GUEVARA BARRANTES, CINTHIA LORENA

GRUPO 5
LABORATORIO CLÍNICO
 DIAGNÓSTICO DE INFECCIÓN POR VIH
• Personas con ITS
• Personas con pareja que muestran comportamiento de riesgo
• Trabajadores sexuales
• Farmacodependientes
• Pacientes multitransfundidos
• Hijos de madre VIH positivas
• Pacientes con síntomas sugerentes
• Donantes de sangre o de órganos o tejidos.
 LA SEROLOGIA EN LA TRANSMISIÓN MADRE-HIJO
Y EN LA PROFILAXIS POSTEXPOSICIÓN

El papel de la serología en
el diagnóstico del VIH en Se considera positivo:
el recién nacido es
limitado. Tiene resultados positivos en dos
Prueba positiva para momentos diferentes
anticuerpos no es
definitiva. (detectarse los Técnica recomendada: detección de
anticuerpos maternos. ) ácido nucleico o aislamiento viral.
igG
 PROFILAXIS POSTEXPOSICIÓN

En caso de serología
positiva en el recién
nacido, se requiere un
seguimiento serológico Además, se emplea para el seguimiento
de hasta 6 meses para del personal que se ha visto expuesto.
verificar la desaparición
de anticuerpos.
 TECNICAS DISPONIBLES
• En la actualidad existen diversas técnicas para
la cuantificación de la carga viral que tan solo
difieren en sus formatos, tiempos y capacidad
de procesamiento
• Dichas plataformas emplean la PCR a tiempo
real, que consigue altos niveles de sensibilidad
analítica, reproducibilidad y linealidad.
• Todas ellas incorporan métodos
automatizados de extracción de ARN,
reduciendo el tiempo de procesamiento, la
variabilidad y el riesgo de contaminación,
permitiendo además procesar un elevado
número de muestras.
 PRUEBAS DE LABORATORIO
MÉTODOS DIRECTOS MÉTODOS INDIRECTOS
Evidencian / cuantifican la presencia de antígenos en Evidencian la presencia o ausencia de anticuerpos
la muestra totales de la muestra.
PCR cualitativa Son los más ultilizados
PCR cuantificada
Cultivo y aislamiento viral ELISA, WESTERN BLOT , etc
Antigenemia P-24
PRUEBAS LABORATORIALES
• Screening (tamizaje):
-Prueba rápida
-ELISA
• Confirmatorio:
-Western Blot
-IFI inmunofluorescencia indirecta
-LIA inmunoensayo lineal
-RIPA radioinmoprecipitación
• Pruebas complentarias:
-recuento de linfocitos (CD4/CD8) por citometria de
flujo
-carga viral
- PCR en tiempo real
PRUEBAS
RÁPIDAS
 PRUEBAS DE ELISA

• PRIMERA GENERACIÓN: antígenos utilizados

provienen del lisado viral de cultivo
• SEGUNDA GENERACIÓN: los antígenos
corresponde a proteínas recombinantes o
péptidos sintéticos
• TERCERA GENERACIÓN: péptidos
recombinantes sintéticos de VIH -1 , 2
• CUARTA GENERACIÓN: se adicionó p24
Pasos generales:
ELISA : resultado en horas
PRUEBAS RÁPIDAS: en minutos

PERO NO DAN RESULTADOS PRELIMINARES Y NECESITAN

CONFIRMACIÓN
 WESTERN BLOT
• Prueba de confirmación,
• Principio: ensayo inmunoenzimático
• Detectecta anticuerpos contra
proteínas especificas del VIH1
• Interpretación: visual
• Muestras: suero y plasma
• Volumen: 20 microlitros
• Tiempo: 3.5 hrs
• Sensibilidad: 100%
• Especificidad: 100%
 INMUNOFLUORESCENCIA INDIRECTA
Usa material humano de células T
infectadas que expresan antígenos de
VIH-1
Las células se fijan a la superficie de
una laminilla de vidrio, se utilizan
células no infectadas como control.
Cuando los anticuerpos del VIH están
presentes en suero o plasma se unen a
las células infectadas pero no a las
células no infectadas.
 INMUNOENSAYO LINEAL
Incorporan en un soporte plano,
equivalente a la tira de
nitrocelulosa, varias proteínas
recombinantes o péptidos
sintéticos correspondientes a
diferentes proteínas del VIH1 y
en algunos casos del VIH-2
Su sensibilidad es similar al WB
y presenta menos reacciones
cruzadas.
 CAUSAS DE FALSOS POSITIVOS
• Relativas al suero: calidad y manipulación de la muestra.
• Relativas a la presencia de auto anticuerpos: presencia de
enfermedades autoinmunes (AR, LES)
• Relativas a otras condiciones: vacunaciones , enf. Virales, I.Renal,
cirrosis , enfermedades hemato-oncológicas, alcoholismo, embarazo,
etc.
 INFORME DE RESULTADOS

Los resultados de las pruebas

de cribado deben expresarse
de forma clara y precisa para
evitar situaciones diagnósticas
confusas y de ansiedad
innecesaria en el paciente.
Se informará con claridad
si el suero es positivo para
VIH-1 y/o para el VIH-2.
 CRITERIOS PARA LA
INTERPRETACIÓN DEL RESULTADO

Los inmunoensayos de hoy en día

tienen un 99% de sensibilidad.
Sin embargo no hay que olvidar
la importancia de los valores
predictivos positivo (VPP) y
negativo (VPN), que están
condicionados por la prevalencia
de la infección por el VIH entre la
población estudiada.
A menor prevalencia, el
VPP disminuye y mayor
es la probabilidad de que
se produzcan falsos
positivos.
DEL VIH

DETERMINACIÓN DE CARGA VIRAL

PLASMÁTICA (CVP) DEL VIH

La carga viral del VIH o viremia plasmática

representa la CANTIDAD DE VIRUS PRESENTE
EN PLASMA y se expresa como NÚMERO DE
COPIAS DE ARN POR MILILITRO O EN LOG10.
Su determinación, junto con el recuento de
linfocitos CD4, son los parámetros que se
utilizan en la monitorización del tratamiento
antirretroviral y para tomar decisiones
respecto a cambio del mismo.