Laboratorio de Inmunologa

Prctica #4
Dra. Patricia Gmez Ruelas
 Reacciones febriles
Son un conjunto de reacciones de aglutinacin directa tiles
en el diagnostico de fiebres entricas.

Salmonella, Brucella & Rickettsias

Reacciones Windal
Huddleson
Weil-Flix

Existen dos tipos de fiebres entricas:

Paratficas Fiebre tifoidea
Salmonella paratiphy (A,B,C) Salmonela tiphy
Rickettsiosis Proteus vulgaris
(OX-19, OX-K)

FALSOS POSITIVOS

Vacunacin previa
Efecto de antibiticos
Detalles clnicos
Estadios de la enfermedad

TITULOS MINIMOS PARA

DIAGNOSTICO:

Mayores a 1:160
 Fundamento: Los antgenos bacterianos suspendidos en solucin
fisiolgica interactan con los Acs especficamente inducidos
durante el contacto de la bacteria con el sistema inmunolgico.
En este caso se demostrar la presencia o ausencia de
aglutininas in vitro, lo cual ser fcilmente detectable:
Granular Somtica Gramos tenues Flagelar

Preparacin de la muestra:
1. Se colocan 5ml de sangre obtenida por puncin venosa en un
tubo de ensayo limpio y seco sin anticoagulante.
2. Se deja coagular la sangre, se desprende el coagulo, se
centrifuga la muestra a 2000rpm durante 10 min, se extrae el
suero y lo colocamos en otro tubo seco.
Reaccin de widal:
Antgeno tfico O
Antgenos tfico H
Antgeno paratfico A
Antgeno paratfico B
Reaccin de Weil-Flix:
Antgeno Proteus OX-19
Reaccin de Huddleson:
Antgeno Brucella abortus
 Prueba cualitativa
Se utiliza una placa de vidrio con
excavaciones, que se marcan
adecuadamente segn el antgeno
que se vaya a estudiar en cada
espacio.
Con una pipeta serolgica 0.2ml se
colocan en cada una de las
excavaciones de la placa 0.04 ml del
suero problema (una gota).
A cada excavacin con suero se le
agrega una gota de cada uno de los
ags febriles.
Mezclar en cada excavacin el suero O H A B
y el Ag con un aplicador de madera.
Oscilar la placa durante 4 minutos y
observar.
OX-19 Bp
 Resultados
Positivo: dan aparicin de grumos. Significa
paciente con infeccin actual, reciente o
pasada.

Negativo: Paciente en estado muy temprano

de la infeccin o no infectado.
 Prueba cuantitativa
Cuando el suero problema presenta reacciones positivas
con algn antgeno, se repite la tcnica descrita empleando
el antgeno correspondiente, frente a una serie de
diluciones del suero.
Con pipeta graduada de 0.1 ml, medir respectivamente en
la excavaciones de la placa: 0.02, 0.01, 0.005 ml de suero.
Agregar una gota de Ag frente al cual presento aglutinacin
y proseguir de mismo modo que para la prueba cualitativa.
Anotar la cantidad mnima de suero (dilucin) que
manifiesta aglutinacin franca.
 Resultados
Las cantidades empleadas de suero corresponden a las
siguientes diluciones:

Milititros de suero Dilucin

0.08 1:20
0.04 1:40
0.02 1:80
0.01 1:160
0.005 1:320

El titulo de suero para el antgeno utilizado corresponde a la

dilucin mas alta en la que se observa la reaccin positiva
franca