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NEBcutter

Biotecnologa2
Agudelo Vivian Campio Paola Medina Danitza
Departamento Microbiologa
2017
AmplicndeprimersPCO3-PCO4
5ACAAC TGTGTTCACT AGCAACCTCA AACAGACACC ATGGTGCATC
TGACTCCTGA GGAGAAGTCT GCCGTTACTG CCCTGTGGGG CAAGGTGAAC
GTGGATGAAGTTG 3
*Enzimagenera"extremoscohesivos(parejos)
NuevasestrategiasClonamiento
TECNOLOGADECLONACIN

Que Funciona tanto como enzima de


La clave de la restriccin como ligasa. Su funcin biolgica
clonacin TOPO es la es Para escindir y volver a unirse al ADN
enzima ADN durante la replicacin.
topoisomerasa I.
ClonacinTOPOdeextremosromos

Estas polimerasas tienen actividad exonucleasa extensa 3 5 . Y en el


extremo 3 no dejan adeninas sobresalientes.
ClonacindireccionalTOPO

La clonacin direccional TOPO permite la clonacin de productos de PCR


de extremos romos directamente en un vector de expresin en una sola
orientacin.

Obtener resultados
de clonacin eficaces: Lograr que los
ms del 90% de los vectores de expresin
Ahorre tiempo: la
clones recombinantes de alto nivel lleven
clonacin TOPO de su
estarn en poderosos
producto de PCR
Orientacin correcta promotores para la
tarda slo 5 minutos.
para la expresin expresin en E. coli o
clulas mamferas

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