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Universidad Autnoma de

Nuevo Len
Facultad de Ciencias Qumicas
Maestra en Ciencias con
Orientacin en Farmacia

UV/Vis & Ft-ir


Tcnicas instrumentales para la investigacin
Claudia Cruz Saucedo
Jorge Gua Garca
Karla Santamara Lpez

Semestre Agosto-Diciembre 2016

Espectrometra por absorcin


molecular ultravioleta y visible

Historia

Antes de
1940 el
anlisis
qumico
era
largo y
con 25%
de
precisi
n.

De 1984-1985 se
presentaron equipos con
doble haz
Para
1981 se
incorpor
o
micropr
ocesado
res para
mejorar
velocida
dy
confiabil

En
1990
softwar
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Surgiero
n
variacio
nes en
el
diseo
para
mejorar
rendimi
ento

Prisma de cristal
prisma de cuarzo para
mejorar capacidades
ultravioletas del
dispositivo

Incorporacin de una
lmpara de hidrogeno

En que se basa
La espectroscopa por absorcin molecular ultravioleta y visible, se basa
en la medicin de la transmitancia T o de la absorbancia A , de
soluciones que estn en celdas transparentes que tienen una longitud de
trayectoria de b cm. Normalmente, la concentracin de un analito
absorbente se relaciona en forma lineal con la absorbancia segn la ley
de Beer

Donde:

Componentes del
instrumento
Fuentes

Selectores de
longitud de onda

Recipientes para
muestra

Transductores de
radiacin
Procesadores de
seal y dispositivos
de lectura

Fuentes
Para la espectroscopa una fuente debe de generar un haz de radiacin
con potencia suficiente para que se detecte y mida con facilidad. Adems
su potencia de salida debe ser estable durante un periodo de tiempo
razonable.

Lmparas de deuterio e hidrogeno


Lmparas de filamento de
tungsteno
Diodos emisores de luz (LED)
Lmparas de arco de xenn

Lmparas de
deuterio e hidrogeno
La excitacin elctrica de
deuterio o hidrogeno a baja
presin produce un espectro
continuo en la regin UV

El mecanismo de produccin de
un espectro continuo, supone la
formacin inicial de una especie
molecular excitada para dar dos
especies atmicas mas un fotn
UV

Estas lmparas dan lugar a un


espectro continuo utilizable en la
regin de 190-400 nm

Lmparas de filamento
de tungsteno
La fuente mas comn de radiacin
visible y de infrarrojo cercano. Es
til para la regin de longitud de
onda de 350-2500 nm
El limite inferior de la longitud de onda
lo determina la cubierta de vidrio que
aloja el filamento

Las lmparas de cuarzo/halgeno


contienen una pequea cantidad de yodo
dentro de la envoltura de cuarzo en la
que se aloja el filamento de tungsteno
El cuarzo permite que el filamento
trabaje a una temperatura de 3500 K, lo
que ocasiona intensidades superiores y
amplia el intervalo de la lmpara hasta la
regin UV

Diodos emisores de luz


Utilizados como fuentes en algunos espectrmetros de absorcin. Un LED es un
dispositivo que cuando tiene polarizacin directa produce energa radiante.
Material
Arsenurio de aluminio

900 nm

Fosfuro de arsnico y galio

650 nm

Fosfuro de galio

550 nm

Nitruro de galio

465 nm

Nitruto de galio e indio

450 nm

Las mezclas de estos compuestos se usan para


desplazar el mximo de la longitud de onda a
cualquier lugar en la regin de 375-1000 nm o ms.
Estos diodos producen un espectro continuo en un
intervalo angosto de longitudes de onda.
Estos diodos se pueden usar como fuentes
semicromticas o junto con filtros de interferencia
para hacer aun mas angosta la salida del espectro.

Tambin existen diodos emisores de luz blancos los cuales emiten un espectro
continuo en el intervalo de 400 a 800 nm.
Presentan vidas tiles mas largas y afectan menos el ambiente que las lmparas de
filamento de tungsteno

Lmparas de arco de
xenn
Lmparas que producen una
radiacin intensa al pasar
corriente a travs de una
atmosfera de xenn
El espectro continuo en un
intervalo de 200-1000 nm
con el mximo de
intensidad de alrededor de
500 nm
En algunos instrumentos la
lmpara funciona en forma
intermitente mediante
descargas regulares y as
obtiene altas intensidades.

