ENZIMAS

SON CATALIZADORES BIOLOGICOS

que facilitan o aceleran una reacción
 ENZIMAS
• Las enzimas son catalizadores biológicos, es decir es un agente capaz de
acelerar una reacción química, sin formar parte de los productos finales ni
desgastarse en el proceso.
• Como todo catalizador, las enzimas actúan disminuyendo la energía de
activación de una reacción.
• Las enzimas muestran mayor especificidad, esto le permite distinguir con
gran selectividad entre diferentes sustancias y aun entre isómeros ópticos.
Ejemplo la glucoquinasa, enzima que cataliza una reacción de fosforilacion
de D-glucosa, no actúa frente a L-glucosa.
• Algunas enzimas actúan sobre sustancias distintas, pero en general se trata
de compuestos homólogos y la reacción cataliza es siempre del mismo tipo.
NOMENCLATURA Y CLASIFICACION DE LAS
ENZIMAS
• Suelen designarse agregando el sufijo “ASA” al nombre del sustrato
sobre el cual actúan. Por ejemplo amilasa, ureasa y tirosinasa son
enzimas que catalizan reacciones con almidón, urea y tirosina
respectivamente.
• También se denominan las enzimas según el tipo de reacción
catalizada por ejemplo deshidrogenasa y descarboxilasa catalizan la
sustracción de hidrógenos y carboxilo del sustrato respectivamente.
• 1 Oxirreductasas: Reacciones de oxidación-reducción.
• 2 Transferasas: Trasferencia de un grupo funcional.
• 3 Hidrolasas: Ruptura de una molécula mediante adicción de agua.
• 4 Liasas: Ruptura no hidrolitica de enlace.
• 5 Isomerasas: transformación en su isómero.
• 6 Ligasas: formación de enlace requiere energía ATP.
LOS 6 GRANDES GRUPOS DE LA
CLASIFICACION INTERNACIONAL SON:
• 1- Oxidorreductasa: catalizan reacciones de oxido reducción. Están
asociadas a coenzimas. Cuando el sustrato es donante de hidrogeno,
las enzimas son designadas con el nombre del sustrato antepuesto a
deshidrogenasa, cuando la reacción se indica en el sentido inverso, al
nombre del sustrato se agrega reductasa.
• Se denominan oxidasa las enzimas que catalizan reacciones en las
cuales el aceptor de hidrogeno es el O2 y el de oxigenasa solo cuando
la molécula de O2 es incorporada el sustrato. Ejemplo la lactato
deshidrogenasa: que catalizan la oxidación de lactato a piruvato y
también la reacción inversa. Utiliza NAD como coenzima.
• Lactato + NAD= piruvato + NAD + H. (L lactato: NAD oxidorreductasa)
• 2- Transferasas: Catalizan la transferencia de un grupo de átomos
como: aminas, carboxilo, carbonilo, metilo, acilo, glicosilo, fosforilo
desde un sustrato considerado donante, a otro compuesto aceptor.
Ejemplo: aminotransferasas o transaminasas, que catalizan la cesión
del grupo amina de un compuesto a otro.
• L-aspartato + 2 oxoglutarato= oxaloacetato + L-glutamato.
• L-aspartato: 2-oxoglutarato aminotransferasa.
• Aspartato o aminotransferasa (nombre trivial)
• 3- Hidrolasas: Catalizan las rupturas de enlaces C-O, C-N, C-S y O-P por
adición de agua . El nombre recomendado se forma con el del sustrato y el
sufijo ‘’ASA”. Pertenecen a este grupo acetilcolinesterasa y ribonucleasa.
Ejemplo: la arginasa que cataliza la hidrolisis de arginina para formar urea.
• 4- Liasas: catalizan la rupturas de uniones C-C, C-S y C-N (Excluyendo
uniones peptídicas) de las moléculas del sustrato, por procesos distinto al
de hidrolisis.
• 5-Isomerasas: interconvierten isómeros de cualquier tipo, ópticos,
geométricos o de posición.
• 6- Ligasas: reacciones en las que se unen dos moleculas formación de
enlace covalentes utilizando ATP u otro nucleótido como fuente de energía.
 METALOENZIMA
• En algunas enzimas, la presencia de iones metálicos como: Fe, Cu,
Zn,Mg, Mn, Se, Ca es indispensable para la acción catalítica. Los iones
metálicos contribuyen al proceso catalítico por su capacidad para
atraer o donar electrones.
 CATALISIS ENZIMATICAS
• Las enzimas aumentan la velocidad de reacción disminuyendo la
energía de activación. De esta manera mayor numero de moléculas
alcanzan el estado intermediario o de transición, y la transformación
química se acelera.
• Durante el curso de la reacción, la enzima se une efectivamente al o a
los sustrato-s, formando un complejo transitorio. La enzima aparece
inalterada al final de la catálisis.
• Si una enzima E cataliza la transformación del sustrato S en producto
P, primero se unen enzima y sustrato para formar el complejo ES el
cual luego se disocia en encima y producto: E+S= ES E+P
REACCION ENZIMATICA
 SITIO ACTIVO
• Para formar el complejo ES, el sustrato se fija a un lugar definido de la
enzima. Esta región de la molécula a recibido las denominaciones de
sitio activo, centro activo, sitio catalítico o lugar de sustrato y es
donde se cumple la acción catalítica.
• El sitio activo es una agrupación de un numero no muy grande de
aminoacidos, distribuidos espacialmente de manera precisa.
• La unión del sustrato a la enzima comprende la formación de enlaces
no covalentes, tales como: puentes de hidrogeno, enlaces iónicos,
interacciones hidrofobicas y de Van Der Waals.
SUSTRATO+ENCIMA= ES
 ZIMOGENOS

