Efecto pH sobre Velocidad

de reaccin enzimtica
Los sitios activos estn formados por enlaces ionizables
Deben encontrarse en la adecuada forma inica para
mantener la conformacin del centro activo
Los sustratos contienen formas ionizables y slo una
forma inica del sustrato puede enlazar a la enzima
El efecto del pH puede verse en curvas de pH vs
Velocidad pero son incompletos o dan informacin
inexacta
Habra que determinar porqu la velocidad disminuye a
los lados de la velocidad mxima alcanzada

Disminucin de pH

Vm

Vm

Formacin de especies inicas

inadcuadas
Desnaturalizacin enzimtica

Considerar pre incubacin para cada

valor de pH a ser testeado
Tiempo de preincubacin equivalente al ensayo total
Formacin de
especies
inicas
inadecuadas
Proceso de
desnaturalizaci
n
5

En este caso una

variacin
De pH entre 5 a 8 no
tiene efecto irreversible
sobre la actividad de la

Efecto pH sobre Velocidad de

reaccin enzimtica
La curva ideal que refleja una campana dispone de
dos componentes que representan las curvas de
disociacin de al menos dos grupos
significativos en la catlisis
V

V
pptimo

B
+

Residuo
His

Residuo
Glu

La composicin de los dos efectos refleja la curva de pH

Efecto [E] sobre Velocidad

de reaccin enzimtica
La [E] es un factor significativo porque a muy bajas []
puede disociarse en oligmeros o monmeros menos
estables

Las [E] a nivel intracelular oscilan entre 1 x 10-12

10

-7 M

a 1x

La velocidad de reaccin es proporcional a la [E], esta

relacin puede utilizarse para cuantificar la
concentracin de E presente
El efecto es linear siempre que se midan velocidades
inciiales verdaderas en un perodo corto de tiempo

Efecto de [E] sobre velocidad de reaccin

A una [S] fija
> [E3]
[E3]
[E3]

> [E2] > [E1]

[E2]

[E1]

to

t1

t2

Una [E] > E3 no tendr respuesta linear no para t1

Efecto de [E] sobre velocidad de reaccin

A una [S] fija
V =
]
V =

Vm . [ S ]
Km + [ S
Kp.[Et] . [ S ]
Km + [ S ]

Dividiendo numerador y denominador entre [S]

V =

Kp . [Et]
Km + 1
S

Relacin de
Proporcionalidad
Directa V y [E]

Formas de expresar la inhibicin

3) Inhibicin fraccional (i)
La actividad relativa es una fraccin con respecto a la Vo

i = (1 - Vi/ Vo )
i = 1 - Ar

4) Grado porcentual de inhibicin

( i%)
i %= (1-Ar)* 100