Daño tisular y celular, Apoptosis, Necrosis 1.-Describa el mecanismo de Necrosis mediado por estrés oxidativo. 2.- Describa el mecanismo de Necrosis mediado hipoxia. 3.- ¿Qué son las calpaínas?, ¿Cómo se activan? 4.- ¿Qué son las caspasas? ¿Cómo se activan? 5.- ¿Qué podría suceder si no operara eficientemente p53? 53 es una proteína supresora de tumores.1 En la especie humana, el gen p53 o TP53, también llamado el "guardián del genoma", se encuentra en el brazo corto del cromosoma 17 (17p13) y codifica un factor de transcripción nuclear de 43.7 KDa. Su nombre hace referencia a su masa molecular aparente: corre como una proteína de 53 KDa en un SDS-PAGE (sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis, o, en castellano, electroforesis en gel de poliacrilamida con sodio dodecil sulfato ) . Esta diferencia se debe a la gran cantidad de residuos de prolina que contiene p53, lo que la hace migrar más lentamente en un SDS-PAGE, haciendo que parezca más pesada de lo que realmente es. Resulta esencial para inducir la respuesta de la célula ante el daño del ADN, deteniendo el ciclo celular en caso de mutación. El gen p53 es un gen supresor tumoral que desempeña un papel importante en apoptosis y control del ciclo celular. Un p53 defectuoso podría permitir que las células anormales proliferen dando por resultado cáncer (alrededor de un 50 % de todos los tumores humanos contienen mutaciones en p53).2 p53 pertenece a una familia de factores de transcripción, a la cual pertenecen también p63 y p73. Estas tres proteínas colaboran en una compleja red de interacciones que aún no se conoce en su totalidad. Sin embargo, p53 es ubicuo (se expresa en todos los tejidos), mientras que p63 y p73 presentan especificidad tisular. Además, parece que todos ellos presentan isoformas, algunas de las cuales funcionan como activadoras, mientras que otras funcionan como negativas dominantes. 6.- Compare la necrosis con la apoptosis 7.-Fundamente por qué podría estar alto el lactato plasmático. 8.- ¿Cuáles son las consecuencias de la acidosis? 9.- Identifique las vías metabólicas que puede seguir la G6P. 10.- ¿Qué podría suceder si no operara eficientemente la enzima G6PDH? 11.- ¿Cómo podría seguir la evolución de: (a) un daño renal, (b) un IAM, (c) una poli contusión muscular y (d) un AVE: Accidente Vascular Encefálico? 12.- Explique cómo se expresan los genes. 13.- Fundamente por qué el CN- (cianuro) es tan tóxico. 14.- Dibuje y explique la curva que relaciona cantidad de enzima con actividad enzimática. 15.-Diferencie la apoptosis extrínseca de la intrínseca. • La vía extrínseca del receptor de muerte, como su nombre lo indica, comienza cuando los ligandos de muerte se unen a un receptor de muerte. Aunque se han descripto varios receptores de muerte, los más conocidos receptores de muerte son el receptor de TNF tipo 1 (TNFR1), y una proteína relacionada llamada Fas (CD95) y sus ligandos, TNF y Fas ligando (FasL), respectivamente. Estos receptores de muerte tienen un dominio de muerte intracelular que recluta a proteínas adaptadoras tales como el dominio de muerte asociado al receptor TNF (TRADD) y al dominio de muerte asociado a Fas (FADD), así como a cisteína-proteasas como las caspasas. La unión de un ligando de muerte a un receptor de muerte, resulta en la formación de un sitio de unión para una proteína adaptadora y el complejo completo de ligando-receptor-adaptador se conoce como DISC (complejo de señalización que induce muerte). El DISC entonces, inicia el ensamblaje y activación de la pro-caspasa 8. La forma activada de la enzima, la caspasa 8, es una