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Mecanismos de

Recombinacin Gentica y
Elementos Genticos
Mviles
BIO 363 Gentica Molecular
II Semestre 2014
Sergio Marshall

Estructura y funcin del


genoma bacteriano
El material gentico de las bacterias
se encuentra en el citoplasma, se le
denomina como nucleoide, cuerpo
nuclear, regin nuclear.
Esta compuesto de alrededor de
80% de DNA, 10% de RNA y 10% de
protenas (RNA polimerasa).

RECOMBINACION GENETICA
Es el proceso por el que los elementos
genticos contenidos en dos genomas
separados se juntan en una unidad.
Trae como consecuencia un cambio.
Se transfieren genes completos, grupos
de genes o cromosomas completos.

Intercambio gentico y
recombinacin
Unidireccional: De donante a receptor
Puede ser entre especies distintas
Mecanismos:
1. Transformacin
2. Conjugacin
3. Transduccin

Formas de Recombinacin
Transformacin: el DNA libre se
incorpora a una clula.
Transduccin: La transferencia del DNA
donador esta mediada por un virus.
Conjugacin: la transferencia de DNA
implica contacto clula clula y la
presencia de un plasmido y de una
estructura llamada pili.

Transformacin
Definicin: Transferencia de genes
por incorporacin ADN exgeno
Factores que influyen:
Tamao, concentracin y estado del
ADN
Estado de Competencia del receptor
(Bacillus, Haemophilus, Neisseria,
Streptococcus)

Transformacin
Pasos
- Adsorcin del ADN
- Penetracin
- Recombinacin

Caractersticas transformadas
Antgenos
- Capacidad fermentacin
- Resistencia antimicrobianos
-

TRANSFORMACION
Este descubrimiento fue uno de los
hechos mas relevantes, pues
condujo a experimentos que
probaron que el DNA es el material
gentico. Fred Grifth (1920).
Trabajos con Streptococcus
pneumoniae.

Transformacion: Etapas
1. Unin del DNA: protena asociada a la
membrana: autolisina y nucleasas.
2. Incorporacion del DNA:
Primero se fija reversiblemente, luego
se vuelve irreversible.
3. Integracion del DNA: protena de
unin, en el cromosoma protena RecA

No todas las bacterias tienen esta


capacidad, sino clulas competentes
que son capaces de tomar una
molcula de DNA y lo integran a su
cromosoma.
Intervienen: protenas especiales que
intervienen en el trasporte e
incorporacin del DNA.

Cuando una clula es capaz de


tomar una molcula o un fragmento
de DNA y transformarse se
denomina clula competente.
Solo algunas cepas poseen esta
caracterstica, parece ser una
propiedad hereditaria.

Experimento de Griffith

Neumococo vivo
capsulado. (S)

Ratn muerto
Se aslan cepas lisas

Neumococo muerto
por calor

Ratn vivo.

Neumococo vivo
rugoso (R) no
capsulado

Ratn vivo.

Neumococo (R)
vivo +
Neumococo muerto

Ratn muerto: se aslan


cepas S

Conjugacin
Definicin: transferencia
gentica entre dos bacterias que
requiere contacto fsico celular
Bacterias que intervienen:

Donor

Donante
Receptor

Recipient

Plsmidos

Definicin: Elemento
gentico
extracromosmico
capaz de replicarse de
forma autnoma

Caractersticas de los Plsmidos

Replicacin autnoma
Estabilidad
Incompatibilidad
Transferencia:
Plsmidos conjugativos
Plsmidos no conjugativos

Integracin (Episomas)
Confieren distintas propiedades
fenotpicas

Conjugacin en Gramnegativos

Conjugacin en Gramnegativos
1. Formacin de
pares efectivos
2. Transferencia de
ADN

F+

F-

F+

F-

F+

F+

Origen de
transferencia
Replicacin
cadenas ADN

F+

F+

Conjugacin: Importancia
Bacterias Gram Resistencia antimicrobianos
Diseminacin rpida

Bacterias Gram +
Produccin de factores de adherencia
Resistencia antimicrobianos

CONJUGACION
Implica el contacto clula clula.
El material gentico transferido puede
ser un plasmido, o una porcin del
cromosoma.
Una clula donadora trasmite la
informacin gentica a otra clula, la
receptora.
La clula donadora posee el pili o pelo
sexual.

conjugacion
La capacidad de la clulas para
actuar como donantes se debe a la
presencia de factor f o factor de
fertilidad.
Las clulas que carecen de factor f,
son receptoras.

TRANSDUCCION
El DNA se transfiere de una clula a
otra por medio de un virus:
bacterifago.

