Tecnología del DNA Recombinante

Enzimas de Restricción
CLONACIÓN CELULAR DE DNA
 VECTOR
 Molecula de DNA de doble cadena, con capacidad de
adquirir un fragmento de DNA exógeno.

 Vectores de clonación: obtener grandes cantidades de

la molécula recombinante.

 Vectores de Expresión: producción del transcrito

(mRNA) o la proteína.
Vectores de clonación
 Origen de replicación: único sitio donde las proteínas van
a comenzar la replicación del vector hacia un solo
sentido.
 Marcador de selección: (gen reportero) genes que ayudan
a identificar las células que contienen el vector. Ej: gen de
resistencia a Amp o Kan. Dan fenotipos Ej: gen Lac Z (-
galactosidasa), gen GFP.
 Sitio múltiple de clonación: o sitios de restricción para
varias enzimas de restricción. Lugar donde el DNA de
interés se va a unir al vector.
Tipos de vectores de clonación
 Plásmidos: Bacteriano, DNA circular de doble cadena
 Bacteriófagos: de origen viral, el más usado fago 
(lambda), tienen secuencias cos para recircularizar su
genoma. Forma cápsides in vitro.
 Cósmidos: tiene características de plásmido (ORI) y fago
(cos)
 Cromosomas artificiales
 BACs: genes que reducen su capacidad de copia.
 YACs: secuencias para telómeros, centrómero, ORI, marcador
de selección.
Capacidad de transporte de los vectores de
clonación

1 Kb= Mil pb
1 Mb= un millón de pb
GENOTECAS