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UNIVERSIDAD DE CHICLAYO

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


ESCUELA PROFESIONAL DE TECNOLOGIA
MEDICA
ESPECIALIDAD DE LABORATORIO CLINICO Y ANATOMIA PATOLOGICA

BIOLOGIA MOLECULAR

Mg. JUAN ENRIQUE ARELLANO UBILLUS TECNOLOGO


MEDICO
ESP. LABORATORIO CLINICO Y ANATOMIA PATOLOGICA
Biología Molecular

Ciencia cuyo objetivo fundamental es


la comprensión de todos aquellos
procesos celulares, que contribuyen a
que la información genética se
transmita eficientemente de unos
seres a otros, y se exprese en los
nuevos individuos
Breve Historia de la Biología Molecular
• 1866. Mendel publica sus experimentos conducentes a los principios de
segregación y clasificación independiente de los genes.

• 1869. El científico suizo Frederick Miescher descubrió en el núcleo de las


células una sustancia de carácter ácido a la que llamó nucleina.

• 1920´s. El químico alemán Robert Feulgen, utilizando una tinción específica,


descubrió que el DNA estaba situado en los cromosomas.
Breve Historia de la Biología Molecular
• 1944. Avery, McCleod y McCarty comprueban que el DNA es el portador de
la información genética.

• 1953. Watson y Crick revelan la estructura del DNA como una doble hélice
complementaria que recuerda la estructura de una escalera de caracol.

• A partir de entonces y de manera exponencial, se suceden los


descubrimientos (enzimas de restricción, polimerasas, etc...) que conducirán
a lo que se conoce como tecnología del DNA recombinante.
Breve Historia de la Biología Molecular
ADN
Molécula “maestra” que provee a los individuos de un
código genético capáz de determinar las características
individuales como persona y generales como especie.

Este codigo genético está determinado por el ordenamiento


de cuatro unidades básicas que forman el ADN,
deonominados nucleótidos: Adenina, Timina, Citocina y
Guanina.
Núcleo

Cromosomas

Citoplasma
Célula

ADN Nuclear
Características del ADN

• Es único para cada individuo (excepto


gemelos univitelinos)
• Determina todas las características
físicas y metabólicas de un individuo.
• Es heredado en un 50% del padre y un
50% de la madre
• Forma estructuras conocidas como
cromosomas
CLASIFICACION DEL ADN
• ADN CODIFICANTE • ADN NO CODIFICANTE

• Determina características • Utilizado en identificación humana


físicas del individuo (exámenes de ADN)

• Determina predisposición a • No determina características


enfermedades físicas

• No está relacionado con


enfermedades
RAZONES POR LAS CUALES EL DNA ES
UNA MOLECULA UTIL POR EJM PARA
ESTUDIOS FORENSES

 Es polimórfico (variable)
 Es estable
 Es heredable
 Está presente en todas las células
nucleadas
APLICACIONES DE LA TECNICA EN EL SISTEMA MEDICO LEGAL

 Estudios de filiación: paternidad, maternidad,


incestos, paternidades póstumas.

 Análisis criminalístico: Delitos sexuales,


homicidios, robos, etc.

 Identificación humana: Identificación médico


legal

 Base de datos única de registros de ADN


(huella genetica criminal (CODIS)
Tipos de Fluídos Biológicos

• Sangre
• Semen
• Saliva
• Orina
• Pelo
• Diente
• Hueso
• Tejidos
Técnicas de análisis del
ADN en genética forense
Polimorfismo de ADN

 PCR
 OTRAS
 Cromosoma Y
 Importancia Pericial
Tipos de Polimorfismo
Polimorfismo de secuencia

Variación puntual en un par de bases (SNP) o en varias


bases de una región.

 Polimorfismo de longitud

Diferencias en el número y lugar de las repeticiones:


• Tandem (VNTR) - Satelite.
- MVR.
- STR.
• Intercaladas - Sines
- Lines
Obtención de cromosoma
La muestra ADN

sangre células

Reacción de Amplificación
(PCR) Electroforesis
(separación de los fragmentos amplificados)
PCR (Reacción en Cadena de la Polimerasa)

• Permite amplificar mas de 1 millón de


veces una región de ADN.

1 BILLÓN DE VECES

• Ideada en 1989 por K. B. Mullis.


Amplificación del ADN por la Reacción en 
Cadena de la Polimerasa (PCR)

5’ 3’
DNA Templado

3’ 5’

Forward primer

5’ 3’ 5’ 3’

Add primers
3’ 5’
(anneal)
3’ 5’ Reverse primer
PCR Copia el ADN Exponencialmente mediante 
Multiples Ciclos Térmicos

region original del ADN a amplificar

Ciclo térmico

En 32 ciclos a una eficiencia de 100%, 1.07 
En 32 ciclos a una eficiencia de 100%, 1.07 
billones de copias del ADN son creadas
billones de copias del ADN son creadas
Ventajas de la PCR

 Cantidad mínima de ADN.

 ADN degradado.

 En corto tiempo un elevado número de copias.

 Agrupación alélicas en clases discretas.


ELECTROFORESIS

Es un método de laboratorio en el que se utiliza una


corriente eléctrica con la finalidad de separar
biomoleculas según su tamaño y carga eléctrica a través
de una matriz gelatinosa.

Como soporte han sido utilizados papel (celulosa), almidón,


poliacrilamida, agarosa y acetato de celulosa, entre otros.
• Electroforesis Capilar
Determinación de la paternidad
Cada hijo/a recibe una banda de su madre y otra de su padre. El
primer paso para interpretar esta autorradiografía es identificar qué
bandas proporcionó la madre. Luego se pueden comparar las bandas
restantes con las del supuesto padre, para determinar si se le incluye
o se le excluye.
PADRE
HIJO MADRE
PRESUNTO

Inclusión
PADRE
PRESUNTO HIJO MADRE

Exclusión
Determinación de la paternidad
GRACIAS

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