Transduccin
Definicin:
Transferencia de genes
bacterianos a travs de
un bacterifago
Importancia
Comn en bacterias
Gram+
Conversin lisognica

Estructura Fago
Cabeza

Collar
contrctil

Cola

Fibras
Placa
basal

Infeccin bacteriana por Fagos

1.
2.
3.
4.

Adsorcin
Unin Irreversible
Contraccin del collar
Inyeccin del ADN

Ciclo Ltico de Multiplicacin del Fago


Eclipse
Acumulacin intracelular
Lisis y liberacin

Ciclo Lisognico de Multiplicacin del Fago


Integracin (Profago)
Replicacin simultnea

Transduccin Generalizada
Ciclos lticos
Cualquier gen del donante tiene la misma
probabilidad de ser transferido

Transduccin Especializada
Ciclo lisognico

Ciclo ltico

slo se transducen genes pegados al sitio de insercin


del profago

Transduccion

Transduccin
Cuando un fago infecta a una
bacteria, capta fragmentos del
genoma de la clula hospedadora.
Al infectar a otra bacteria el fago
transductor puede transferir sus
propios genes y tambin los de la
clula hospedadora de la cual
procede.

Transduccin
Puede ocurrir de 2 formas:
1. Transduccin generalizada:
Cualquier porcin del genoma
bacteriano pasa a formar parte del
genoma de la partcula vrica.

Transduccin
2. Transduccion especializada:
El DNA de una regin especifica del
cromosoma del hospedador se integra
directamente en el genoma del virus.
No todos los fagos pueden transducir,
ni todas las bacterias son
transducibles.

Transduccin
El mecanismo de transduccin fue
descubierto por Zinder y Lederberg
(1952).
Estudiando la recombinacin
gentica entre diferentes cepas de
Salmonella typhimurium.

PLASMIDOS
Son elementos genticos que se
replican independientemente del
cromosoma.
Se encuentran dentro de la clula.
Existen varios tipos de plasmidos.
En E coli, se han aislado mas de 300

Tipos de plasmidos
P. conjugativos: codifican pili
sexuales y protenas necesarias para
la transferencia de DNA.
P. R (resistencia a los antibiticos,
mercurio).
P. Produccin de bacteriocinas y
antibiticos.

Tipos de plasmidos
Plasmidos de funciones fisiolgicas:
Utilizacin de urea,
Fermentacin de carbohidratos.
Produccin de pigmentos.
Plasmidos de virulencia: produccin
de toxinas, enzimas, tumores.

E coli, posee un plasmido


conjugativo llamado Factor F:
- Capacidad para sintetizar pili.
- Movilizacin del DNA para su
transferencia.
- Alteracin de receptores de la
superficie de la clula.

Terapia genica

MUTACION
Es un cambio hereditario en la
secuencia de bases del acido nucleico
que constituye el genoma de un
organismo.
Fenotipo: las caractersticas
observables de un organismo.
Genotipo: constitucin gnica precisa
de un organismo. (conjunto de genes)

MUTACIONES
Cepa silvestre: cepa aislada de la
naturaleza.
Se pueden obtener mutantes de una
cepa silvestre o de una derivada de esta.
Pueden ocurrir cambios perjudiciales,
neutros o beneficiosos.

MUTACIONES
M. Espontneas.
Ocurren en la naturaleza, sin ser
provocadas.
Ej: efectos de la radiacin natural, que
alteran la estructura de las bases de DNA.
Errores en el apareamiento de bases.
Tipos de mutantes: No capsulado, inmvil,
fermentacin de azucares.

MUTACION
Mutaciones inducidas por mutgenos,
sustancias que inducen a mutaciones.
Mutgenos qumicos: reaccionan
directamente con el DNA, ocasionando
cambios qumicos, en las bases.
Acido nitroso, bromuro de etidio etc.
Mutgenos fsicos: rayos UV, rayos X.

Mutaciones
Definicin: cambio heredable en la
secuencia de nucletidos del genoma
de un organismo
Pueden ser:
Inducidas o Espontneas

Se expresan raramente
Se favorecen cuando se dan ventajas
selectivas

Mutaciones : Tipos
Puntual:
Transicin: purina por purina o
pirimidina porpirimidina (Ej.: A por G o
C por T)
Transversin: purina por pirimidina o
viceversa

Insercin/Deleccin
Inversin

Elementos Genticos Transponibles


Definicin: Segmentos de ADN capaces de
mudarse de una localizacin a otra
Propiedades
Movimiento al azar
No poseen autorreplicacin
Transposicin mediante recombinacin
especfica
Transposasa

Tipos de Elementos Transponibles


Secuencias de Insercin (IS): Elementos que
portan slo los genes de transposicin
ABCDEFG

Transposasa

GFEDCBA

Transposones (Tn): Elementos que portan otros


genes adems de los de transposicin (IMPORTANTES
en R)