O Proenzima es un precursor enzimatico inactivo, es decir no catalizan

ninguna reacción como lo hacen las enzimas. Para activarse necesita de un
cambio bioquímico en su estructura que le lleve a conformar un centro
activo donde pueda realizar su catálisis.
Son diversos procesos biológicos son regulados por ruptura proteolíticas
como en la digestión y coagulación sanguínea.Ej:
Enzima activa Forma de zimógeno Lugar de síntesis
Quimiotripsina quimotripsinogeno páncreas
Pepsina pepsinogeno estomago
Tripsina tripsinogeno páncreas
Carboxipeptidasa procarboxipeptisa páncreas
PRECURSORAS DE ENZIMAS PROTEOLITICAS QUE
INTERVIENEN EN PROCESO DE COAGULACION
ENZIMAS ANORMALES, POR ALTERACIONES
GENETICAS.
• Es muy importante la estructura molecular para el correcto
funcionamiento de las enzimas, toda alteración de la secuencia de
aminoacidos que afecte restos esenciales , ya sea en el sitio activo o
en posiciones criticas para el mantenimiento de su conformación ,
puede alterar su actividad.
• Es la causa de gran numero de enfermedades genéticas, conocidas
con el nombre de ERRORES CONGENITOS DE METABOLISMO.
• Fenilcetonuria,Albinismo,Porfirina
DISTRIBUCION INTRACELULAR DE ENZIMAS
• Las enzimas son sintetizadas en el citoplasma de las celulas y luego exportadas
hacia el lugar en el cual han de cumplir su misión
• Existen enzimas que actúan fuera de la célula que la produce , como las de los
jugos digestivos y las relacionadas con la coagulación de la sangre.
• Las enzimas pueden encontrarse libres en el citosol , incluidas en organelas
subcelulares o integradas en estructura de membranas .
• A)enzimas asociadas al núcleo participan en el mantenimiento y función de
aparato genético.
• B) mitocondrias: enzimas relacionadas a reacciones oxidativas proveedoras de
energías.
• C)Lisosomas :función de degradar moléculas con pH optimo el acido.
• D)ribosomas : síntesis de proteínas.
 SISTEMAS MULTIENZIMATICOS
• En muchos casos , las enzimas ,forman complejos organizados
constituidos por varias enzimas diferentes , cuyas acciones se
complementan.
• Ellos son SISTEMAS MULTIENZIMATICOS ordenados de tal modo
(membranas), que el producto de la reacción catalizada por la
primera enzima es recibido como sustrato por la segunda y así
sucesivamente
• También existen enzimas MULTIFUNCIONALES por que presentan
varios sitios catalíticos distintos en una misma cadena polipeptídica
ejemplo: ac. Graso SINTETASA.
 FACTORES QUE MODIFICAN LA ACTIVIDAD
ENZIMATICA.
• A) concentración de la enzima.
• B) concentración de sustrato
• C)temperatura.
• D)pH
A – Concentración de Enzimas
• Cuando se determina la velocidad inicial de una reacción catalizada
por una enzima a distintas concentraciones de estas, en presencia de
cantidades saturantes de sustrato y manteniendo constante, todos los
otros factores en el medio de reacción, se puede establecer la
reacción entre cantidad de enzima y velocidad ( equivalente a
actividad enzimática). Esto indica que la velocidad es directamente
proporcional a la concentración de encima.
A – Concentración de Enzimas
B – Concentración de Sustrato
• Si se determinaciones de actividad enzimática manteniendo constante
concentración de enzimas y las otras condiciones de la reacción, excepto
concentración de sustrato y se representan los resultados en un sistema de
coordenadas se obtiene una curva de tipo hiperbólico. Al comienzo la
actividad aumenta rápidamente con el incremento de concentración de
sustrato, pero a niveles mas elevados de esta la velocidad crece mas
lentamente y tiende a alcanzar un máximo.
• Cuando la concentración de sustrato es baja, la actividad crece en forma
lineal con la concentración de sustrato, pues existe proporcionalidad de
reacción y concentración de sustrato. A medida que aumenta esta, los
incrementos de velocidad son cada vez menores y se llega a una situación
en la cual la actividad no aumenta por mas que se eleve la concentración
de sustrato.
B- Concentración de Sustrato
B - Concentración de Sustrato
• En 1913 Michaelis y Menten derivaron de dicha curva importantes
conclusiones:
• El proceso se indica en la ecuación: E+S= ES= E+p
• A concentraciones muy bajas de sustrato, gran parte de las moléculas de
enzimas se encuentran libre. Cuando aumenta el sustrato, mayor números
de moléculas de enzimas va siendo ocupados para formar ES. Si sigue
creciendo concentración de enzimas, llega un momento en el cual
prácticamente todas las moléculas de encimas están ocupadas por
sustrato, la encima se a saturado con sustrato. Si el aumento de {S}
continua y excede largamente a la de enzima, se alcanza un estado
