MODIFICACIN

GENTICA DE LAS
PLANTAS
Melissa Sarmiento Ramrez
Magdalena Reinoso
Luca Quemada Garrido

BIOTECNOLOGIA VEGETAL

Tcnicas de ingeniera gentica + cultivo de tejidos

vegetales in vitro

Ingeniera gentica:
- Tcnicas de manipulacin ADN
-Desarrollo (ADN-Watson y Crick):nueva o moderna
biotecnologa

Cultivo in Vitro:
-Partes de plantas y plantas enteras en medios
aspticos y ambientes controlados (luz y T)
-Totipotencia: capacidad de clulas vegetales
( no todas) de regenerar plantas enteras.
- Protoplastos: Biotecnologa de hibridacin
somtica (hbridos entre especies diferentes que
comienza con fusin de protoplastos y posterior
regeneracin de plantas enteras).

TRANSFORMACIN GENTICA DE LAS

PLANTAS
Agrobacterium tumefasciens

Agallas de la corona (Plasmido Ti)

Material gentico: cromosoma y varios plasmidos
Transfiere porcin del plasmido Ti ( T-DNA) al genoma de la clula vegetal, donde se integra y expresan genes : divisin
y proliferacin de cel vegetales sin control:Tumor
control:Tumor

-Genes iaaM-iaatt
-Gen ipt
-Otros
Particularidades nicas de Agrobactrium:
- Transferir fragmento de DNA e integrarlo
en cel vegetal.
- Genes DNA reconocidos por cel vegetal.
- Genes que codifican enzimas
metabolismo de opinas.

PROCESO DE INFECCION:
T-DNA y regin vir (plasmidoTi) + genes virulencia chv
(cromosoma)
-T-DNA delimitado por repeticiones de 25pb (borde derecho
e izquierdo)
-Regin vir fuera del T-DNA, formada por operones (genes
cuyos productos regulan la expresin de otros genes)

ETAPAS DEL PROCESO

1._ Reconocimiento: genes chv, movimiento quimiotctico bacteriano y

unin a receptores especficos de clula vegetal.
2._ Vir A se expresa.
3._ Unin Vir G a los dems genes vir y activacin
4._ Vir D1-D2 (endonucleasas) . Liberan cadena simple de DNA. Formacin del
complejo T.
5._ Paso del complejo T por el canal formado por Vir B.
6._ Entrada al ncleo con previo reconocimiento de SLN por D2 y D1.
7._ Integracin del T-DNA al genoma vegetal.

GENES DE T-DNA-SUSTITUCION POR

FORANEOS
- Se demuestra que los genes forneos se pueden
transferir, integrar y expresar en plantas usando
Agrobacterium tumefasciens como vehculo.
- VECTORES DE TRANSFORMACION: plasmidos con
informacin esencial para replicarse, transferirse e
integrarse y posibilitar expresin de genes forneos
en genoma de la cel vegetal.

TIPOS DE VECTORES:
1._ VECTORES COINTEGRADOS: Cuando plasmido de E.coli se transfiere en agrobacterium, el Dna forneo de coli se integra en los
bordes de su T-DNA por recombinacin homologa dando lugar a: Plasmido con regin vir y el T-DNA con el Dna forneo

2._VECTORES BINARIOS: Plsmido Ti desarmado con solo regin vir y en un

segundo plsmido bordes de l T-DNA con origen replicacin funcional en
ambas bacterias. Este ltimo mas pequeo y manipulable para introducir genes
forneos entre bordes.

Genes marcadores permiten reconocer y seleccionar

clulas transformadas:
1.

2.

Marcadores de seleccin: permiten a cel vivir en

agente selectivo (antibitico o herbicida)
Marcadores informadores: Codifican enzimas que
con sustrato adecuado reaccionan dando una
caracterstica nueva a las clulas.
*Ejemplo: B-glucuronidasa con un sustrato da
color azul y con otro fluorescente.

LOS PROCESOS DE REGENERACIN Y TRANSFORMACIN SON

DISTINTOS PARA CADA ESPECIE VEGETAL:
- Transformar una planta no indica que por el mismo procedimiento se pueda
transformar una especie muy prxima.
- Depende de la relacin patgeno/husped (mayora dicotiledneas)
- Genes regin vir y algunos del T-DNA como los de virulencia determinan
genoma de especies especificas para cada cepa bacteriana.

APLICACIONES
BIOTECNOLGICAS

-Resistencia a plagas y enfermedades

-Resistencia a condiciones ambientales

extremas

-Integracin planta y microorganismos

-Las plantas como biofactoras

-Mejora de la calidad en productos agrarios

Plagas y enfermedades
Estn sometidas a:
Agentes infecciosos

Organismos
consumidores

Plagas y enfermedades

Agentes qumicos

Programas de control
a plagas, mediante
organismos
depredadores al
organismo perjudicial.

