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Introduccin
La fibrosis es un proceso clave en la curacin de heridas.
Los estmulos pro-fibrticos, como la lesin de las clulas
epiteliales y la apoptosis, contribuyen a la activacin de
fibroblastos circundantes e inducen la progresin de la
fibrosis
La produccin
exagerada de
colgeno puede dar
como resultado
fibrosis tisular.
La 17-N-alilamino-17demetoxigeldanamicina (17AAG)
Materiales y Mtodos
Cultivo celular, tejidos humanos y transfeccin de
plsmidos
Materiales y Mtodos
Cultivo celular
Medicin de la
viabilidad celular
Transfeccin transitoria
Incubaron con TGF- humano recombinante.
Incubaron con 17AAG por 12 horas
Aalisi RT-PCR y Western blot
La viabilidad de las clulas fibroblsticas drmicas se determin usando el ensayo CCK-8 siguiendo el
protocolo del fabricante.
Se prepararon muestras de bloques embebidas en parafina. La desparafinizacin y la rehidratacin se realizaron en soluciones graduadas de
alcohol.
Se aplic metanol que contena perxido de hidrgeno al 1% a la lmina para inhibir la actividad de la peroxidasa endgena.
Los portaobjetos se incubaron con anti-colgeno y anti-Hsp 90 durante la noche a 4 C.
Las lminas se incubaron durante 30 minutos con el anticuerpo secundario diluido contra inmunoglobulina de conejo.
Inmunohistoqumica Se aplic clorhidrato de cromgeno 3,3'-diaminobenzidina para visualizar los complejos inmunes unidos a anticuerpos.
El control negativo se ti con un anticuerpo de isotipo apareado.
Materiales y Mtodos
Anlisis estadstico
Resultados y Discusin
Los efectos de Hsp 90, 17AAG y TGF- sobre
la viabilidad celular
Resultados y Discusin
Bloqueo de la sntesis de colgeno inducida
por TGF- con 17AAG
Resultados y Discusin
Resultados y Discusin
Resultados y Discusin
La sobreexpresin de Hsp 90 induce la activacin de la va Smad
Resultados y Discusin
La expresin de Hsp 90 y la deposicin de
colgeno aumentan en los tejidos queloides
humanos
Conclusin