Selectores de
longitud de onda
La mayor parte de anlisis espectroscpico requiere radiacin que consiste de un
grupo de longitudes de onda limitadas, angostas y continuas llamadas banda.
Idealmente, la salida desde un selector de longitud de onda seria radiacin de
una sola longitud de onda.

Filtros de
interferencia
Filtros
Selectores de
longitud de onda

Filtros de
absorcin
Monocromadores

El tipo mas
comn consta
de un vidrio
coloreado o
un colorantes
suspendido en
gelatina y
colocado
entre dos
laminas de
vidrio, poseen
mayor
estabilidad
trmica

Monocromadores

Filtros de absorcion

Filtros de interferencia

Dependen de
la
interferencia
ptica para
proporcionar
bandas
angostas de
radiacin

Estn
diseados
para ejecutar
el proceso del
barrido.
Estn
constituidos
de ranuras,
lentes,
espejos,
ventanas y
redes o
prismas.

Recipientes
de muestra
Las celdas o cubetas que contienen a las muestras,
deben ser de un material que permita el paso de la
radiacin de la regin espectral de inters.
Para trabajar en una regin UV
(debajo de 350 nm) se usan celdas de
cuarzo o slice fundida.

Vidrios de silicato
para regin de
350 a 2000 nm

Las mejores celdas


tienen ventanas
perpendiculares a la
direccin del haz

Para trabajos en
regin UV y vis la
longitud mas comn
de la celda es de 1 cm

Recipientes de
plstico usados para
regin visible

Detectores
Estos dispositivos son transductores que convierten la energa radiante en una
seal elctrica.
El detector ideal debera tener un amplio intervalo de longitudes de onda, una
elevada sensibilidad, una elevada relacin seal/ruido y una respuesta
constante.

Detectores de
fotones

Clulas
fotovoltaicas
semiconductoras
Fototubos
multiplicadores

Detectores

Detectores
trmicos
Detectores de
calor

Termopares

Detectores
piroelectricos

Procesador
de seal
Es un dispositivo electrnico que amplifica la seal electrnica del detector; adems puede
alterar la seal de corriente continua a alterna (o a la inversa), cambiarla de fase y
filtrarla. Asimismo puede ser necesario que realice operaciones matemticas con las
seales tales como diferenciar, integrar o convertir en logaritmo.

Tipos de instrumentos.

Instrumento de haz sencillo.


Consta de:
Una lmpara de deuterio o tungsteno.
Un filtro o un monocromador
Cubetas ajustadas.
Un transductor.
Un amplificador.
Un dispositivo de lectura.

Instrumentos de doble haz.


En este tipo de instrumento se forman dos haces
mediante un espejo en forma de V llamado divisor del
haz.

Instrumentos de doble haz temporal.


En este caso, los haces se separan en el tiempo mediante un
espejo giratorio en sectores que dirige primero todo el haz que
emerge del monocromador a travs de la celda de referencia y
luego a travs de la celda de la muestra.

Instrumentos de varios canales


Apareci en los aos 80.
El sistema dispersor es un
espectrgrafo de red colocado
despus de la celda de la muestra o
de la celda de referencia.
El detector en serie se instala en el
plano focal del espectrgrafo, en
donde choca la radiacin dispersada.
Los detectores en serie son fotodiodos
en serie o dispositivos de
acoplamiento de carga.

Fotmetros
Son a menudo ms convenientes, sencillos y fciles de
mantener y de utilizar que los espectrofotmetros ms
complejos.
Ventajas:
Elevado rendimiento energtico
Buena relacin seal ruido.

Fotmetros para la regin visible.

Fotmetros tipo sonda.


Utiliza fibra optica para transmitir la luz desde la fuente
hasta una capa de solucin que se encuentra entre el vidrio
sellado en el extremo de la fibra y un espejo.
La absorbancia se mide sumergiendo la sonda primero en el
solvente y luego en la solucin que se desea valorar.

Seleccin del filtro.


Los fotometros se suministran con varios filtros, cada uno de los
cuales transmite en diferentes zonas del espectro visible.

El espectro de
absorcin se toma
con un
espectrofotometro
de barrido.

El filtro que se
acerca ms a la de
la absorcin mx es
el que se elige.

*En general, el filtro ms apropiado ser el del color complementario al


de la solucin que se quiere analizar.

