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UN PROTOCOLO DE EMBRIOGNESIS

SOMTICA PARA LA REGENERACIN Y


CARACTERIZACIN IN VITRO DE
Laelia anceps ssp. dawsonii
Lee E., Laguna A., Murgua J., Iglesias L., Garca B.,
Escobedo D., Martnez Y., Barredo F. y Santana N.

Los
medios
se
suplementaron
con
mioinositol
(100
mg
L-1),
sacarosa (30 g L-1), y se
solidificaron con Phytagel
(2.5 g L-1).

MATERIALES Y MTODOS
a. Material vegetal y medios
Plantas
de cultivo
Fuente de
explantes
Composic
in del
medio de
cultivo

madre

de

la

especie
Polinizacin natural
Cpsulas
cosechadas
antes de dehiscencia
Semillas sembradas in
vitrominerales de:
Sales
Murashige y Skoog
5.7
(MS)
Knudson C (KC)
Vacin y Went (VW)
4.8

b. Induccin de callo embriognico

MS y VW

Reguladores
de
crecimiento:
cido
naftalnactico
(ANA)+
6-bencilami-nopurina
(BAP)+
cido
indol
actico
(AIA) y
ANA+BAP (2.0 mg L-1
de cada uno).

Los cultivos se incubaron en


fotoperiodo de 16 h (20.2
mol m -2 s -1 , provista por
lmparas de luz fluorescente
tipo blanco-fro) y 8 h de
oscuridad, a 23 1 C. A los
45 d se evalu la formacin
de callos con capacidad
morfognica.

Para la induccin de callo se utilizaron los medios de cultivo MS y VW,


suplementados con dos combinaciones de reguladores del crecimiento:
cido naftalnactico (ANA)+6-bencilami-nopurina (BAP)+ cido indol
actico (AIA) y ANA+BAP (2.0 mg L-1 de cada uno). Estos medios se
esterilizaron y dosificaron a razn de 15 mL en cajas de Petri
esterilizadas, donde se sembraron 5 mg de semillas maduras. En total se
utilizaron 20 cajas de Petri para cada tratamiento. Los cultivos se
incubaron en fotoperiodo de 16 h (20.2 mol m -2 s -1 , provista por
lmparas de luz fluorescente tipo blanco-fro) y 8 h de oscuridad, a 23 1
C. A los 45 d se evalu la formacin de callos con capacidad
morfognica.