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TLC

(Thin Layer Chromatography)


Cromatografia en capa Fina

• Ramos Mendoza Aldair Jesus


• Pineda Urquiza Melissa Mercedes
• De los Santos JeanClaude

ECOTOXICOLOGÍA- VI CICLO
TÉCNICA DE CCF
• 1. Preparación del material
Se disuelve la muestra para dejarlo en estado líquido y se prepara un tubo
capilar. Se prepara al mismo tiempo una placa de celulosa o gel de sílice
absorbente y se dibuja una línea de base a un par de centímetros del borde
inferior
TÉCNICA DE CCF
2. Aplicación de la muestra
Con el tubo capilar y usando la línea base, se aplica una gota de muestra en la placa de
celulosa o gel de sílice, procurando que se extienda lo menos posible y que no dañe la
capa. A continuación se deja secar .
3. Elución
La muestra se introduce en una cubeta de vidrio con un disolvente, eluyente, esta será
la fase móvil. Se espera que el disolvente asciende por capilaridad hasta unos 2-3cm de
la parte superior, este arrastra la muestra a su paso separando sus componentes.
TÉCNICA DE CCF
4. Separación
Las distintas moléculas tienen distintas masas por lo que se mueven a
velocidades diferentes y alcanzas alturas diferentes sobre la placa, creando un
patrón. Existen patrones estándares para casi todas las sustancias habituales.
5. Secado y análisis
Se saca la placa de la cubeta y se marca la altura a la que ha llegado el disolvente,
se deja secar la placa y se mide la distancia recorrida por los componentes de la
muestra comparándola con los patrones establecidos.
EFLUENTES Y ADSOBENTES MÁS
COMUNES
• Efluentes • Adsorbentes
Éter de petróleo Silica gel (se utiliza en el 80% de las
separaciones)
n-hexano
Óxido de Aluminio ó Alúmina (ácida,
ciclohexano
neutra ó básica)
Cloruro de metileno
Tierra Silícea ó Kieselguhr
Acetato de etilo
Celulosa (Nativa o micro-cristalina)
Acetona
• bentes
EJEMPLO DE APLICACIÓN
CAMPOS DE APLICACIÓN
• Industria farmacéutica.
Separación y cuantificación de ingredientes.
• Industria de alimentos.
Cuantificación de edulcorantes, preservantes y vitaminas.
• Materias primas.
Cuantificación de pureza.
• Otras aplicaciones.
Separación de componentes en muestras botánicas, de productos naturales y bioquímicos.
CONCLUSIONES
• El tipo de cromatografía dependerá de la naturaleza de la fase móvil y
estacionaria
• La polaridad del eluyente determinará la efectividad de este como disolvente
en la CCF
• Este método nos ayuda en la separación de las moléculas, siendo de un costo
bajo y confiable.