Espectrofotmetros.
Los hay desde los que miden solo region visible, otros
UV-vis y otros que tienen la capacidad de medir desde la
regin UV hasta la de IR cercano (190 a 3000 nm)

Instrumentos para la regin visible.


Trabajan en el intervalo de 380-800 nm.
Suelen ser de un solo haz.
La aplicacin ms comn de estos instrumentos es el anlisis
cuantitativo, aunque algunos de ellos proporcionan tambin
buenos espectros de absorcin.

Instrumentos de haz nico para la


regin UV-vis
Los extremos inferiores de varan de 190 a 210 nm y el
superior de 800 a 1000 nm.
Equipados con lmparas intercambiables de tungsteno,
hidrogeno o deuterio.
Utilizan tubos fotomultiplicadores o fotodiodos como
transductores.
Los sistemas de lectura son digitales.

Espectrofotmetros de haz nicos


computarizados.
Contienen un registrador y son controlados por
computadora.
Se realiza primero un barrido de con la sln de Ref, la
seal de salida del transductor se digitaliza y se
almacena en la memoria de la pc.
Se realiza el barrido de la muestra y se calcula su Abs
con la ayuda de los datos de la solucin de Ref
almacenados.

Instrumentos de doble haz.

Ventajas
Proveen un mejor aplanamiento de la linea de
referencia
Mejor estabilidad a largo plazo que los sistemas
de un solo haz.

Instrumento de doble haz manual.

*Intervalo de de 195 a 850 nm, ancho de banda de 4 nm, exactitud fotomtrica de


0.5% de T, reproducibilidad de 0.2% A,

*Intervalo de de 190 a 900 nm, ancho de banda de 0.2 a 4 nm, exactitud fotomtrica
de 0.00016 A; su radiacin parasita es menor que 0.0013% a 370 nm y 0.0074 % a 220
nm.

Instrumentos de doble dispersin.


El segundo monocromador
reduce los niveles de luz
parasita a 0.000041% a 370
nm y 0.00008% a 220 nm,
esto amplia el intervalo de
abs a 5.0 unidades de
absorbancia.

Espectrometra Infrarroja

La regin del infrarrojo del espectro abarca la radiacin entre 12


800 y 10 cm-1. Se divide en tres regiones:

Cercano

Medio

Lejano

Principios de los aos ochenta: Instrumentos de tipo


dispersivo, con redes de difraccin.

Infrarrojo medio: se utilizaban para el anlisis orgnico


cualitativo y la determinacin estructural, teniendo como
base los espectros de absorcin.
Actualmente, estudios microscpicos de superficies,
anlisis de slidos, etc.
ltima dcada: son de tipo de transforma de Fourier, hace
que la regin espectral del infrarrojo lejano sea accesible.

TEORA DE LA ESPECTROMETRA DE
ABSORCIN EN EL INFRARROJO.
Los espectros de absorcin, emisin y
reflexin en el infrarrojo, de especies
moleculares, son el resultado de los
distintos cambios energticos producidos
en las transiciones de las molculas de
unos estados de energa vibracional y
rotacionales a otros.

Introduccin
Proceso de absorcin- Cuando la frecuencia de la radiacin absorbida
coincide con la frecuencia de la vibracin molecular.
CAMBIOS EN EL DIPOLO DURANTE LAS VIBRACIONES Y LAS
ROTACIONES.
La absorcin en el infrarrojo se limita a especies moleculares para las
cuales existen pequeas diferencias de energa entre los distintos estados
vibracionales y rotacionales.
Para absorber radiacin en el infrarrojo una molcula debe sufrir un
cambio neto en el momento dipolar como consecuencia de su movimiento
de vibracin o rotacin.
Solo en estas circunstancias, el campo elctrico alterno de la radiacin
puede interaccionar con la molcula y provocar cambios en la amplitud de
algunos de sus movimientos.
El momento dipolar est determinado por la magnitud de la diferencia de
carga y por la distancia entre los dos centros de carga.

Tipos de vibraciones moleculares


Tensin- Supone un cambio continuo en la distancia interatmica a lo largo
del eje del enlace entre dos tomos.
Flexin- Se caracteriza por un cambio continuo en la distancia interatmica
a lo largo del eje del enlace entre dos tomos.

