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VIABILIDAD Y CARACTERISTICAS

CULTURALES, TINTORIALES,
MORFOLGICAS Y BIOQUMICAS DE UNA
COLECCIN BACTERIANA

Revista Cubana de Medicina Militar. Vol. 44(1)


Pag105-111/ Dra. Martha Alfonso Gonzlez/ 2015.

Andrea Caas Hernndez

Universidad de Pamplona- 2017


Biodiversidad del planeta. INTRODUCCIN
Procesos biotecnolgicos.

Solucin de Enfermedades.

CONSERVACIN

Reproductibilidad de resultados.

Liofilizacin.
METODOS DE PRESERVACIN.
Crio preservacin.
Colecciones reconocidas (ATCC).
Aislados de Mx clnicas

Evaluar la Viabilidad y las Caractersticas


Originales de un grupo de microoganismos
conservados.
Leche descremada al 10 % y
glicerol 20%.

Ampollas de crioconservacin
de 1,5 mL.

Mantuvieron a -25 C

Replicas de cada cepa

Desde la Conservacin al estudio


transcurrieron 5 aos.
DETERMINACIN DE LA VIABILIDAD Y PUREZA

Tomaron 100 uL de las replicas

Inocularon en Caldo Triptona Soya

Incubaron entre 35C y 37 C de 18 a 24 horas

Sembr por agotamiento en Agar Sangre al 7 % y ATS en


iguales condiciones de incubacin.

Viabilidad: bajo estereoscopio se observo crecimiento


de colonias. Se realizo tincin de Gram.

Pureza: observacin de otra forma bacteriana.


DETERMINACION DE CARACTERICAS DE LOS CULTIVOS

Segundo pase a Agar Nutritivo y


MacConkey en iguales condiciones Observacin
de incubacin. macroscpica.
Tincin de Gram.
API 20E.

Pruebas Bioqumicas.
Medios solidos: crecimiento
abundante y adecuado.

Condiciones optimas de crecimiento


en fase exponencial.

Coloracin de Gram: mantenimiento


de caractersticas morfolgicas
microscpicas y tintoriales y pureza.

100 % de
viabilidad despus
de 5 aos desde su
conservacin
COLECCIN DE CEPAS MICROBIANAS USADAS EN
FORMACIN Y PROYECTOS DE INVESTIGACIN
APLICADA EN EL CENTRO PARA LA FORMACIN
CAFETERA SENA REGIONAL CALDAS

CEPAS MICROBIANAS
DE TRABAJOS DE
Realizo siembra por agotamiento.
INVESTIGACIN.

Levaduras sembradas en PDA y bacterias en Agar Nutritivo.

Incubaron durante 48 horas a 25 C las levaduras


y bacterias a 37 C.

Caracterizacin Caracterizacin bioqumica


Caracterizacin
macroscpica de las con: API 20 E, API A, Y API
microscpica con
cepas. CANDIDA.
tincin de Gram.
CONSERVACION DE LOS MOO EN AGUA DESTILADA ESTERIL

Siembra masiva en PDA y Agar Nutritivo respectivamente.

Incubaron durante 24-48 horas a 25 C y 37C respectivamente.

Tomaron 50 mL de agua estril y la biomasa del crecimiento hasta 3


de la escala de Macfarland.

se hizo una dilucin en agua destilada esteril hasta 1 de


la escala de Macfarland.

Se transfiri a criovales esteriles de 2 mL y se


conservo en refrigeracin a 4 C.
CONSERVACION EN GLICEROL AL 10 %

Siembra masiva en PDA y Agar Nutritivo respectivamente

Incubaron durante 24-48 horas a 25 C y 37C respectivamente.

Tomaron 50 mL de agua estril y la biomasa del crecimiento hasta 3 de la


escala de Macfarland.

Se hizo una dilucin en glicerol estril al 10% hasta 1 de la


escala de Macfarland.

Se transfiri a crioviales estriles de 2 mL y se


conservo en congelacin gradual: 1 hora a 4C, 1 hora
a -4C y se almacenaron a -20C..
DETERMINACIN DE LA VIABILIDAD Y PUREZA

Se realizaron inicial y a los seis meses.

Los crioconservados se descongelaron en bao mara a 37C por 5 min.


Los Microorganismos preservados se emplearon directamente.

Se realizo siembra en superficie en PDA y AN y se incubaron


respectivamente.
CARACTERIZACION MACROSCOPICA DE LOS MOO
CARACTERIZACION MICROSCOPICA DE LOS MOO
CARACTERIZACION BIOQUIMICA DE LOS MOO
CONCLUSIONES

Los mtodos presentaron resultados satisfactorios cuanto a viabilidad y pureza


evidenciando crecimiento abundante y puro de las colonias, segn las pruebas de
viabilidad y pureza.

Pueden ser aplicados a laboratorios con recursos limitados.

Se evidencio que el mtodo de agua destilada esteril presento mayores ndices de


recuperacin respecto al glicerol al 10 % despues del tiempo evaluado.
BIBLIOGRAFIA

Montes de Oca N, Gonzlez RA, Rivern Y, Nez A, Villoch A, Rodrguez N.


Establecimiento y desarrollo de la coleccin de cultivos del CENSA. Rev. Salud Anim
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Brenner, D., Krieg, N., & Staley, J. (eds. (2005). Bergeys Manual of Systematic
Bacteriology, 2nd ed., vol. 2, Parts B. New York: Editorial Board.
http://doi.org/10.1245/s10434-010-1229-3