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Bibliografia:
Genes VII - Benjamin Lewin
Biologia Molecular Bsica-Arnaldo Zaha
Lenhinger Principles of Biochemistry (3a. Ed.)
Replicao
do DNA
O mecanismo de
replicao est
baseado no
pareamento das
bases da dupla
hlice do DNA.
A estrutura do
DNA contm a
informao
necessria para
perpetuar sua
sequncia de
bases
NH4Cl
15
Experimento realizado
por Meselson & Stahl
em 1958
Cultivo em meio
14
NH4Cl
Purificao do DNA
seguida de
centrifugao em
gradiente de CsCl
A replicao
bidirecional
A velocidade da forquillha de
replicao bacteriana
50000pb/min
Um nica origem de replicao
em E.coli (OriC, 245 pb)
Fita descontnua
Polimerases de DNA:
As enzimas que
sintetizam DNA
A sntese de DNA
ocorre pela adio de
nucleotdeos a
extremidade 3OH da
cadeia em crescimento. O
precursor da sntese o
desoxiribonucleosdeo 5
trifosfato
Sentido da sntese
sempre 5 3
A replicao um
processo extremamente
fiel. As DNApolimerases tem atividade
revisora
Desoxiribonucleosd
eo 5trifosfato
(precursor)
Fita sendo
polimerizad
a
Fita molde
correto
Pareamento de
bases
incorret
o
Pol I
+
+
+
PolII
+
+
-
Nmero de subunidades
Tamanho em kDa
1
103
4
90
10
~900
Velocidade de
Polimerizao(nt/seg)
16-20
40
250-1000
Polimerizao 5 3
Exonuclease 3 5
Exonuclease 5 3
Processividade
3-200
(nt adicionados antes
da dissociao do molde)
1500
PolIII
+
+
-
500000
A subunidade
Beta da
DNApolimerase
III envolve o
duplex das
fitas-filhas
OriC do
cromossomo
de E.coli
DnaC
HU
Primase (DnaG)
Fita descontnua
Fita contnua
Fragmentos
de Okasaki
ocorrem na fita
descontnua
A DNA
polimerase III
responsvel
pela sntese da
maior parte do
DNA
A DNA
polimerase I
remove o
primer de RNA
e preenche as
lacunas
A DNA
ligase sela as
quebras
DnaB (helicase)
Desenrola o DNA
Primase (DnaG)
DNA Polimerase I
DNA Ligase
Liga os fragmentos
DNA girase
Superenrolamento
O complexo de
replicao
A protena DNA B
(helicase) responsvel
pelo movimento para
frente da forquilha
Cada core cataltico
da DNA PolIII sintetiza
uma das fitas-filhas
O primossomo afasta
uma das fitas molde
Protenas SSB
mantem as fitas
parentais separadas
Forquilha
sentido
antihorrio
Terminao
Forquilha
sentido
horrio
Terminao
Duplicao dos
cromossomos
Separao dos
cromossomos e
diviso celular