estacionario en cual la velocidad de reacción no varia. Todo aumento
ulterior de sustrato ya no puede producir incremento en la velocidad de
reacción, esta se comporta como de orden cero.
C - Temperatura
• Como consecuencia del incremento en energía cinética, la velocidad
de una reacción química aumenta cuando la temperatura asciende. La
actividad enzimática aumenta con la temperatura, se llega a un valor
máximo correspondiente a la temperatura optima. Por encima de ese
optimo la actividad cae rápidamente. En gran mayoría la temperatura
optima esta alrededor de 37ºC. Alrededor de los 60ºC las enzimas son
inactivadas completamente.
C - Temperatura
D – pH
• Si se mide actividad enzimática a diferentes pH, manteniendo
constante todos los otros factores se puede demostrar el efecto de la
concentración de hidrogeniones. Para la mayoría de las enzimas la
actividad optima se encuentra entre pH 6 y 8. Por debajo o encima de
esos valores, la velocidad de reacción cae mas o menos rápidamente.
Dicha regla posee algunas excepciones. Por ejemplo la fosfatasa
alcalina de hueso y otros órganos alcanza máxima actividad a pH 9,5.
D - pH
 Inhibidores Enzimáticos
• Existen agentes químicos que inhiben la acción catalítica de enzimas.
algunos de ellos ejercen su acción uniéndose a sitios o grupos
funcionales esenciales de la molécula de enzima.
• La inhibición puede ser : a) reversible
b) irreversible.
 a) INHIBIDORES REVERSIBLES
• Existen tres tipos de inhibidores reversibles :
1. Competitivas: se alcanzan por diferentes mecanismos:
a) en algunos casos , el inhibidor presenta similitud estructural con el sustrato y ambos compiten
por el sitio activo de la enzima.
b) algunas moléculas se unen al sitio activo de la enzima a pesar de no poseer similitud estructural
con el sustrato.
C) en otros casos inhibidor y sustrato se fijan a diferentes sitios de la enzima ,pero la unión de uno
de ellos impide la del otro ,probablemente porque induce cambios conformacionales.
Los inhibidores competitivos tienen aplicación farmacológica. Muchos microorganismos patógenos
sintetizan ac . Fólico , factor esencial para su desarrollo , a partir de acido para – aminobenzoico
(PABA). La sulfanilamida , un análogo estructural del PABA ,bloquea la síntesis de ac. Fólico por este
método. La deficiencia de ac. Fólico resultante es fatal para la bacteria.
2. No competitiva
 b) INHIBIDORES IRREVERSIBLES.
• Producen cambios permanentes en la molécula de enzima , con
deterioro definitivo de su capacidad catalítica. eje: los venenos
órganos fosforados ,utilizados como insecticidas. Producen inhibición
irreversible de acetilcolinesterasa , enzima muy importante en
sistema nervioso.
• Están también los llamados “inhibidores suicidas” son sustancias que
por su semejanza estructural con el sustrato , pueden ocupar el sitio
activo y ser transformado por la enzima en productos. Estos forman
uniones covalentes con las enzimas y bloquean irreversiblemente el
sitio activo , eje: el alopurinol ,inhibidor de xantina oxidasa ,utilizada
en el tratamiento de la gota.
 REGULACION DE LA ACTIVIDAD ENZIMATICA
• La actividad es ajustada a los requerimientos fisiológicos por diversos
mecanismos . La concentración de sustrato en las celulas esta por debajo
de la Km, en esos niveles , los cambios en [s] modifican la actividad .
Comúnmente la enzima de la 1ra etapa de una vía metabólica es
regulatoria.
• De acuerdo con el tipo de señal a la cual responde las enzimas reguladores
pueden distinguirse en: alostericas y reguladas por modificación covalente.
• Alosterica son moduladas por agentes que se unen a ellas en un lugar
distinto al sitio activo. Son oligomericas. La grafica de velocidad inicial en
función de [s] para enzimas alostericas es sigmoides, no hiperbólica.
• Modificación covalente enzimas reguladas por adición o sustracción de
grupos unidos covalentemente. Ejemplo: la glucógeno fosforilasa, enzima
que inicia la vía de degradación del glucógeno.
 Especificidad Enzimática
• Las enzimas son especificas. Muchas de ellas catalizan solamente una
reacción química, mientras que otras, no tan específicas, tienen una
acción bastante selectiva para atacar a cierto tipo de configuración o
de enlace: las lipasas desdoblan las grasas, las enzimas proteolíticas
hidrolizan las proteínas. De este modo, su acción se limita a cierto
tipo de sustancias.
• Algunas enzimas son completamente específicas; p.ej., la dipeptidasa,
que no desdobla ningún dipeptido si no está libre en el grupo amino o
carboxilo.
• La especificidad es una característica de mayor relevancia en las
enzimas y es determinante en la regulación del mecanismo celular.
 Función de las Enzimas

