Mtodos Diagnsticos en

Hematologa

DR. JORGE WILLIAM OLIVEROS ALVEAR

2017
 Mtodos Diagnsticos en Hematologa
Datos obtenidos de la Hematimetra
Inmunohematologa
Citomorfologa
Citoqumica
Inmunomarcacin: ( INMUNOHISTOQUIMICA
/CITOMETRIA DE FLUJO)
Citogentica (bsica /FISH)
Biologa molecular: transciptos o mutaciones
(PCR/FISH)
Microarray (perfil genetico, ngs, gwas)
El Hemograma o conteo sanguneo completo (CSC)
Se reflejan todos los elementos o componentes de la sangre, su nmero, su
proporcin en el organismo y si sufren alteraciones:

Hemates o glbulos rojos

Hemoglobina (Hb)
Henatocrito (Hto)
Volumen corpuscular medio (VCM)
HCM (hemoglobina corpuscular media)
Leucocitos o glbulos blancos
Plaquetas
VSG (velocidad de sedimentacin
Mtodos Diagnsticos en Hematologa

ANALISIS AUTOMATIZADO DE LAS CELULAS SANGUINEAS

VS
EXAMEN MANUAL DE LA SANGRE

VENTAJAS Y DESVENTAJAS
 Mtodos Diagnsticos en
Hematologa
TECNICAS DE ANALISIS AUTOMATIZADOS
VOLUMEN DE CELULAS EMPAQUETADAS.
ANALISIS DE IMAGEN
CONTAJE DE PARTICULAS POR IMPEDANCIA (PRINCIPIO DE
COULTER)
DISPERSION DE LUZ ( LIGHT SCATTER)
ABSORCION DE LUZ (COLORANTE CITOQUIMICA)
CONDUCTIVIDAD
FLUORESCENCIA
El Hemograma o conteo sanguneo completo (CSC)

Manual Automatizado

ventajas Ventajas

Desventajas Desventajas
 INTERPRETACION DE LOS ANALISIS
AUTOMATIZADOS
PARAMETROS CALCULADOS

HEMATOCRITO (RTO.G.R. X VCM)

CONCENTRACION DE HEMOGLOBINA CORPUSCULAR
MEDIA (Hb /HEMATCRITO)
HEMOGLOBINA CORPUSCULAR MEDIA (Hb /RTO. G.R)
AMPLITUD DE DISTRIBUCION DE GR Y PLAQUETAS (RDW Y
PDW)
HEMATES

Ms conocidos como glbulos rojos, son las clulas sanguneas ms

importantes, ya que se encargan de transportar el oxgeno al resto de
las clulas del organismo.
Niveles normales: 4.500.000-5.900.000 /ml en varones
4.000.000-5.200.000/ml en mujeres
Niveles bajos: ANEMIA
Niveles altos: POLIGLOBULIA
 INTERPRETACION DE LOS ANALISIS AUTOMATIZADOS

RECUENTO DE ERITROCITOS E INDICES

Volumen Corpuscular Medio (VCM)

medido directamente al promediar el volumen de los eritrocitos por impedancia o
dispersin de luz
Volumen globular (%) x 10____
millones de hemates/ mm3

Valor normal: 90 u3 + 5 (fl)

HEMOGLOBINA(Hb)

Cada hemate suele contener entre 200 y 300 molculas de

hemoglobina. Es gracias a la hemoglobina que el oxgeno y
los nutrientes llegan al resto de los tejidos del cuerpo.
Tambin transporta el dixido de carbono a los pulmones
para que se exhalado.
Niveles normales: 13,5-17,5 g/dl en hombres.
12-16 g/dl en mujeres.
Niveles bajos: Anemia.
Niveles altos: Poliglobulia
HEMATOCRITO (Hto)
Es el volumen de hemates en sangre expresado como un porcentaje
sobre el volumen sanguneo total.
Niveles normales: 41-53% en hombres
36-46% en mujeres
Niveles bajos: ANEMIA
Niveles altos: POLIGLOBULIA
PARAMETROS HEMATIMTRICOS