Fuentes y detectores de radiacin en el


infrarrojo.
Los instrumentos para la medida de la absorcin en el infrarrojo
requieren una fuente de radiacin continua y un detector sensible a
la radiacin en el infrarrojo.
FUENTES
Constan de un slido inerte que se calientan elctricamente a una
temperatura entre 1,500 y 2000 K.
A esta temperatura la mxima intensidad radiante se produce entre
5000 y 5900 cm-1

Emisor de Nernst
- Constituido por xidos de tierras raras, forman un cilindro de
1 a 2 mm de dimetro y 20mm de longitud.
- En los extremos del cilindro se llenan unos cables de platino
para permitir la conexin elctrica, formando un conjunto que
equivale a un elemento de calentamiento resistente.
-Alcanza temperaturas entre 1200 y 2200 K.
-Coeficiente trmico muy negativo.

Fuente Globar
Es una varilla de carburo de silicio, 50mm de longitud y 5mm de
dimetro. Se calienta elctricamente ( 1,300 a 1500 k).
Coeficiente trmico positivo.
Es necesario enfriar los contactos elctricos con agua para evitar la
formacin de un arco.

Fuente de filamento incandescente


Intensidad menor.
Es un espiral muy apretado de alambre de nicromo, se calienta por
el paso de una corriente elctrica a 1100 K.
Tiene una vida ms larga que el Globar.

Arco de mercurio
Es de alta presin.
Consta de un tubo de cuarzo que contiene vapor de mercurio a una
presin mayor que una atmsfera.
El paso de la electricidad a travs del vapor origina una fuente de
plasma interna que proporciona una radiacin continua en el IR
lejano.

Lmpara de filamento de Wolframio


Es una fuente adecuada para la regin del infrarrojo cercano de
4000 a 12800 cm-1.

Fuente lser de dixido de carbono


Se utiliza como fuente de IR un lser sintonizable de dixido de
carbono.
Produce una banda de radiacin en el intervalo de 900 a 1100 cm-1,
consta de 100 lneas discretas y poco espaciadas.
Intervalo de longitud de onda entre 900 y 1100cm-1.
La potencia radiante en cada lnea es de varios rdenes de magnitud
mayor que la de las fuentes de cuerpo negro. Es til para la
determinacin de amoniaco, butadieno, benceno, etanol, dixido de
nitrgeno y tricloroetileno, ya que es rica en bandas de absorcin
producidas por los modos de tensin interactivos del dixido de
carbono.

Fuente lser de dixido de carbono

DETECTORES DE INFRARROJO
Son de tres tipos:
1. Trmicos
2. Piroelctricos ( detectores trmicos muy especializados).
3. Fotoconductores

Detectores trmicos
Su respuesta depende del efecto calorfico de la radiacin.
Emplean para la deteccin de todas las longitudes de onda del IR,
excepto para las ms cortas.
Se mide el incremento de la temperatura que resulta cuando un
pequeo cuerpo negro absorbe la radiacin.
La capacidad calorfica del elemento absorbente debe ser lo ms
pequea posible para producir un cambio de temperatura
detectable ya que la potencia radiante del haz de un
espectrofotmetro de infrarrojo en muy baja.

Termopares

Consta de un para de uniones que se forman soldando los extremos de dos piezas
de un metal como el bismuto, a otro metal distinto como el antimonio. Entre las dos
uniones se genera un potencial que vara en funcin de su diferencia de
temperatura.
La unin del detector sobre la que incide la radiacin del infrarrojo se realiza con
alambres muy finos o por evaporacin de los metales sobre un soporte no
conductor.
Es capaz de responder a diferencias de temperatura de 10-6 K.

Balmetros
Es un tipo de termmetro de resistencia construido con lminas de
metales como platino o nquel, o con un semiconductor.
Presentan un cambio de resistencia grande con la temperatura.
El elemento sensible es pequeo y est ennegrecido para absorber
el calor radiante.
No se utilizan tanto.
Detecta radiacin a un intervalo de 5 a 400 cm-1.

Balmetros

Detectores piroelctricos
Se construyen con lminas cristalinas de materiales
piroelctricos, que son aislantes con propiedades trmicas y
elctricas especiales.
El material ms usado es el sulfato de triglicina.
Al colocar el cristal polielctrico entre dos electrodos, uno de
los cuales es transparente a la radiacin del IR, se produce
un condensador que depende de la temperatura.

