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CROMATOGRAFIA

Es un mtodo muy empleado para la separacin,


identificacin y determinacin de los componentes
qumicos de mezclas complejas.

Ningn otro mtodo de separacin es tan poderoso


ni tiene tantas aplicaciones como la cromatografa
DESCRIPCION GENERAL DE LA
CROMATOGRAFIA
Es difcil definir con rigor el termino cromatografa
porque el concepto se aplica a una gran variedad de
sistemas y tcnicas. Sin embargo, todos estos
mtodos tienen en comn el empleo de una fase
estacionaria y una fase mvil.
Fase estacionaria:
En cromatografa, la fase estacionaria est fija en
una columna o en una superficie plana.

Fase mvil:
En cromatografa, la fase mvil se desplaza sobre o
a travs de la fase estacionaria, acarreando una
mezcla en la que se encuentra el analito. La fase
mvil puede ser gas, liquido o fluido supercrtico.
Los componentes de una mezcla se pasan a travs
de una fase estacionaria mediante el flujo de una
fase mvil y las separaciones estn basadas en las
diferencias de la velocidad de migracin entre los
componentes de la fase mvil
CLASIFICACION DE LOS METODOS
CROMATOGRAFICOS

Los mtodos cromatogrficos son de dos tipos


fundamentales.

1.-En la cromatografa en columna la fase


estacionaria se mantiene dentro de un tubo angosto
y la fase mvil se hace pasar por el tubo, con
presin o por gravedad.
2.- En la cromatografa plana la fase estacionaria
est sujeta por una placa plana o en los poros
de un papel. En este caso la fase mvil se
mueve a travs de la fase estacionaria por
accin capilar o por la influencia de la gravedad.
CROMATOGRAFIA EN COLUMNA
Figura 1. Clasificacin de mtodos cromatogrficos en columna
Como se muestra en la primer columna de la
tabla 1, los mtodos de cromatografa en
columna se clasifican de acuerdo con la
naturaleza de la fase mvil, especficamente,
lquidos, gases y fluidos supercrticos. La
segunda columna de la tabla muestra que hay
cinco tipos de cromatografa liquida y dos tipos
de cromatografa de gases que difieren en la
naturaleza de la fase estacionaria y en los tipos
de equilibrio entra las fases.
En la figura 1 se muestra como se resuelven, por
elucin, en una columna empacada, dos
componentes de una muestra, A y B. La columna
consta de un tubo angosto empacado con un slido
inerte finamente dividido cuya superficie constituye
la fase estacionaria.
La fase mvil ocupa los espacios que quedan entra
las partculas del empaque. Al inicio se introduce,
por la parte superior de la columna, una solucin de
la muestra que contiene una mezcla de A Y B en la
fase mvil, en forma de una capa angosta, en donde
losa dos componentes se distribuyen entre las dos
fases, como se muestra en la figura 1, en el tiempo
t0
La porcin de la muestra contenida en la fase mvil
se mueve hacia abajo en la columna, en donde se
efecta la particin entre la fase mvil y la fase
estacionaria (tiempo t1).
El aislamiento de las especies separadas se logra
pasando una cantidad suficiente de fase mvil a
travs de la columna para hacer que las bandas
individuales salgan hacia el extremo, en donde se
pueden recolectar o detectar ( tiempos t3 y t4)
CROMATOGRAMAS

Un cromatograma es un grfico de alguna funcin


de concentracin del soluto contra el tiempo o
volumen de elucin.
Si durante la elucin se coloca en el extremo de la
columna un detector que responda a la
concentracin del soluto y se hace un grfico de la
seal como funcin del tiempo , se obtiene una serie
de picos, como se muestra en la parte inferior de la
figura 1.
En este grafico, denominado cromatograma, es til
tanto para anlisis cualitativo como cuantitativo. La
posicin de los picos en el eje del tiempo se puede
utilizar para identificar los componentes de la
muestra; el rea bajo los picos proporciona una
medida cuantitativa de la cantidad de cada especie.
VELOCIDADES RELATIVAS DE
MIGRACION DE LOS SOLUTOS
La eficiencia de una columna cromatogrfica para
separar dos solutos depende, en parte, de las
velocidades relativas a las cuales se eluyen dos
especies. Estas velocidades estn determinadas por
la relacin de la concentracin del soluto en cada
una de las dos fases.
CONSTANTE DE DISTRIBUCION
Todas las separaciones cromatogrficas se basan
en las diferencias de la cantidad de la distribucin
del soluto entre la fase mvil y la fase estacionaria.
Para la especie A de soluto, el equilibrio implicado
se describe con la ecuacin:

A( mvil ) A( estacionaria)
La constante de equilibrio Kc, para esta reaccin, se
denomina constante de distribucin, que se define
como:

Kc= [A]E = CE
[A]M CM

En donde los trminos entre corchetes son las


actividades del soluto A en las dos fases. Por lo
general se sustituye por Cs, la concentracin molar
del soluto en la fase estacionaria, y CM , su
concentracin analtica molar en la fase mvil.
APLICACIONES DE LA CROMATOGRAFIA

La cromatografa es una herramienta til y verstil


para la separacin de especies qumicas muy
relacionadas. Adems, se puede emplear para la
identificacin cualitativa y la determinacin
cuantitativa de las especies ya separadas.

*Cromatografa liquida de alta resolucin (HPLC).


*Cromatografa de gases.
GRACIAS POR SU ATENCION