Volumen corpuscular medio (VCM)

Este ndice determina el tamao medio de los hemates. De este modo,
se pueden clasificar las anemias en:macrocticas o microcticas,
dependiendo de si el tamao del hemate es mayor o menor de lo
habitual.
Niveles normales: 88-100 fL (femtolitros por hemate).
PARAMETROS HEMATIMTRICOS
HCM (hemoglobina corpuscular media)
Este parmetro indica la cantidad media de hemoglobina que contiene
cada hemate o glbulo rojo.
Gracias a este parmetro se pueden clasificar las anemias de otra forma
diferente: las hipocrmicas son las que cursan con un bajo nivel de
HCM, y las hipercrmicas las que tienen un alto nivel de HCM.
Niveles normales: entre 27 y 33 pc (picogramos).
Niveles bajos: lo ms comn es que exista anemia por falta de
hemoglobina (normalmente por dficit de hierro).
Niveles altos: son raros los casos de anemias hipercrmicas. Pueden
alertar de un dficit de Vitamina B12 o cido flico.
 INTERPRETACION DE LOS ANALISIS
AUTOMATIZADOS
RECUENTO DE ERITROCITOS E INDICES

Concentracin de Hemoglobina Corpuscular Media (CHCM)

__Hemoglobina g% x 100___
hematcrito
Valor normal: 34-36%

Amplitud de Distribucin de los Eritrocitos

(RDW). Estimacin cuantitativa de la anisocitosis, coeficiente de
variacin de la distribucin del tamao de los globulos rojos.
Puede ser indicador de seleccin para analisis morfolgico
INTERPRETACION DEL
HEMOGRAMA
ANEMIA

HB
VCM
RETICULOCITOS

ARREGENERATIVAS MICROCITICA
NORMOCITICA
REGENERATIVA MACROCITICA
PERLAS CLINICAS PARA EL DIAGNOSTICO

EL TIPO DE ANEMIA MAS FRECUENTE: A. FERROPENICA/ ATC

EN NIOS Y MAYORES DE EDAD: ANEMIA MICROCITICA/FERROPENICA
ANEMIAS CON RETICULOCITOSIS: HEMOLISIS, SANGRADOS E
HIPERESPLENISMO
LOS SINTOMAS EN ANEMIA SON TARDIOS
LA ANEMIA AGUDA ES MAS SINTOMATICA, QUE LA CRONICA
MAS DE UNA CITOPENIA TE OBLIGA A DESCARTAR PROCESOS
MEDULARES O PERIFRICOS
 PERLAS CLINICAS PARA EL DIAGNOSTICO

ANEMIA HEMOLITICA EN NIOS: ENZIMOPATIA, MEMBRANOPATIAS,

HEMOGLOBINOPATIAS
ANEMIA CRONICA, ICTERICIA, LITIASIS VESICULAR Y
ESPLENOMEGALIA= ESFEROCITOSIS
ANEMIA HEMOLITICA, RAZA NEGRA, ULCERAS EN PIERNAS =
ELECTROFORESIS DE LA HB = DREPANOCITOSIS
ANTECEDENTES DE ANEMIA HEREDITARIA, MICROCITOSIS, SIN ANEMIA
O ANEMIA LEVE= RASGO TALASEMICO
 PERLAS CLINICAS PARA EL DIAGNOSTICO

PICA (PAGOFAGIA): ANEMIA FERROPENICA

ANEMIA MACROCITICA CON TRASTORNOS NEUROLOGICOS
(NEUROPATIA) = DEF. VITAMINA B
ANEMIA POR FALLO RENAL = ACLARAMIENTO MENOR 30 ML/MINUTO
ANEMIA FERROPENICA CRONICA= PARASITOSIS
ANEMIA, TROMBOCITOPENIA MAS ESQUISTOCITOS =
MICROANGIOPATIA
EL FROTIS DE SANGRE PERIFERICO, ESENCIAL, PERO NO SIEMPRE
NECESARIO.
 LEUCOCITOS