• Aumentan la velocidad de las reacciónes químicas sin ser consumidas

permanentemente por la reacción.

• Favorecen en la absorción de nutrientes

• Sirve como efecto anti- inflamatorio.

 Importancia en el lab
• En el laboratorio es mucho más práctico medir la actividad de una proteína
de éstas que medir su cantidad en el suero.
• Revela mucho mejor la presencia y el accionar de esta. Por este motivo la
medición de la actividad enzimática constituye un poderoso método para
diagnosticar algunas patologías, pero también sirve para evaluar el proceso
en una enfermedad.
• Esta área tan importante en el laboratorio se denomina
enzimología clínica.
• Por ejemplo es importante saber si una hepatitis está respondiendo al
tratamiento y por supuesto esperamos que los valores vayan bajando
durante dicho tratamiento. También sirve para evaluar tumores hepáticos o
cirrosis como en el alcoholismo que se mide la GGT del hígado.
 Lista de las enzimas cuyo estudio se ha mostrado mas util en el diagnostico y monitoreo de
enfermedades:

ENZIMAS ENFERMEDADES
Alanina aminotransferasa (ALT) Enfermedades hepaticas y
cardiacas
Aldolasa Enfermedades musculares
Amilasa Enfermedades pancreaticas
Aspartato aminotransferasa (AST) Enfermedades hepaticas y
cardiacas
Colinestarasa Intoxicacion organofosforada aguda
(pseudocolinestarasa)
Creatin Kinasa (CK o CPK) Enfermedades cardiacas y
musculares
Enzima Convertidora de Sarcoidosis
Angiotensina
Fosfatasa acida Enfermedades prostaticas
 Lista de las enzimas cuyo estudio se ha mostrado mas util en el diagnostico y monitoreo de
enfermedades:

Fosfatasa alcalina Enfermedades hepaticas y oseas

Gamma-Glutamyltransferase Enfermedades hepaticas,
(GGT) monitoreo de reabilitacion
alcoholica
Lactato Deshidrogenasa (LDH) Enfermedades hepaticas, cardiacas
y danho cerebral
Lipasa Pancreatitis
Lisozima Algunas leucemias agudas