caspasa iniciadora, que inicia la apoptosis clivando otras caspasas ejecutoras o de río abajo. • Como su nombre lo indica, la vía intrínseca se inicia dentro de la célula. Los estímulos internos, tales como un daño genético irreparable, la hipoxia, concentraciones extremadamente altas de calcio citosólico y un stress oxidativo severo, son todos disparadores de la iniciación de la vía mitocondrial intrínseca. Independientemente del estímulo, esta vía es el resultado de una permeabilidad mitocondrial aumentada y de la liberación de moléculas proapoptóticas tales como la citocromo-c hacia el citoplasma. Esta vía está estrechamente regulada por un grupo de proteínas que pertenecen a la familia Bcl-2. Hay dos grupos principales de proteínas Bcl-2, específicamente las proteínas pro-apoptóticas (Bax, Bak, Bad, Bcl-Xs, Bid, Bik, Bim y Hrk) y las anti-apoptóticas (Bcl- 2, Bcl-XL, Bcl-W, Bfl-1 y Mcl-1) En tanto las proteínas anti-apoptóticas frenan la apoptosis bloqueando la liberación mitocondrial de citocromo-c, las proteínas pro-apoptóticas actúan promovieron la liberación de citocromo-c desde la mitocondria hacia el citoplasma. No es la cantidad absoluta, sino el balance entre las proteínas pro- y anti-apoptóticas lo que determina si se va a iniciar o no la apoptosis. Otros factores apoptóticos que se liberan desde el espacio intermembranoso mitocondrial hacia el citoplasma incluyen al factor inductor de apoptosis (AIF), al segundo activador de caspasa derivado de mitocondria (Smarc), a la proteína de unión al IAP directo con bajo ph (DIABLO) y la proteína A de requerimiento de alta temperatura /Omi (HtrA2). La liberación citoplasmática de citocromo-c activa a la caspasa 3 por medio de la formación de complejo conocido como apoptosoma, que está conformado de citocromo-c, Apaf-1 y caspasa 9. Por otro lado, el Smac/DIABLO o la Omi/HtrA2, promueven la activación de la caspasa uniéndose al inhibidor de las proteínas de apoptosis (IAPs) que posteriormente lleva a la disrupción en la interacción de los IAPs con la caspasa 3 o 9. 16.- Dibuje un macrófago, un LT CD4, un LT CD8 y un LB, en donde se evidencien sus proteínas de membranas más características (al menos sus receptores). 17.- ¿En qué consiste el sistema del complemento? 18.- ¿Cómo se activa el sistema del complemento? 19.- ¿Cómo opera el sistema del complemento? (hay 3 formas de operar) 20.- Identifique cuáles son las Igs (inmunoglobulinas), y ¿cuál es su significado biológico? 21.- Diferencie estructuralmente las bacterias Gram (+) y (-). 22.- ¿Cómo operan los LT CD8? 23.- ¿Cómo operan los LT CD4? 24.- ¿Cómo operan los virus? 25.- ¿Qué significa que el sistema inmune linfocitario sea probabilístico? 26.- ¿Cómo operan los LB? 27.- ¿Qué es una CPA (célula presentadora de Antígeno? 28.- ¿Qué es un antígeno? 29.- ¿Qué es la quimiotaxis? 30.- ¿Qué significa que ciertos receptores son polimórficos? 31.- ¿Qué es el MHC-1? 32.- ¿Quién (qué) reconoce al MHC-1? 33.- ¿Qué implica cortisol plasmático alto en el contexto inmunológico? 34.- Explique las consecuencias de la ecuación 35.- Explique las consecuencias de una disminución de la producción de Albúmina. 36.- Explique en qué consiste la opsonización. 37.- Explique las consecuencias del Fabismo? 38.- Explique las consecuencias de la inhibición de la enzima citP450? 39.- ¿Cómo podría gatillarse la Rabdomiolisis? ¿Qué consecuencias trae (explique)? 40.- ¿Qué consecuencias trae recibir una transfusión sanguínea de un grupo incompatible? 41.- Explique el mecanismo de hemólisis intra-vascular y sus consecuencias cuando se recibe un grupo sanguíneo incompatible.