LEUCOCITOSIS LEUCOPENIA

TIPO DE
TIPO DE LEUCOCITOS
SINTOMATICO
LEUCOCITOS
SINTOMATICO
 LEUCOCITOSIS

NEUTROFILIA LINFOCITOSIS MONOCITOSIS EOSINOFILIA

INFECCIOSA TUMORAL
ESTEROIDES REACCION
LEUCOERITROBLASTICA
LEUCEMIAS
NEOPLASIA ALERGIAS
MIELOPROLIFERATIVA LMA M4, M5
PARASITOS
LMMC
SHE
SLPa
SLPc
 LEUCOPENIA

NEUTROPENIA LINFOPENIA MONOCITOPENIA EOSINOPENIA

ASINTOMATICA NEUTROPENIA FEBRIL

De Novo
Secundario a QMT/RDT TRICOLEUCEMIA USO DE
ESTEROIDES
CUSHING
VIRUS
LES
TB
LINFOMAS
PLAQUETAS
Son los elementos ms pequeos de la sangre, y resultan esenciales
para la HEMOSTASIA
Niveles normales: entre 150.000-400.000/ mm3.
Niveles bajos: TROMBOCITOPENIA
Niveles altos: TROMBOCITOSIS
PERLAS CLINICAS PARA EL DIAGNOSTICO

PANCITOPENIA O BICITOPENIA

ANEMIA, LEUCOPENIA, PLAQUETOPENIA

1)MEDULARES: INSUFICIENCIA MEDULAR,

INFILTRATIVAS (NEO O LEUCEMIAS)
2)PERIFERICAS: INMUNES
3)ESPLENICAS: HIPERESPLENISMO
 Datos Clnicos .-
Hombre 64 aos con HDA,
esplenomegalia y estigmas de
Hepatopata crnica.

Mujer 32 aos con palidez,

fatiga, sin visceromegalia, ni
esplenomegalia. Mdula sea
hipocelular

Mujer 30 aos con artritis,

lesiones en piel, derrame
pleural bilateral. Deterioro
renal (incremento de la urea y
creatinina). C3, C4 bajos ,
ANA y Anti DNA positivo.

Hombre 30 aos con

sndrome febril prolongado.
Palidez extrema, Mouguet.
Linfadenopatia generalizada.
Seropositivo VIH
Mtodos de diagnstico en Hematologa

CITO-MORFOLOGIA

* Evaluacin del Frotis de Sangre Perifrica

* Puncin Aspiracin de Mdula Osea

* Biopsia de Mdula sea

 Mtodos diagnsticos en Hematologa
Preparacin e Interpretacin de los Frotis de Sangre Perifrica

TINCION DE
ROMANOWSKI

WRIGHT
LEISHMANN
JENNER
MAY-GRUNWALD/
GIEMSA
 Mtodos de diagnstico en Hematologa
Cito-morfologa
Evaluacin del Frotis de Sangre Perifrica
* Serie Roja: - anisocitosis
- poiquilocitosis
- hipocromia
- alteraciones morfolgicas
con criterio diagnstico**
- elementos inmaduros
**dacriocitos, esferocitos, esquistocito (fragmentocito), target cell,
eliptocito, estomatocito, drepanocito.
 PRINCIPALES ALTERACIONES MORFOLOGICAS DE LOS
ERITROCITOS

