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Determinacin del mecanismo de

accin de la actividad antioxidante


de un compuesto de origen natural
Estrs oxidativo
Ocurrecuando hay un desequilibrio entre especies
reactivas y antioxidantes.
Puededeberse al aumento de radicales libres o
especies reactivas no radicales en un organismo o a la
disminucin de antioxidantes.
Radical libre o especie reactiva
Radical libre es cualquier especie qumica capas de existir
de forma independiente el cual presenta uno o mas
electrones desapareados volvindolos altamente
reactivos.
Las especies reactivas de oxigeno son altamente
inestables por lo que reaccionan fcilmente con
componentes celulares.
Antioxidante
Es cualquier sustancia que en presencia de un sustrato oxidable retrasa
o inhibe la oxidacin del mismo, se caracteriza por ser hidrosolubles y
liposolubles.
Proceden de diferentes fuentes como nutrientes, vitaminas y productos
metablicos del organismo(endgenos).
Reaccin de Fenton

Es una reaccin que ocurre al catalizar perxido de hidrogeno con metales de


transicin, Generalmente Hiero y Cobre dando como resultado la generacin
de radicales libres altamente reactivos.
Peroxidacin lipdica
Es el proceso en el cual los radicales libres capturan e- de los lpidos
de las membranas celulares.
Solubilidad de los antioxidantes

BHT
Insoluble en agua
Importante solubilizar
para leer absorbancias
sin interferencias del
mismo compuesto.
Vainillina
Halopurinol
Soluble en agua En el ensayo con NAT los
cristales azul violeta de
cido ferlico formazn son insolubles
en agua, por lo que se
emplea metanol.
Mecanismo de accin de los
antioxidantes.

Vainillina
Captura de superxido
cido ferlico

Halopurinol Inhibicin de Xantina oxidasa

BHT Captura de hidroxilo


295

Perxido de
Radical
hidrgeno
superxido

560
Agregar cada reactivo en orden.

Xantina Sustrato para la reaccin catalizada por XO

EDTA Quelante de iones metlicos bivalentes (evitar


Rxn de Fenton)
Solucin amortiguadora de carbonatos pH= Mantener forma nativa de la enzima. Para
10.19 observar su actividad cataltica.

Nitroazul de tetrazolio (NAT) Aceptor de electrones procedentes de la


oxidacin de la Xantina. Para la reduccin de
ste a formazn que permita medir el
potencial antioxidante.
Antioxidante Compuesto que captura especies reactivas de
oxgeno. Disolver de acuerdo a propiedades
fisicoqumicas.
Xantina oxidasa (XO) Enzima

Agitar/incubar Para llevar a cabo la reaccin

Detiene la formacin de formazn por


reaccin de fenton.