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Mg.

Robert Caballero Bardales


Tecnólogo Medico. Docente
Capacitación del Personal

“Proceso continuo y sistemático destinado a la formación,


entrenamiento, actualización o perfeccionamiento específico del
personal”

FORMACIÓN ENTRENAMIENTO

 Incorporación de conocimientos
 Enseñar las habilidades.
Generales y específicos.
 Carácter eminentemente
 Formación académica del
práctico
personal
Requisitos en la Formación del Personal

 Se debe realizar un estudio de las necesidades


de capacitación y entrenamiento

 Planificación

 La formación permanente de su personal

 La formación a ser adquirida deberá orientarse a


garantizar la competencia en las técnicas y
métodos realizados por el personal involucrado en
el ensayo.

 El laboratorio debe asegurar …


Capacitación del Personal en el
Laboratorio de Microbiología

Todo el personal técnico debe recibir un


adecuado entrenamiento que incluyen:

 Técnicas básicas de microbiología para la


manipulación de cultivos y muestras en
Condiciones de esterilidad

 Adecuado Criterio para el manejo


Potencialmente Infeccioso

 Conocimiento de normas de bioseguridad


Registros

El laboratorio debe elaborar, conservar


y actualizar registros:

 De la autorización del personal

 Curriculum vitae

 Capacitación en la realización de la tarea


asignada.

 Relativos a la competencia del personal.


Documentación de los Procedimientos

 Registro de los cultivos en


existencia
 Potencia y sensibilidad de los
discos
 Registro de la comprobación de
los medios
 Controles de tinción
 Controles positivos y negativos
 Los autoclaves deben
comprobarse por registros de
temperatura o termógrafos “Se hace lo que se escribe
y se escribe lo que se hace”
Control de calidad de equipos
Todo equipo debe
ser evaluado por
un programa de
control de calidad
en base a las
instrucciones del
proveedor y las
regulaciones
internas del
laboratorio.
Control de calidad de equipos
Incubadoras
• Controlar diariamente la
temperatura.
• Observar el termorregulador.
• Colocar las muestras, platos y
tubos en una posición segura.
• Limpieza mensual y llevar un
record de mantenimiento
preventivo.
Control de calidad de equipos
Autoclaves
Procedimiento por corrida diario, semanal, mensual
• Examine record de temperatura y precisión.
• Utilice indicadores de esterilización.
• Chequeo del nivel del agua.
• Limpieza interior y exterior.
• Limpieza de la pantalla de temperatura.
Control de calidad de equipos

Cámaras de seguridad
• Apague la lámpara ultravioleta antes de empezar a
trabajar.
• Observe que no se obstruye el flujo de aire.
• Compruebe los sistemas de alarma de
funcionamiento.
• Desinfecte la cabina antes y después de utilizar.
Control de calidad de equipos

Incinerador
• Temperatura optima de esterilización (815°c)
• Bastan 5 seg para lograr la destrucción de bacterias, hongos
y mico bacterias.
• Inspeccione la cerámica del incinerador por rajaduras.
• Aleje el incinerador de elementos que puedan incendiarse
por el calor generado.
Control de calidad de equipos

Generadores de ambiente- sistema Gas Pak


• Mantenga los generadores de gas a T.A y sobre sellado
• Mantenga indicadores de anaerobiosis a temperatura de (2-
8°C)
• El tiempo de generación de la atmosfera dentro de la jarra es
de 30 min.
• Una evidencia sugestiva de ambiente anaerobio, es el cambio
de color de rojo vino del agar sangre.
Control de calidad de equipos

Refrigeradoras
• Control diario de la temperatura entre 4-8°C.
• Utilice refrigeradores que no hacen escarcha.
• No coloque medios de cultivos aun ligeramente calientes
dentro de la refrigeradora.
• Evite abrir con frecuencia la puerta de la refrigeradora.
• No guarde alimentos en refrigeradoras para especímenes
clínicos.
Control de calidad de equipos

Microscopios
• Limpieza del aceite de objetivos, condensador, etc.
• Apagar la fuente de luz.
• Colocar cobertor contra polvo.
• Limpieza de ocular, diafragma con liquido de limpieza
de lentes.
• Limpieza y ajuste del sistema óptico.
• Limpieza y lubricación del sistema mecánico.
Control de calidad de reactivos

Los reactivos son fundamentales para la


caracterización de microorganismos

Colorantes Antisueros

Discos
impregnados
Control de calidad de reactivos

Colorantes

El control de calidad cada lote preparado.

semanal para mantener


la seguridad
Control de calidad de reactivos
CXT
MER AMC
Discos impregnados COL
PTZ CAZ
IMP

Pruebas de para microorganismos de


Sensibilidad rápido crecimiento.

(NCCLS M2-A6) evalúa multiresistencia,


escogencia y valoración
de un antibiótico.
Control de calidad de reactivos
Antisueros
son considerados exámenes bacteriológicos y no test
serológicos.

• Para uso exclusivo de cepas in vitro.


