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THE USE OF FACTORIAL DESIGN

FOR FERULIC ACID


PRODUCTION BY CO-CULTURE

JANET PACHECO LAZARO


PAPER BASE
Resumen
• Varios factores pueden influir en el uso del cocultivo para la producción de ácido
ferúlico a partir del desperdicio de tallo del banano.
• El objetivo de este estudio fue analizar los factores de temperatura, pH, agitación,
relación agua-sustrato, volumen de inóculo, tiempo de fermentación y tipo de co-
cultivo empleando un diseño factorial fraccional de 24.
• Los resultados mostraron el orden de los efectos de contribución hacia la
producción de ácido ferúlico:pH> tipo de co-cultivo> volumen de inóculo>
agitación> tiempo de fermentación> temperatura> relación agua-sustrato.
INTRODUCCION
• ACIDO FERULICO
RESIDUO DE TALLO DE PLATANO
ÀCIDO FERULICO
• El ácido ferúlico se encuentra ligado al pericarpio del tallo por enlaces éster,
para poder liberarlo es necesario hidrolizarlo químicamente o enzimáticamente.
MICROORGANISMOS
• Bacillus spp:
• Bacillus thuringiensis Bt407
• Bacillus cereus CCM 2010
• Bacillus pumilus SAFR-032
SUSTRATO
Plantacion • eliminar
de plàtano suciedad

• Mayor àrea
Cortar tallo de
contacto

Mezclar con
agua

Ajuste de pH • Esterilizar
a 121ºC
(Tabla 1) T=15min
PREPARACION DE CO-CULTIVO
• 1. RESUCITAR LAS BACTERIAS: cultivo agar e incubadas a 37ºC por 24h

1ml cultivo enriquecido

INCUBADO POR
COLONIA DE SE CULTIVARON A 22h A 37ºc
CADA CEPA 37ºc POR 22h

10mL de caldo nutritivo 50mL de caldo nutritivo

*ESTO SE HISO PARA CADA CEPA


CO-CULTIVOS
CULTIVOS
CO-CULTIVO A:
• B. thuringiensis, B.
cereus y B. pumilus
50ml de cultivo
único en fase
estacionaria CO-CULTIVO B:
• B. thuringiensis y B.
500mL caldo nutritivo cereus
Incubadora con
agitación por22h a 37ºC
CONFIGURACION EXPERIMENTAL

UN CIERTO VOLUMEN(TABLA1) CO-


CULTIVO SE INOCULO EN UN
ERLENMEYER DE 250mL QUE
CROMATOGRAFIA
CONTENIA SUSTRATO.
LIQUIDA DE ALTA
LA INCUBACION SE REALIZO EN UN RESPUESTA
RESOLUCION
AGITADOR DE INCUBADORA A
(HPLC)
DIFERENTES TEMPERATURAS Y
VELOCIAD DE AGITACION DE
ACUERDO A LA TABLA 1.

*La fase móvil consistió en


acetonitrilo, agua destilada y
ácido acético
ácido (30: 69.5: 0.5, v / v).
TABLA 1 .
DISEÑO FRACTORIAL
• Se realizó un diseño factorial fraccional de 24 que consistió en 16 experimentos para todos
los parámetros, como se muestra en la Tabla 2.

El contenido más alto de FA (488.41 mg / kg) cuando se realizó la fermentación durante 24 ha 26 ° C, pH


inicial de 9.5, agitación a 150 rpm, concentración de agua a sustrato de 2: 1, con inóculo de 2% de co-cultivo
B (B. cereus y B. thuringiensis) como se muestra en el orden 7
VARIABLES DESCODIFICADAS

El contenido más alto de FA (488.41 mg / kg) cuando se realizó la fermentación durante 24 ha 26 ° C, pH


inicial de 9.5, agitación a 150 rpm, concentración de agua a sustrato de 2: 1, con inóculo de 2% de co-cultivo
B (B. cereus y B. thuringiensis) como se muestra en el orden 7
ANOVA
CONCLUSIONES
• Del análisis, pH, agitación, volumen de inóculo y tipo de cocultivo fueron identificados como
efectos significativos en la producción de FA. Además, la interacción de:
• temperatura y agitación,
• temperatura y volumen de inóculo,
• temperatura y tiempo de fermentación, y
• pH y agua-sustrato, también fueron significativas.
• Se determinó que el factor de pH y la interacción de la temperatura y el tiempo de
fermentación eran los más efectivos para influir en el Producción de FA.
¡GRACIAS!

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