Mejoras genticas

Condiciones ambientales extremas

La disminucin en el rendimiento de cultivos se
debe al estrs:

Bitico
Abitico
Este ltimo es el responsable de las mayores
prdidas de productividad.

A travs de la ingeniera gentica, podr

aumentar la torelancia y desarrollar estrategias
hacia el estrs.

Para ello es necesario conocer los mecanismos

de defensa de las plantas hacia el estrs

Interaccin planta-microorganismo
Los microorganismo se agrupan segn relacin:
Perjudiciales
Beneficiosas
Sin efecto directo
Compiten por nutrientes y espacio.
Ej. Rizobacterias

Perjudiciales

Dalbulus maidys la chicharrita adulta del maz

Beneficiosas

Rhizobium en leguminosa

Las plantas como biofactoras

Las plantas son fuente de alimento,

combustible, y fibras.

Los avances en vitro del ADN y la

transformacin de diferentes especies han
permitido la creacin de plantas transgnicas .

Plantas de Ananas sativus

Agave sp.

Han ido encaminadas al desarrollo de plantas

con caractersticas agronmicas mejoradas.

Plantas tolerantes a herbicidas, virus,

insectos
A mejorar el producto extrado de la planta:
como en el tomate, las patatas

Tolerancia a los herbicidas

Parcela de soya infectada con herbicida

Roundup (izquierda)

Cultivos Bt resistentes a los insectos

Maz hbrido con un gen Bt (izquierda)

y un hbrido sensible al barrenador
europeo del maz (derecha).

Sus esporas contienen una protena cristalina

(Cry). En el intestino del insecto, la protena se
descompone y libera una toxina que se une al
revestimiento intestinal y crea poros as muere
el insecto.
En los cultivos Bt se ha incorporado una
versin modificada del gen Cry bacteriano en
el ADN de la propia planta, de tal modo que la
maquinaria celular de la planta produce la
toxina.

Otra utilidad en las plantas como

biofactorias, es la de producir enzimas
industriales, antgenos para las vacunas,
anticuerpos, pptidos de uso
farmacutico

Mejora de productos agrarios

Para el incremento de la produccin de las

cosechas y la disminucin del uso herbicidas
Beneficiados los agricultores y la sociedad
Objetivos: obtencin de productos con menos
contaminantes agroqumicos y de mejor
calidad
Mejorar en el tamao, valor nutritivo,
extensin de vida

GENES EN ANTISENTIDO PARA

RESTABLECIMIENTO DEL FRUTO

Muchos genes han sido

introducidos en variedades
de inters agrnomo con
objetivos de mejora.

En plantas transgnicas se
ha conseguido:
- resistencia y mayor
tolerancia a plagas,
enfermedades, herbicidas.
- mejora de la calidad
nutritiva.

EL TOMATE DE LARGA VIDA

En tomates cosechados, la
enzima poligalacturonasa
degrada las pectinas
(componentes esenciales
de muchas frutas)

Consecuencia:
reblandecimiento del fruto
y deterioros en su aroma y
sabor.

Procedimiento:
1 Las plantas transgnicas de tomate se han
transformado en la regin codificadora del gen de la
enzima poligalacturonasa.
2 El gen se ha insertado al revs en el mdulo de
expresin, es decir, en antisentido.
*Antisentido: en la doble cadena de DNA:
- la guanina se sustituye por citosina y la
citosina por guanina.
- la adenina se sustituye por timina y la timina por
adenina.

3 El gen en antisentido transcribe un RNAm con

secuencia complementaria al RNAm transcrito por el
gen de la poligalacturonasa.
4 Se tiende a la formacin de una doble cadena
entre ambos RNAm y as, bloquear parcialmente la
sntesis del enzima.
5 Debido al efecto previo, se consigue un retraso en
la degradacin de las pectinas y, por tanto, un tomate
que tarda mucho ms tiempo en reblandecerse.

Retraso de la maduracin en el
tomate

Maduracin: conjunto de cambios externos, de sabor

y textura que un fruto experimenta cuando completa
su crecimiento.
Segn el proceso de maduracin, el tomate es un
fruto climatrico, es decir, acumula almidn durante
su crecimiento y, en la maduracin, lo hidroliza a
monosacridos, glucosa y fructosa principalmente. Se
produce mucho gasto de energa y se experimenta un
aumento en la respiracin.

Por transformacin con genes en antisentido, se ha

conseguido bloquear parcialmente la sntesis de
etileno (hormona de la maduracin).

Procedimiento:
- Mediante la tcnica antisentido, se ha
conseguido bloquear la sntesis de ACC-sintasa
no se sintetiza etileno no se produce
maduracin.

Restauracin de la maduracin:
- por tratamiento con etileno exgeno cuando los
frutos se ponen a la venta.