• Conservar los reactivos en refrigeración.
• Colocar la fecha en que se abre el kits.
• Nunca pipetear con la boca muestras o reactivos.
• Dejar los reactivos a T.A antes de utilizarlos.
Mantenimiento de medios de cultivos
almacenados

Las cepas deben almacenarse de forma adecuada para preservar


sus características morfológicas y fisiológicas conocidas.
Para el almacenamiento a largo plazo se debe:
 almacenar en un medio estabilizador apropiado, como caldo de
soya tripticasa con 10 – 15% de glicerol o sangre de cordero
desfibrinada.
Almacenarlas liofilizadas (congelación seca).
Obtenga caldos de cultivos liofilizados comercial
Para trabajar una o mas veces al mes:
Subcultive el caldo de cultivo permanente (congelado o liofilizado)
a medios sólidos en placa.
Subcultive 4 – 5 colonias aisladas de medios en placa a un tubo
con agar inclinado e incube durante la noche para preparar caldo de
cultivo listo para trabajar.
Mantenimiento de medios de cultivos
almacenados

 Almacenar las cepas no fastidiosas en tubos


picos de flauta con agar tripticasa de soya
inclinado.
Dos días antes de las pruebas de CC:
Subcultive el crecimiento del agar inclinado a
medios en placa e incube durante la noche.
Seleccione 4 – 5 colonias aisladas de la placa
para la prueba de CC y pruebe con el mismo
método utilizado para los aislamientos de
pacientes.
Pruebas de sensibilidad antimicrobiana
NCCLS: El Instituto para la normatización de Laboratorios Clínicos
anteriormente conocido como El Comité Nacional para la
Normatización de Laboratorios Clínicos

(NCCLS) es una organización sin fines de lucro, con miembros


representando a varias disciplinas. Es una organización educativa
que enseña a través de foros el desarrollo, promoción y uso de
normas nacionales e internacionales relacionadas con las pruebas de
susceptibilidad, su uso apropiado y la interpretación de los
resultados.

ATCC: también conocida como American Type Culture Collection.


Suministra cepas certificadas como: S.aureus, E. coli y
Pseudomonas sp
Pruebas de
Pruebas de sensibilidad
sensibilidad antimicrobiana
antimicrobiana

• Prueba de difusión en disco: El método del disco esta bien


normalizado y es capaz de producir resultados fiables.
• El proceso que se recomienda corrientemente es aplicable a
las pruebas con la mayoría de patógenos comunes de
crecimiento rápido, como: enterobacterias, S. aureus y
Pseudomonas sp.
• los estudios aun no están adecuados para desarrollar patrones
de zonas fiables para la interpretación de pruebas de disco con
microorganismos que:
1. Son exigentes en sus requerimientos nutricionales.
2. Necesitan de una atmósfera anaeróbica o una concentración
ce CO2 incrementada para crecer.
3. Crecen a una velocidad lenta en agar Mueller – Hinton.
4. Los que manifiestan una marcada variación en la velocidad de
crecimiento cepa a cepa
Pruebas de sensibilidad antimicrobiana

• Para controlar la técnica de difusión en disco, los tres microorganismos


control designados S. aureus , E.coli y P. aeruginosa deben emplearse
cada día que se realice un ensayo.
•La precisión y exactitud de este proceso analítico puede determinarse
por métodos estadísticos patrones ; es decir, que el 95% de las zonas
deben estar dentro de 2SD por encima o por debajo de la media cada
agente antimicrobiano.
•Se debe controlar la densidad del inóculo.
•Verificar que los discos no estén deteriorados.
•Controlar el pH de los medios.
•La desviación típica máxima es la diferencia entre el tamaño de la zona
minima para cepas susceptibles y el tamaño de la zona máxima para
cepas resistentes.
Pruebas de sensibilidad antimicrobiana

Fuentes de errores técnicos:


• preparación inadecuada del agar Muller – Hinton
•Introducción de un nuevo lote de agar sin probarlo.
•Almacenamiento inadecuado de los discos.
•Normalización inadecuada de la densidad de caldo de cultivo.
•Preparación inexacta o almacenamiento de patrones de referencia
turbios.
•Fallo al exprimir el liquido sobrante de la torunda.
•Incubación a temperatura distinta de 35 ºc
•Lectura prematura de las placas
•Fallo al medir los bordes de la zona.
•Errores de transcripción
Empleo de laboratorio de referencia

Incluso los laboratorios clínicos


más sofisticados, ocasionalmente
encuentran un aislamiento microbiano que
no pueden identificar. Deben establecer
algunas disposiciones para que un
laboratorio de referencia (tal como
laboratorios del departamento de salud
estatal o nacional o laboratorios clínicos en
los centros médicos más importantes)
examinen los cultivos problemáticos.
Pruebas de eficacias:
Externa e Interna

Es recomendable que los laboratorios de


microbiología puedan participar en programas de
evaluación externa. Estos programas miden la
capacidad del laboratorio para evaluar una muestra
desconocido y llegar a un resultado seguro. Los
mismos consisten en la identificación de muestras o
microorganismos desconocidos y se debe informar
del resultado de la identificación, pruebas utilizadas
para el diagnóstico etiológico y sensible a los
antibióticos. Estos programas de control de calidad
externos pueden ser nacionales o internacionales.
El laboratorio, debe diseñar sistema de control
interno para verificar que la calidad alcanzada es la
especificada. Es importante, para todo tipo de laboratorio que
el sistema de control proporcione al personal información
clara y fácilmente comprensible para que sirva de base para
la toma de decisiones. Se debe poner énfasis a la eliminación
de errores en el manejo de muestras, solicitudes, exámenes
e informes.

El control de calidad en el laboratorio tiene como


objetivo , que el producto final del trabajo tenga un grado
aceptable de seguridad, de conformidad con los limites
establecidos. Debido a que la mayoría de los resultados en
microbiología son producto de interpretaciones y evaluación
de reacciones bioquímicas de seres vivos donde la capacidad
y experiencia del evaluador tienen un gran valor