalizada
(buffer) para mezclar con el antisuero.
 En una lamina de vidrio de 25mm x 75mm, dividir
en tres secciones.
 Tomar una colonia, utilizando un asa de
inoculación.
 Preparar la suspensión medianamente lechosa
en 0,25 ml de solución salina fisiológica
formalizada, mesclar bien.
 Transferir una gota de la suspensión a la lamina.
 Agregar una gota de antisuero A encima de la
gota de suspensión, en la otra sección añadimos
una gota del antisuero W135 y en la tercera
sección añadimos una gota de solución salina .
 Mezclar cada uno de los antisueros con
la gota correspondiente de suspensión
utilizando un palillo.
 Mover suavemente la lamina durante un
minuto
 Solo las reacciones fuertes de
aglutinación (3+ o 4+) se leen como
positivas
Resultados
Utilización de los carbohidratos :
Método de agar cistina tripticasa
 Tomar una pequeña cantidad de crecimiento
de un cultivo, utilizando una aguja de
inoculación.
 Inocular pinchando varias veces los 10 mm
superior del medio. Usar otra aguja estéril, o
flamear la misma aguja, antes de inocular
cada uno de los cuatro carbohidratos que se
van a probar.
 Cerrar bien las tapas de los tubos y ponerlos a
incubar a 35ºC (sin 𝐶𝑂2 ) por 72 horas antes de
descartarlos como negativos.
 Sise genera una turbidez visible y un color
amarrillo en la porción superior del medio, es
indicador de crecimiento y la producción de
acido se interpreta como una prueba positiva.
Prueba de susceptibilidad a los
antimicrobianos de N. meningitidis
 Los cepas de N. meningitidis no muestran resistencia
a muchos agentes antimicrobianos.
 Por lo general, hay un bajo nivel de resistencia a la
penicilina.
 La sensibilidad del meningococo a las sulfonamidas,
la rafampicina y el clorafenicol.