Detectores piroelctricos
Al incidir la radiacin en el infrarrojo cambia la
temperatura y se altera la distribucin de carga a
travs del cristal, lo que se puede detectar como una
corrientes en un circuito elctrico externo conectado
a las dos caras del condensador.
La magnitud de esta corriente es proporcional al
rea de la superficie del cristal y a la velocidad de
cambio de polarizacin con la temperatura.

Detectores fotoconductores
Constan de una delgada pelcula de un material semiconductor como
sulfuro de plomo, telururo de cadmio/mercurio o antimoniuro de indio,
depositada sobre una superficie de vidrio no conductora y sellada en
cmara al vaco para proteger al semiconductor de la atmsfera.
Los fotoconductores de sufluro de plomo son los transductores ms
utilizados para la regin espectral del infrarrojo cercano de 10,000 a
333 cm-1
Pueden funcionar a temperatura ambiente

Detectores fotoconductores
En estos materiales, la absorcin de radiacin impulsa electrones de
valencia no conductores a estados conductores de mayor energa,
disminuyendo as la resistencia elctrica del semiconductor.
Se coloca en serie con una fuente de potencial y una resistencia de
carga y la cada de potencial a travs de la resistencia de carga sirve
como medida de la potencia del haz de radiacin.

INSTRUMENTOS DE INFRARROJO
Para los instrumentos de Infrarrojo existen 3 tipos disponibles
comercialmente:
I.

Espectrmetros dispersivos de red, utilizados principalmente


para el anlisis cualitativo.

II.

Instrumentos multiplex, que emplean la transformada de Fourier.

III. Fotmetros no dispersivos, para la determinacin cuantitativa de


especies orgnicas de la atmsfera.

Espectrmetros de transformada de
Fourier.
La transformada de fourier se utiliza para el tratamiento de los datos.
COMPONENTES
Mecanismo de traccin
El soporte del espejo est suspendido sobre cojinetes de aire sujetos
a unos manguitos de acero inoxidable. Este montaje se acciona por
medio de un motor de traccin lineal y una bobina electromagntica
semejante a la de un altavoz, el espejo se mueve por medio de una
velocidad constante por medio de una corriente creciente en la
bobina. Al alcanzar el extremo final, el espejo regresa rpidamente al
punto de partida para el prximo barrido mediante una rpida
inversin de la corriente.

Espectrmetros de transformada de Fourier


Para que el sitema del espejo funciones satisfactoriamente se requiere:
Que el sistema pueda muestrear el interferograma a intervalos de
desfase exactamente definidos.
Que se pueda determinar con exactitud el punto de desfase cero para
hacer posible el promedio de las seales.
Esto puede lograrse mediante el uso de tres interfermetros en lugar
de uno.

Espectrmetros de transformada de Fourier


Sistema de referencias de franjas lser

Proporciona la informacin para el intervalo de muestreo.


Consta de un lser de helio/nen, un sistema interferomtrico con
dos espejos, un divisor del haz y un detector.
Proporciona intervalos de muestreo muy reproducibles y espaciados.

Instrumentos no dispersivos.
Para el anlisis cuantitativo en el IR se utilizan
fotmetros de filtro bsico y otros que emplean
filtros de cua en lugar de un elemento
dispersante, algunos no estn equipados con
ningn dispositivo para seleccionar la .

Fotmetros de filtro.
Es un instrumento controlado por computadora.
La fuente es un filamento de alambre de nicromo
y el transductor es un dispositivo piroelectrico.
Se han detectado muchos gases a escalas de
menos de una ppm.

Fotmetros sin filtro


Son utilizados para controlar
un componente determinado
en corriente de gases.
Este tipo de instrumento es
muy selectivo debido a que
el calentamiento del has del
sensor se produce solo a
partir de la estrecha porcin
del espectro de radiacin.

Analizadores de correlacin de filtro.


Estn equipados con un filtro giratorio de gas a
travs del cual pasa el haz IR.
El filtro tiene dos compartimientos, uno para el
gas en estudio y otro para un gas no absorbente
como el nitrgeno.

Bibliografa
Skoog, D. A., Holler, J. H., Nieman, T. A. Principios de Anlisis
Instrumental, 5a Edicin. McGraw Hill. Madrid, Espaa. 2001.
https://prezi.com/l0gpilljwurj/espectrofotometria-ultravioleta-vis
ible/
http://www.ehowenespanol.com/historia-espectrofotometria-sob
re_474099/