INCLUSIONES EN LOS GLOBULOS ROJOS

NOMBRE NATURALEZA SIGNIFICADO

PUNTEADO BASOFILO RNA residual Eritropoy. anormal

Grueso y fino Precitacin ribosomas

Anillos de Cabot microtbulos o restos Hemolisis severa

de Ribosomas

Cuerpos de Howell-Jolly DNA (remanete ausencia de bazo o

cromosmico) inefectivo

Granulos Sideroticos Hierro no ausencia o bazo

(Pappenheimer) hemoglobnico inefectivo a
 Mtodos diagnstico en Hematologa
Cito-morfologa
Evaluacin del frotis de sangre perifrica
*Serie Leucocitaria.
- Confirmacin de la frmula leucocitaria
- Alteraciones de los neutrfilos
- Evidencia de elementos inmaduros, desviacin a
la izquierda, elementos blsticos
- Evaluacin de los linfocitos (nmero, alt.
nucleares, sombras de Gumpretch, blastos).
Cito-morfologa
Evaluacin del frotis de sangre perifrica
*Serie Leucocitaria.
CAMBIOS REACTIVOS O TOXICOS EN LOS LEUCOCITOS
NUCLEO CITOPLASMA
NEUTROFILO cromatina densa granul. Toxicas
hipersegmentacin Cuerpos de Dohle
vacuolas
MONOCITO cromatina densa contorno irregular
pseudopodos
vacuolizacin
LINFOCITO convolucin contorno irregular
cromatina inmdura basofilia
ncleolo vacuolizacin
gran. azurofilos
 Mtodos diagnsticos en Hematologa

Cito-morfologa
Evaluacin del frotis de sangre
perifrica
*Serie Plaquetaria
- alteraciones en el tamao
(macroplaquetas)
-alteraciones en la coloracin
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Parmetros de Inmuno-hematologa
Hemolisis.
* Reticulocitos Hemolisis:
* LDH a) H. Extravascular
*Bilirrubina ( indirecta)
* Haptoglobina b) H. Intravascular.
* Hemopexina
* Metemalbumina
*Hemosiderina
*Hemoglobina libre
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 Mtodos diagnsticos en Hematologa
Mecanismos Hemolticos no Inmunes
Efecto txico directo = Plasmodium
Defecto estructural = Membranopatas
= Enzimopatas
= Hemoglobinopatas
Trauma/trombosis =Microangiopata
Defecto puente GP = HPN (PNH)
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Hemolisis no Inmunes
Test Fragilidad osmtica = Esferocitosis
Test de Eosin-5-maleimida (EMA)
Test de Kleihauer = A. Drepanocitica
Electroforesis de la Hb. = S. Talasmicos
Test de hemolisis Acida = HPN
Determinacin de G-6PDH = Def. G-6 PDH
Estudio de Hb inestables = Hbs. Inestables.
 Mtodos diagnstico en Hematologa
Indicaciones de Puncin de Mdula sea
- Evaluacin de citopenias: Anemias
Plaquetopenia
Leucopenia
- Evaluacin inicial de las insuficiencias medulares
- Evaluacin de las eritropoyesis ineficaz
- Evaluacin del hierro de depsito (hemosiderina)
- Evaluacin inicial de las infiltraciones meduales
- Mielocultivos
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Indicaciones de Biopsia de Mdula
sea
evaluacin de pancitopenias, o
bicitopenias
diagnstico de insuficiencias medulares
diagnstico de sind. leucmicos y
mielodisplasias
evaluacin de fibrosis medular
diagnstico de infiltraciones meduales
a)linfomatosas
b) neoplsicas
c) granulomas
- evaluacin de dry tap
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Mtodos y tcnicas de Identificacin Citolgica.
Citoqumica
Inmunofenotipo: *Citometra de Flujo
*Inmuno-histoqumica
Citognetica: *Bandeo
*FISH
Biologa Molecular - Hibridizacin in situ
- PCR
- FISH
- NGS
- WGAS
Mtodos de diagnstico en Hematologa
Mtodos de Identificacin de clulas neoplsicas.
Diagnstico preciso de la estirpe celular
Enfermedad mnima residual
microscopia
inmunofenotipo
PCR / FISH / Molecular trascriptos/mutaciones
ESTUDIOS CITOGENTICOS
CITOGENTICA POR FISH
INDICACIONES DE ESTUDIOS
MOLECULARES
TECNICAS EN BIOLOGIA MOLECULAR
TECNICAS DIRECTAS: