PCR para identificar Parasito

Toxoplasma Gondii.
Biologia Molecular
Parasito Toxoplasma Gondii.
• Protozoo parásito
intracelular obligado, de
tipo zoonósico.

• Tiene la capacidad de infectar a

todos los animales de sangre
caliente.

• Este parasito puede ser mortal

en los felinos y en los fetos
humanos.
 Su hospedador definitivo son los felinos, aun que otros
animales homeotermo como los humanos también pueden
hospedarlo.
 METODO DE INFECCION.

Los esporozoitos contenidos en el ooquiste

esporulado.
Formas
Los bradizoitos contenidos en el quiste.
infectantes.

Los taquizoitos contenidos en el pseudoquiste con

forma de banana de 7-8micras de tamaño.
 El hospedador definitivo (felinos)
ingiere el ooquiste esporulado.

Se encuentra en el agua, en la
vegetación o en carne cruda con
quistes o pseudoquistes.

En el intestino del felino el parásito

continúa su ciclo y nuevos ooquiste
son liberados con las heces.
 Viabilidad, propagación y
Alojamiento.
transmisión.
Humano, mamíferos (felinos, ovinos, caprinos, bovinos, porcinos, roedores),
aves, suelo, vegetación, agua, alimentos (carne cruda, vegetales).
Hospedador.

Humanos, mamíferos (felinos, ovinos, caprinos, bovinos, porcinos, roedores) y

aves.
Mecanismos transmisión.

La transmisión se produce principalmente por la ingesta de carne cruda o mal cocida con
el quiste o el pseudoquiste y por la ingesta de leche, agua o vegetales con el ooquiste.
Vías de entrada.

Digestiva. Respiratoria. Mucosas. Dérmica. Parenteral.

Sintomas al poseer toxoplasma
gondii.
La mayoría de las infecciones primarias por toxoplasmosis no
producen ningún síntoma, de ahí la dificultad de detectarlas
precozmente cuando se producen en las mujeres embarazadas.

Se dividen en:
 Pacientes inmunocompetentes.
 Pacientes inmunodeprimidos.
 Toxoplasmosis congénita.
 Finalidad de la PCR en
Toxoplasma Gondii.
En la técnica de la reacción en cadena de polimerasa (PCR), un
fragmento especifico del genoma es amplificado para que sea
visualizado en un gel de electroforesis, en un secuenciador
automático o en un software de PCR en tiempo real.
 Muestra biológica

Orina.
Liquido amniótico.

lavado
broncoalveolar Sangre.

Liquido
cefalorraquídeo.

Fluido vítreo.
 Reactivos
 Gel de electroforesis.  kit TOXO.
 tampón de reacción. Bromuro de etidio.
 dNTP
 dos cebadores
 Enzima taq
polimerasa.
 tintes fluorogénicos.
 Utilidad del kit.
El kit TOXO de ATGen permite determinar la presencia de
ADN de T.gondii con una sensibilidad analítica de 40 fg de ADN
por reacción de PCR a partir de muestras de sangre o líquido
amniótico.
 La técnica se basa en la extracción del ADN de las muestras y
la posterior amplificación por PCR de una secuencia de 524 pb
específica del ADN de T.gondii que se visualiza en geles de
acrilamida.
 El kit incluye un control de amplificación que controla la
aparición de resultados falsos negativos. Todo el
procedimiento puede ser completado en 8 horas.
 Procedimiento
 El kit se conserva a -20 °C.

Muestras:
 Sangre: 2-5 ml
 Liquido amniotico: 2-10 ml.
Interpretación de resultados.